人宫颈癌组织CDH1和PAX1基因甲基化研究

目的:检测上皮型钙黏附素(E-cadherin,CDH1)基因和配对盒基因家族PAX1基因在宫颈癌组织及人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染的正常宫颈组织、宫颈炎组织、宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)Ⅰ组织、CIN Ⅱ～Ⅲ组织和宫颈癌组织中的甲基化情况,评估是否可将其作为临床诊断的分子标志物.方法:应用甲基化特异性聚合酶链反应法(methylation specific PCR, MSP)对HPV感染的正常宫颈组织、宫颈炎组织、CINⅠ组织、CIN Ⅱ～Ⅲ组织以及宫颈癌组织中的CDH1和PAX1基因进行甲基化检测.结果:HPV感染的正常宫颈组织、宫颈炎组织和CINⅠ组织中未检出CDH1基因甲基化;CINⅡ～Ⅲ组织中检出CDH1基因甲基化2例(13.3%),宫颈癌组织中检出CDH1基因甲基化9例(22.5%),与HPV感染的正常宫颈组织比较差异均有统计学意义(P＜0.05).HPV感染的正常宫颈组织和宫颈炎组织中未检出PAX1基因甲基化,CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ和宫颈癌组织的PAX1基因甲基化阳性率分别为13.3%、46.7%和87.5%,CINⅡ～Ⅲ组织与CINⅠ和宫颈癌组织比较差异均有统计学意义(P＜0.05).CINⅠ组织、CINⅡ～Ⅲ组织和宫颈癌组织的CDH1和PAX1基因甲基化总阳性率分别为13.3%、60.0%和97.5%.结论:CDH1和PAX1基因甲基化,尤其是PAX1基因甲基化对于宫颈癌临床诊断具有潜在价值.     

高危型人乳头瘤病毒检测在宫颈上皮内瘤变筛查中的价值

目的探讨人乳头瘤病毒DNA（HPVDNA）检测在宫颈癌及癌前病变诊治中的筛选价值。方法我院妇科门诊宫颈疾病患者358例,均行宫颈薄层液基细胞学（TCT）检查、HPVDNA检测以及阴道镜检查并行多点活检,同时行高危型HPVDNA阳性检测,以宫颈病理诊断为金标准。结果3种检测方法敏感度、特异度、准确率、阳性预测值、阴性预测值、约登指数依次为：HPV检测：81．40％、83．82％、82．24％、61．40％、93．44％、65．22％,TCT：66．28％、94．49％、87．71％、79．17％、89．86％、60．77％,阴道镜检测：72．62％、92．70％、87．99％、75．30％、91．70％、60．61％。HPV检测灵敏度最高为81．40％,阴道镜次之为72．62％,TCT检测最低为66．28％。HPV检测与TCT检测比较,差异有统计学意义（X^2=5．09,P〈0．05）,TCT检查为意义不明的不典型鳞状细胞如伴高危型HPVDNA阳性,宫颈活检阳性率为66．67％（16／24）,高于高危型HPVDNA阴性的3．70％（1／27）,差异有统计学意义（X^2=22．67,P〈0．05）。结论HPVDNA检测宫颈病变敏感性高,综合评价效果较好。尤其对宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ以上阳性的检出率很高。而TCT检测特异度很高,对阴性预测较准,两者联合筛查结合阴道镜的辅助下进行病变区取材活检,能有效防止宫颈病变的漏诊和误诊,HPVDNA检测尤其对TCT检测为意义不明的不典型鳞状细胞的筛选更有意义。     

p16和CDH1基因异常甲基化在宫颈组织中的表达及其意义

目的:分析宫颈癌和宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)组织中p16和CDH1基因异常甲基化的变化,评价该指标在宫颈癌中的意义。方法:用甲基化特异性聚合酶链反应法(methylation-specific PCR,MSP)检测CINⅠ40例、CINⅡ～Ⅲ40例、宫颈癌40例组织中p16和CDH1基因的异常甲基化。取正常宫颈组织20例作为对照。结果:(1)p16和CDH1甲基化在正常组未见表达;(2)p16、CDH1甲基化阳性率:CINⅡ、Ⅲ组明显高于CINⅠ组,差异有统计学意义(22．4%vs 2．5%,P＜0．05; 35．0%vs 5．0%,P＜0．05),宫颈癌组高于CINⅡ、Ⅲ组,但差异无统计学意义(40．0% vs 22．4%,P＞0．05;57．5% vs 35．0%,P＞0．05);宫颈癌组高于相应CINⅠ组,差异有统计学意义(40．0% vs 2．5%,P＜0．05;57．5% vs 5．0%,P＜0．05);(3)p16和CDH1甲基化总阳性率(任何一个基因出现甲基化即为阳性):CINⅡ、Ⅲ组明显高于CINⅠ组,差异有统计学意义(40．0% vs 5．0%,P＜0．05),宫颈癌组高于CINⅡ、Ⅲ组,差异有统计学意义(70．0% vs 40．0%,P＜0．05)。结论:p16和CDH1基因启动子区异常甲基化与宫颈癌的生物学行为相关,它可能有助于宫颈癌的早期辅助诊断和治疗。