AML1-ETO阳性急性髓系白血病患者c-kit突变及其临床意义

本研究探讨AML1-ETO融合基因阳性急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者c-kit突变的发生情况及其临床意义。采用PCR和直接测序法检测31例AML1-ETO阳性AML患者c-kit基因17外显子突变的发生情况,并分析c-kit基因突变与患者的临床、实验室特征以及疗效的关系。结果表明:31例患者中14例检测到c-kit突变,突变率为45.16%,突变组男性患者的比例为71.43%、初诊时白细胞计数>10×109/L患者的比例为78.57%和伴有髓外浸润患者的比例为21.43%,均明显高于无突变组(29.41%、41.18%、0%,P=0.020,0.036,0.045),两组患者的年龄和骨髓原始细胞比例无明显差异(P=0.437和0.510)。c-kit突变和无突变组化疗完全缓解(CR)率(64.29%∶80%)和复发率(58.33%∶21.43%)的差异无统计学意义(P=0.344和0.054),而死亡率(57.14%)在c-kit突变组明显高于无突变组(20%,P=0.039)。结论:AML1-ETO阳性AML患者c-kit突变常见,突变患者预后差,常规检测c-kit突变对患者的危险度分层、预后评估和选择有效治疗方案有重要意义。     

慢性移植物抗宿主病时的T淋巴细胞受体Vβ基因表达

目的 探讨T淋巴细胞受体（TCR）Vβ基因在慢性移植物抗宿主病（cGVHD)时的表达。方法 应用逆转录聚合酶链反应扩增9例cGVHD患者的外击血单个核细胞的24个TCR Vβ亚家族的CDR3，了解患者TCR Vβ的表达情况，并对3例GVHD患者使用霉酚酸酯（MMF）前后TCR Vβ基因表达进行分析。结果 9例患者中，7例表达TCR Vβ3，6例表达Vβ2、Vβ8和Vβ23，其它分散在不同的Vβ亚家族中；3例使用MMF者，在GVHD发生前，有TCR Vβ3及其它亚家族基因表达，MMF治疗后，GVHD得以缓解，Vβ3不表达，当GVHD再次发生时，基因复又表达。结论 cGVHD的发生可能与TCR Vβ3、Vβ2、Vβ8及Vβ23（尤其是Vβ3）基因的表达有关。     

以泰能为第二线药治疗免疫功能低下血液病患者继发感染的疗效观察

为评价泰能作为第二线用药，单用或伍用其它抗生素治疗免疫功能低下血液病患者继发严重感染的疗效及副作用，７８例患者接受了泰能天３ｇ的治疗。     

血浆置换治疗浆细胞病高M蛋白血症

目的;探讨血浆置换（ＰＥ）治疗浆细胞病变Ｍ蛋白血症的疗效,适应证和方法。方法：对７例浆细胞病变Ｍ蛋白血症患者进行ＰＥ治疗,治疗前后监测ＩｇＧ,ＩｇＡ,ＩｇＭ及血象,记录每次ＰＥ量,ＰＥ过程中出现的不良反应,追踪ＰＥ后１￣６个月内的Ｍ蛋白相关并发症的发生率。结果：每次置换后Ｍ蛋白下降４０．２４％（Ｐ〈０．０５）,Ｍ蛋白去除率与ＰＥ量呈正相关,置换前Ｍ蛋白值与置换后Ｍ蛋白下降值呈正比关系,ＰＥ后１￣６     

rhG-CSF对正常供者淋巴细胞亚群及其活化的影响

 目的　研究人重组粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)对供者淋巴细胞亚群及其表面活化标志的影响。方法　应用流式细胞术检测 2 2例异基因造血干细胞供者rhG CSF动员前、中、后外周淋巴细胞亚群的比例及T淋巴细胞活化指标的变化。结果　rhG CSF动员第 4天 ,淋巴细胞数、B淋巴细胞、CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 细胞绝对值均明显升高 ;CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 细胞的比例及CD4 /CD8值动员前、中、后无明显变化。除CD4 + CD2 5 + 、CD4 + CD4 5RO+ 表达动员后降低外 (且于动员停止后第 7天恢复至动员前水平 ) ,其余活化标志的表达无明显变化。结论　rhG CSF可暂时性升高正常供者的淋巴细胞数及降低T淋巴细胞活化水平 ,但于停止动员后 1周恢复至动员前水平     

骨髓增生异常综合征患者地西他滨治疗后DNA甲基化水平变化

目的 了解骨髓增生异常综合征(MDS)患者地西他滨治疗后DNA甲基化水平的变化.方法 7例MDS患者难治性贫血伴原始细胞增多Ⅰ型或Ⅱ型(RAEBⅠ/Ⅱ)接受规律的地西他滨治疗,5天方案(4例)和3天方案(3例),每个疗程分4个时间点采集其外周血,实时荧光定量聚合酶链反应( real time-Q-PCR)方法检测外周血P15和CDH1基因的甲基化水平.结果 用药前3例患者(例2、例4和例7)P15甲基化水平较高(20％～65％),CDH1均较低(0.5％～5％).无论5天还是3天方案,用药前甲基化水平越高,用药后下降越明显,患者用药第5/7天后P15、CDH1甲基化水平下降幅度最大,达20％～60％,P15可维持在下降后的水平,在随后的治疗中未再出现明显的下降,但是CDH1的波动较大,用药期间CDH1甲基化水平可升至≥用药前水平.目前的数据表明甲基化的变化与血象变化不一致.应用重复测量方法分析5天与3天方案两个基因甲基化水平变化,两种不同方案组间去甲基化水平差异无统计学意义(均P ＞0.05);有血液学改善的患者与未改善患者的去甲基化程度差异无统计学意义.结论 地西他滨治疗后P15和CDH1的甲基化水平均有不同程度降低,但甲基化水平与治疗方案和疗效无关.     

凋亡抑制基因aven在急性髓系白血病的表达及其临床意义

本研究旨在探讨AML患者凋亡抑制基因avertmRNA的表达情况,分析其临床意义,为预后评估提供实验依据。应用实时荧光定量PCR方法检测69例初诊AML患者外周血白细胞avenmRNA的表达水平,分析avenmRNA的表达水平与患者的年龄、性别、白细胞数,血小板计数、血红蛋白和LDH水平、外周血和骨髓的原始细胞比例、FAB分型、患者的疗效和复发的关系,21名正常人的外周血作为对照。结果表明：69例初诊AML患者avenmRNA表达水平的中位值为37．2（11．72—178．93）％,正常人外周血白细胞aven mRNA表达水平中位值为28．81（10．81-50．98）％,AML患者avenmRNA表达水平明显高于正常人（p=0．006）。avenmRNA的表达水平与患者的年龄具有明显的相关性（r=0．25,P=0．039）,以AML患者中位年龄（44岁）为界分为2组,年龄大于／等于44岁组aven mRNA表达水平[中位值50．08％,（18．88—152．02）％]明显高于年龄小于44岁组[中位值32．41％,（11．72—178．93）％],（P=0．018）。aven mRNA的表达水平与患者Hb水平和FAB分型具有明显的相关性（r=0．29,P=0．019;r=0．253,P=0．036）。2个化疗疗程后avenmRNA表达水平低于中位值组的完全缓解率（25／30,83．33％）高于avenmRNA表达水平高于中位值组（21／30,70％）,但差别无统计学意义（P=0．22）。复发患者avenmRNA的表达水平与无复发者相比无明显升高（P=0．076）。结论：初诊AML患者凋亡抑制基因avenmRNA的表达水平明显升高,可能与AML的发病有关,但尚未发现基因avcilmRNA的表达情况与疾病的疗效和复发之间的关系。     

实时定量PCR检测骨髓增生异常综合征患者多个基因甲基化水平

Objective To analyze the promoter methylation levels of p15、 CDH1、 DAPK and HICI genes of patients with myelodysplastic syndrome (MDS) and explore the relationship between the level of methylation and clinical features. Methods DNA methylation levels of p15、CDH1 、DAPK and HICI in peripheral blood (PB) or bone marrow (BM) samples from 52 MDS patients were detected by real-time quantitative PCR. The correlation of the methylation level with clinical features and hematological findings was analyzed. 38 de novo AML patients and 46 normal individuals served as controls. Results The methylation levels of p15 、CDH1 、DAPK and HICI were 16.23 ± 21.69,6.59 ±9.39,0. 14 ±0. 11 and 7.81 ± 9.70 in BM,and 14.96 ± 20.16,6.00 ± 9.26,0.12 ± 0. 14 and 6.74 ± 9.72 in PB, respectively from 18 MDS patients,and the difference between BM and PB was not statistically significant (P ＞0.05). The methylation levels of p15 (14.70 ± 18.17) and CDH1 (6.61 ±8.79) genes in high risk (RAEB Ⅰ / Ⅱ) MDS were significantly higher than in low risk (RCMD/RARS/5q -, p15: 1.99 ± 1.59, CDH1: 1.23 ± 1.14 and RCMD, p15:3.02 ±3.42, CDH1:1.53 ±2.06) MDS or control (p15:1.69 ± 1.82, CDH1: 1.01 ± 1.12) (P ＜0.05).The methylation levels of DAPK gene had no difference among subtypes of MDS, and that of HIC1 gene only differed between RAEB Ⅰ / Ⅱ (9.16 ± 11.95) and control (2.49 ± 2.26) (P = 0. 042). The difference of methylation levels of p15 、CDH1 、DAPK and HICI in BM was statistically significant among subtypes of MDS (P=0. 001, 0. 003 ,0. 039,0. 023 , respectively). And so did of p15 and DAPK in PB (P=0. 013, 0.006,respectively). The methylation level of p15 and CDH1 was significantly correlated with IPSS classification and blasts percentage in BM. Conclusions p15 and CDH1 genes are special hepermethylation genes in MDS.Methylation level of HIC1 gene showed an upward tendency from low risk to high risk MDS.