白藜芦醇对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的保护作用

目的探讨白藜芦醇对丙烯醛雾化吸入构建的慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型肺组织的抗炎抗氧化作用。方法用丙烯醛雾化吸入构建COPD大鼠模型。不同浓度的白藜芦醇(5、15、45 mg/kg)预处理COPD大鼠模型,逆转录PCR法检测不同浓度白藜芦醇对COPD大鼠模型肺组织炎性蛋白酶诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA表达影响,用化学比色法检测不同浓度白藜芦醇干预下COPD大鼠模型肺组织中谷胱甘肽(GSH)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量变化。结果不同浓度的白藜芦醇显著抑制COPD大鼠模型肺组织一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的mRNA水平,上调大鼠肺组织中内源性巯醇抗氧化物还原型谷胱甘肽(GSH)水平,减少丙二醛(MDA)含量。结论白藜芦醇通过降低促炎因子水平、上调内源性巯醇抗氧化物含量,从而对COPD模型大鼠肺组织发挥抗炎、抗氧化作用。     

天麻素抑制脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞的自噬

目的 探讨天麻素(Gas)在脂多糖 (LPS) 诱导的人脐静脉内皮细胞 ( HUVECs) 自噬中的作用。方法 用不同浓度的Gas(5、10、20、50μmol/L) 预处理 HUVECs 1h,再加入1mg/L LPS共培养 12 h后,分别提取细胞总蛋白及mRNA,采用 Western blotting 及 RT-PCR 检测 Beclin-1、ATG5 及 LC3的表达变化;采用丹酰尸胺( MDC) 染色检测细胞中自噬小体(autophagosome)的表达变化;采用MTT检测 HUVECs 生存率的变化。 结果 LPS 诱导 HUVECs 产生自噬;Gas 预处理后自噬水平明显降低且呈剂量依赖性;与此同时细胞的生存率明显增加。 结论 LPS诱导 HUVECs 产生自噬;Gas 通过抑制由LPS 诱导产生的自噬,提高 HUVECs 的生存率。     

广州市售婴幼儿奶粉减钾总β放射性比活度分析

目的 分析测定广州市售进口和国产婴幼儿奶粉中减钾总β放射性比活度。方法 利用BH1227低本底α、β测量仪进行测量,参考国际原子能机构(IAEA)规定的食品中总β操作干预水平(OIL)进行比较。结果 进口和国产婴幼儿奶粉中的减钾总β放射性比活度平均值分别为35.37Bq/kg和39.79Bq/kg。结论 进口和国产婴幼儿奶粉中减钾总β的放射性比活度低于IAEA对食品中总β放射性浓度限制标准,食用是安全的。     

表皮生长因子受体介导的PLC-g1水解PIP2的数学建模

目的探讨表皮生长因子刺激下磷脂酶C-g1(PLC-g1)水解细胞膜上PIP2(PIP2)的动力学特性。方法根据质量作用定律,利用微分方程对PIP2的代谢途径进行数学建模。结果建立了PIP2水解过程中关键产物浓度的微分方程,分析了各个参数对这些水解产物的影响。结论这个数学模型为进一步描述PIP2代谢循环的生物学特征和主要产物间浓度依赖关系的动态变化奠定了基础。     

人全长PLCγ1基因真核表达载体的构建及鉴定

目的构建人全长PLCγ1基因真核表达载体,以便进一步研究PLCγ1的作用及其机制。方法自行设计一对带有HindⅢ和NotⅠ酶切位点的引物,采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCγ1cDNA(3878bp),纯化后,经HindⅢ-NotⅠ酶切,插入真核表达载体pLNCX2中,构建重组质粒pLNCX2/PLCγ1。通过PCR,限制性酶切分析及DNA直接测序对所构建的重组质粒进行鉴定。同时经瞬时转染后,利用RT-PCR及Westernblotting转染后LoVo细胞中PLCγ1的表达。结果RT-PCR产物经琼脂糖电泳分析所得片段大小与预期相符(3878bp)。重组质粒经HindⅢ-NotⅠ酶切后,得到3878bp(PLCγ1基因)及6100bp(载体pLNCX2)两个片段,同时重组质粒经HindⅢ-BglⅡ酶切后,得到约1300bp及约8500bp两个片段,与预期一致。DNA测序也证实了重组质粒的正确。经RT-PCR和Westernblot分析证实转染pLNCX2/PLCγ1的LoVo细胞中PLCγ1的表达均高于转染空质粒pLNCX2的LoVo细胞及未转染的LoVo细胞。结论成功构建了人全长PLCγ1基因真核表达载体pLNCX2/PLCγ1,为进一步研究PLCγ1的作用奠定了基础。     

支气管肺泡灌洗液中的炎症因子在呼吸机相关性肺炎患者中的动态变化

目的通过观察呼吸机相关性肺炎(VAP)患者的支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子的变化,同时检测血清中的相应炎症因子以预测肺部感染状况、疾病的发展趋势和预后的关系。方法前瞻性研究,随机选择2005年3月-2009年3月收住MICU、SICU、NICU建立人工气道进行机械通气的患者80例作为研究对象,入科后即刻用纤维支气管镜行机械通气时的气道管理,并进行支气管肺泡灌洗(BAL),采集BALF,同时采血,检测4个时相的血清、BALF的白介素-8(IL-8)、前降钙素(PCT)、C反应蛋白(CRP)。结果患者血清和BALF中IL-8、CRP、PCT的动态变化基本一致,即在确诊VAP时呈现高峰,随着感染的控制浓度逐步下降;BALF中IL-8在肺局部有腔室化趋势;血清中CRP的浓度始终高于BALF中的浓度,但两组间差异无统计学意义;BALF中的PCT始终高于血清,两组间差异有统计学意义(P0.01);PCT在VAP患者的BALF中能较IL-8、CRP提前升高,但IL-8、CRP明显下降后PCT仍然处于较高水平。结论 VAP患者的BALF与血清中的炎症因子有相关性,但PCTI、L-8在BALF中浓度较高,与疾病的预后密切相关,BALF中的PCT能较血清提前预示肺部感染状况。     

17-β雌二醇提高巯醇抗氧化物(酶)治疗脊髓损伤的作用

目的探讨17-β雌二醇治疗脊髓损伤的分子机制,为临床应用雌激素治疗脊髓损伤提供理论依据。方法成年雄性SD大鼠180只,采用改良的Allen法构建大鼠急性脊髓挫伤模型后经17-β雌二醇治疗,采用化学比色法测定脊髓组织中丙二醛(MDA)和内源性巯醇抗氧化物(酶):还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;免疫组织化学分析凋亡相关因子Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达变化。结果17-β雌二醇治疗组与脊髓损伤组比较,BBB评分明显增加;在多个时间点MDA含量明显降低;巯醇抗氧化物(酶)GSH、SOD和GSH-Px含量显著增加;Caspase-3和Bax表达的阳性细胞数明显减少;Bcl-2表达的阳性细胞数明显增加(P0.05)。结论大剂量的17-β雌二醇治疗可能通过调控内源性巯醇抗氧化物(酶),提高肢体运动功能,抑制细胞凋亡,从而减轻脊髓损伤程度。     

17-β雌二醇提高巯醇抗氧化物（酶）治疗脊髓损伤的作用 

目的 探讨17-β雌二醇治疗脊髓损伤的分子机制,为临床应用雌激素治疗脊髓损伤提供理论依据。 方法 成年雄性SD大鼠180只,采用改良的Allen法构建大鼠急性脊髓挫伤模型后经17-β雌二醇治疗,采用化学比色法测定脊髓组织中丙二醛（MDA）和内源性巯醇抗氧化物（酶）：还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量;免疫组织化学分析凋亡相关因子Caspase-3、Bcl2和Bax蛋白的表达变化。 结果 17-β雌二醇治疗组与脊髓损伤组比较,BBB评分明显增加;在多个时间点MDA含量明显降低;巯醇抗氧化物（酶）GSH、SOD和GSH-Px含量显著增加;Caspase-3和Bax表达的阳性细胞数明显减少;Bcl2表达的阳性细胞数明显增加（P<0.05）。 结论 大剂量的17-β雌二醇治疗可能通过调控内源性巯醇抗氧化物（酶）,提高肢体运动功能,抑制细胞凋亡,从而减轻脊髓损伤程度。     

活性氧在脊髓损伤中的作用及损伤机制

目的研究脊髓损伤(SCI)后脊髓组织中丙二醛(MDA)的动态水平变化和神经细胞凋亡及其凋亡相关因子表达的变化,探讨活性氧(ROS)在SCI后的作用及其分子机制。方法成年雄性大鼠132只,用改良的Allen法复制大鼠急性SCI模型,致大鼠脊髓(T10)中度挫伤,采用化学比色法测定不同时间段受损脊髓组织的MDA含量;免疫组织化学法分析受损脊髓组织区域凋亡相关因子Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达变化;荧光原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果SCI后6h,脊髓组织中MDA含量明显增高并维持到损伤后5d,期间在6h和3d出现两次高峰,7d基本恢复正常;SCI后6h脊髓组织中凋亡细胞开始增多,3d达高峰,以后逐渐减少,各时间点与假手术组比较有显著性的差异;Bcl-2和Bax蛋白损伤后6h开始有较多的表达,以后快速增多,5d达高峰,然后逐渐回落。Caspase-3蛋白在损伤后6h开始增多,3d达高峰,以后逐渐减少。3种凋亡相关因子在各时间点与假手术组比较有显著性差异;甲基强的松龙(MPSS)治疗组与SCI组比较:MDA含量、凋亡细胞数、凋亡因子Caspase-3和Bax表达减少,Bcl-2表达增加,并且在部分时间点有显著性差异。结论在SCI后ROS可能通过促进Caspase-3表达和降低Bcl-2/Bax之间的比值诱导神经细胞凋亡,从而加重了SCI继发性损伤。     

冠脉内移植自体骨髓单个核细胞对猪急性心肌梗死后心功能的影响

目的探讨冠脉内移植自体骨髓单个核细胞（BM—MNCs）对猪急性心肌梗死后心功能的影响。方法实验动物分为冠脉内移植BM—MNCs组（n=6）及冠脉对照组（n=5）,移植细胞数2×10^8。移植后4周观察心功能变化及冠脉侧支循环形成情况。结果冠脉内BM—MNCs移植后4周移植组左室射血分数[LVEF：（65．84±4．94）％]及短轴缩短率[FS：（43．21±5．49）％]明显高于对照组[LVEF：（47．21±6．32）％,FS：（27．31±4．07）％]（P〈0．01）,而左室舒张末压[LVDEP：（7．94±4．57）mmHg]明显低于对照组[（22．56±5．97）mmHg]（P〈0．01）,左室舒张末期内径[LVEDd：（27．27±2．38）mm]低于对照组[（37．82±6．96）mm]（P〈0．05）;移植组冠脉侧支循环形成较对照组明显;移植后1周血清bFGF及VEGF浓度明显高于对照组及术前水平（P〈0．01）。结论经冠脉移植BM—MNCs有助于改善左室收缩功能及舒张功能,有助于减轻心室重构。