缺血预处理对兔肺缺血再灌注性损伤的蛋白质组学研究

目的观察缺血预处理对兔肺缺血再灌注性损伤的蛋白质变化，探讨其可能的肺保护机制。方法12只家兔，随机分为预处理组和对照组，每组6只。对照组经历单纯的缺血再灌注损伤，预处理组在缺血再灌注前予以缺血预处理。以二维电泳分离肺组织中的全部蛋白质，应用PDQuest软件寻找差异表达的蛋白质点并以MALDI-TOF质谱仪和Mascot软件对其鉴定。结果研究发现了35个明显差异表达的蛋白质，包括磷酸肌醇3激酶△催化亚单位在内的17个蛋白质达到了鉴定。结论通过磷酸肌醇3激酶信号传导通路抑制炎性反应可能是缺血预处理的保护机制。     

人鼻咽上皮细胞CYP2E1 cDNA克隆及序列分析

目的 :比较正常人胚鼻咽上皮 (HENE)细胞、二亚硝基哌嗪转化的人胚鼻咽上皮 (HENE)所建的细胞系( 742 9)、鼻咽癌细胞系 (HNE1)细胞色素P45 0 2E1(CYP2E1)mRNA表达序列 ,探讨CYP2E1在鼻咽癌变过程中的作用特点。方法 :采用RT PCR方法和DNA重组技术从HENE ,742 9,HNE13种细胞系中克隆的CYP2E1cDNA片段 ,测序并分析其结构改变特征。结果 :①与HENE 2E1比较 ,742 9 2E1存在 846位 (A→T)、90 1位 (A→G)两个点突变 ;HNE1 2E1存在 90 1位 (A→G)一个点突变。②与成人肝来源的CYP2E1CDs序列 (GenBank号为J0 2 843)比较 ,发现HNE1 2E1序列与其完全匹配 ;HENE 2E1序列存在 90 1位 (G→A)点突变。但上述突变对应部位氨基酸序列并无改变。结论 :鼻咽癌发生过程中CYP2E1基因cDNA序列仅存在少数无义突变 ,表现出其高度保守性。     

二亚硝基哌嗪对大鼠鼻咽鳞状上皮更新的影响

本文用放射自显影术对正常大鼠以及二亚硝基哌嗪(简称二亚)处理鼠诱癌过程中鼻咽鳞状上皮细胞的更新进行了观察。实验表明,正常情况下,大鼠鼻咽底壁鳞状上皮细胞移动的变化是“S”形曲线,其方程式为 y=ap_0/bp_0 (a-bp_0)e~(-a(x/72));二亚处理后,大鼠鼻咽底壁鳞状上皮细胞移动表现为抛物线,其方程式为 y=a bx cx~2。同时对食道、颊部粘膜的细胞移动进行了观察。     

瘤基因——生命必需的基因

人们通过对反转录病毒的研究,发现反转录病毒携带的许多基因中,只有一个基因与肿瘤的迅速发生有关,并称之为V-onc。以此为探针,在正常细胞中找到了与V-onc 同源的DNA 顺序。相应地称为C-onc。随着对C-onc 的染色体定位、蛋白产物及基因表达的研究,已知从不同种属转导的C-onc,一般     

HLCDG1基因siRNA表达质粒的构建及其对A549细胞周期和增殖的影响

目的:本研究旨在应用RNA干扰技术，诱导转基因肺癌细胞HLCDG1基因沉默并观察其对肺癌细胞周期和增殖的影响。 方法:构建HLCDG1基因短小干扰双链RNA表达载体，筛选HLCDG1基因表达沉默的肺癌细胞株并应用MTT和流式细胞仪分析这一肺癌细胞株增殖和细胞周期分布状况。 结果:根据siRNA表达载体的设计原则，构建了能在哺乳动物细胞稳定表达的siRNA载体5个（4个位点匹配实验组和1个位点错配对照组），依次命名为pHL-si-1、pHL-si-2、pHL-si-3、pHL-si-4 和 pHL-si-c。上述载体分别与表达HLCDG1的重组体pcDNA3.1(+)/HLCDG1共转染A549细胞，筛选到一株共转染pHL-si-1载体和pcDNA3.1(+)/HLCDG1重组体的A549细胞，它几无HLCDG1基因表达，这株细胞暂命名为A549-HLCDG1-si-1。MTT和流式细胞仪分析表明，A549-HLCDG1-si-1细胞增殖能力明显提高，进入S期和G2+M期增多，滞留G1期减少。 结论:采用RNAi技术特异阻断HLCDG1基因表达，验证了HLCDG1基因对A549肺癌细胞有生长抑制作用。     

染色体3p14.2-14.3区域一个与鼻咽癌相关新基因的克隆

目的：在染色体３ｐ１４．２－１４．３区域寻找与鼻咽癌发生发展密切相关的新基因。方法：运用ＲＡＣＥ方法获取基因全长ｃＤＮＡ序列,ｐＥＧＦＰ质粒和脂质体共转染ＣＯＳ７细胞进行新基因的蛋白质定位。结果：在３ｐ１４．２－１４．３区域克隆了一个在鼻咽癌中表达不调新基因的全长ｃＤＮＡ序列,被命名为ＣＰＣＤＲ１,编码１０９个氨基酸,其蛋白质聚集在细胞核内,其基因组由２个外显子和１个内含子组成。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印     

人体肿瘤与染色体的关系

染色体与肿瘤的关系一直受到重视,随着细胞遗传学和分子遗传学的发展,分子生物学方法的广泛应用以及癌基因、抗癌基因的研究,人们对遗传改变在肿瘤发生发展过程中的重要性认识更加深刻而全面,这方面国内已有不少文献综述发表,但它们各有侧重,资料尚不系统全面,为此本文从两个范畴提供较为详细的资料。一是“肿瘤有关的染色体异常”,如表1及染色体左侧所示,这些染色体区带常是某些特殊的造血系统肿瘤或实体癌发生基因缺失、转位等染色体重排     

染色体3p12-14区域一个肺癌负相关新基因的初步鉴定

染色体 3ｐ的纯合性缺失 (ｈｏｍｏｚｙｇｏｕｓｄｅｌｅｔｉｏｎ ,ＨＤ)和杂合性丢失 (ｌｏｓｓｏｆｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ ,ＬＯＨ)与包括肺癌、鼻咽癌等在内的多种人类实体肿瘤相关。 3ｐ1 2 - 1 4、3ｐ2 1、3ｐ2 5- 2 6是肺癌中缺失频率最高的染色体位点。有研究证明 ,3ｐ的缺失是肺癌变过程中最早发生的遗传学改变 ,发生在肺癌变过程的增生、间变期病变 ,提示染色体 3ｐ可能存在多个与肺癌癌变启动机制相关的抑瘤基因。目的和方法 :为了鉴定、克隆人类染色体 3ｐ1 2 - 1 4区域与肺癌相关的新基因。我们利用生物信息学方法 ,通过…     

细胞移植及其在耳蜗疾病中的应用

本文综述了近年来体细胞移植技术在心脏、中枢神经系统、内分泌系统、肝脏疾病中应用,阐述了内耳体细胞移植技术的可行性与存在的问题,提出了细胞移植技术对耳聋防治可能具有广阔的应用前景.     

基于生物质谱的定量蛋白质组学分析策略

生物质谱技术作为蛋白质组学研究的关键技术 ,在定量蛋白质组学分析中起着十分重要的作用。目前基于生物质谱的定量蛋白质组学分析策略主要有 :荧光染色差异显示双向电泳、同位素代谢标记、同位素亲和标记 ,氨基酸化学标记和肽质图谱差异比较等