TGF-α对鼻咽癌CNE2细胞作用的蛋白质组学分析

目的通过蛋白质组学方法观察转化生长因子α（transforming growth factor α，TGF—α）对鼻咽癌细胞系CNE2蛋白质表达谱的影响，从而解析表皮生长因子受体（epithelial growth factor receptor，EGFR）在鼻咽癌中的作用信号途径。方法以TGF—α作为配体，激活EGFR信号通道，采用无血清细胞培养法，将鼻咽癌CNE2细胞在有或没有TGF-α作用下培养24h，收集2组细胞总蛋白，通过比较蛋白质组学方法分析蛋白表达谱的变化，质谱鉴定差异蛋白质。结果鉴定了16个差异蛋白，包括EF—Tu precursor、triosephosphate isomerase、nucleoside—diphosphate kinase、annexin A1、hemoglobin beta chain、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H等，它们广泛参与了信号转导、细胞凋亡与侵袭转移等重要生理过程。结论EGFR可能通过上述差异蛋白所介导的信号转导途径而发挥作用，为鼻咽癌细胞EGFR信号通路的深入研究提供了依据。     

人恶性肿瘤中染色体9p21-p22区带的杂合性丢失

人类恶性肿瘤中常发生染色体杂合性丢失,从而丢失抑癌基因的某一个等位基因.人类9号染色体特别是该染色体的9p21-p22区带,在多种肿瘤中都存在着染色体的杂合性丢失.在定位克隆抑癌基因的过程中,对肿瘤中高频率染色体杂合性丢失的分析是对抑癌基因进行定位并最终发现和克隆该类基因的先决条件之一.     

几种癌细胞株中脆性组氨酸三联体基因的初步研究

人类多种常见肿瘤中存在染色体 3ｐ14区域等位基因杂合性丢失 (ｌｏｓｓｏｆｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ,ＬＯＨ) ,提示该区域内可能存在一个或以上抑瘤基因。 1996年Ｏｈｔａ等[1] 在家族性遗传性肾细胞癌中克隆了一个位于 3ｐ14.2区域的基因 ,称为脆性组氨酸三联体 (ｆｒａｇｉｌｅｈｉｓｔｉｄｉｎｅｔｒｉａｄ ,ＦＨＩＴ)。该基因跨越ＦＲＡ3Ｂ脆性位点和与遗传性肾细胞癌相关的ｔ(3;8)移位断裂点 ,含10个外显子 ,其中第 5～ 9号外显子形成编码框 ,起始密码子ＡＴＧ位于第 5号外显子 ,组氨酸三联体构成蛋白功能域 ,由第 8号外显子编码…     

蛋白质组学技术分析5-aza-2dC处理白?∠赴鸋L-60前后的差异表达蛋白质

目的：研究甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycitydine, 5-aza-2dC)对人急性髓系白血病细胞HL-60细胞蛋白质表达谱的影响，探讨5-aza-2dC抗急性髓系白血病作用机制。方法：采用二维凝胶电泳（2-DE)技术分离5-aza-2-dC处理与未处理HL-60细胞的总蛋白质，PDquest 图像分析软件识别差异蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点。 然后采用Western 印迹检测差异蛋白质半乳糖凝集素1（Galectin-1） 在药物处理与未处理HL-60细胞中的表达水平。结果： 建立了5-aza-2dC 处理与未处理HL-60 细胞蛋白质的2-DE 图谱，识别了35个差异表达的蛋白质点，鉴定了27个差异表达的蛋白质，其中包括Galectin-1在内的21个蛋白质在5-aza-2dC 处理后的HL-60 细胞中表达上调，6个蛋白质表达下调或缺失。Western 印迹结果证实Galectin-1在5-aza-2dC 处理HL-60细胞中表达上调。结论：21个表达上调蛋白质的编码基因可能是HL-60细胞的甲基化失活基因，它们可能与急性髓系白血病发病以及5-aza-2-dC抗人急性髓系白血病细胞作用有关     

EB 病毒有瘤基因吗?

EB 病毒由 Epsten 等(1964年)从 Burk-itt 氏淋巴瘤中检测出来的,是一种致癌性疱疹病毒,属 DNA 肿瘤病毒范畴。它除引起传染性单核细胞增多症外,尚与人类 Burkitt 氏淋巴瘤、鼻咽癌(NPC)、及弥漫性多克隆 B-细胞淋巴瘤有密切的病因学关系。但是,由于EB 病毒感染 B 细胞的宿主范围较窄,仅限于人和部分美洲猴;同时 EB 病毒的复制受到 B细胞容许性(permissivity)的限制。所以长期以来对 EB 病毒作用的遗传学研究进展缓慢,随着 DNA 重组技术及基因转移方法的广泛应用,这些限制被克服,人们对 EB 病毒基     

一种有效的基因转移技术——原生质体融合法 Ⅰ 大肠杆菌的原生质体制备

原生质体融合法系一有效的基因转移技术,其先决条件是有效地除去细菌的胞壁,制备好原生质体。本文对大肠杆菌形成原生质体的条件进行了初步探讨。结果表明:对含质粒pSV_2 gpt的大肠杆菌HB101而言,以0.3％浓度的溶菌酶,37℃,作用45min,即可制备理想的原生质体,为进一步进行基因转移打下基础。     

用BrdU作探针检测RA对HL-60细胞的诱导分化作用

用溴脱氧尿嘧啶核苷(Erdu)作探针标记人早幼粒白血病细胞株HL-60,并用抗Brdu的单克隆抗体(Anti-Brdu)和免疫组化法追踪观察HL-60细胞在全反式维甲酸(RetinoiolAcid,RA)作用下走向分化成熟的可能性。实验发现,经RA处理前,Brdu标记细胞均为早幼粒细胞,经RA处理5天后,Brdu标记细胞中有21％以上分化成熟为杆状核,分叶核粒细胞。由于这些细胞已处于终末分化期,不再进行DNA合成,故细胞中的Brdu是在细胞分化早期掺入的,从而直接证明HL-60细胞可在RA作用下走向分化成熟。     

体外培养人胚鼻咽上皮的生物学特性观察——Ⅴ.生长动力学研究

本文报告用测定生长曲线和氚胸腺嘧啶核甙两次标记法研究人胚鼻咽上皮原代培养物的生长特性。培养物群体倍增时间为2.43±0.16天,DNA合成期为4.93±0.61 小时,标记指数为12.41±1.43％,细胞周期时间为1.75±0.23天。本文就这些细胞动力学参数的意义作了分析讨论。