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11.
阮庆国 《医学分子生物学杂志》1993,(5)
本文介绍利用固相法来进行限制性酶切位点的绘制,按照作者的方法,可以避免在得到单一末端标记DNA过程中的复杂工作,并且不需要使用放射性物质。作者在PCR反应中使用一个末端带有生物素标记的引物和一个不带有标记的引物来扩增所需的DNA片段。这些引物可存在于DNA片断中或载体侧翼的已知顺序中。得到的线状DNA将在一端带有生物素标记。然后线状DNA被连接在带有链霉亲合素的磁珠上,通过洗脱去掉杂质,再选择合适的限制性酶直接对结合在磁珠上的DNA进行部分酶切。上述方法与已建立的固相测序法相似。除了标上 相似文献
12.
运用位置克隆与同源筛选相结合的方法克隆了位于11p11的EXT2基因,并对20个EXT家系的37个病人进行了SSCP和测序分析。结果发现2个病人含有GG插入突变,证实了所克隆基因为EXT2基因。同时,运用同源筛选法克隆了EXT4基因,并将其定位于1p36.1带 相似文献
13.
阮庆国 《医学分子生物学杂志》1996,(4)
在人类基因组DNA中已发现5个CGG三核苷酸重复位点,每一个都可因过度扩增而产生叶酸敏感的脆性位点,但只有FRAXA和FRAⅡB CGG三核苷酸重复与特定的人类疾病相关。在脆性X综合征中出于FRAXA CGG三核苷酸的过度扩增而使FMR1基因的表达受到影响,这说明位于5′-UTR区域的三核苷酸重复可能具有重要的功能。 相似文献
14.
阮庆国 《医学分子生物学杂志》1996,(1)
脆性X综合症是一种常见的引起智力低下的遗传病,在几乎所有的病人中FMR1基因的5′非转 译区都存在着(CGG)n的扩增,重复次数高达230~1000,而在正常人中则为30左右。早期的研究发现,由于(CGG)n的过度重复导致FMR1基因异常甲基化和抑制转录,但是转录受到抑制是否是FMR1蛋 相似文献
15.
口服免疫耐受是指通过口服抗原而在肠道中诱导的一种特殊类型的外周耐受。机体可通过多种方式来建立口服免疫耐受,其中调节性T细胞在维持口服免疫耐受的过程中发挥着关键作用。调节性T细胞可通过分泌抑炎因子和接触依赖等机制来抑制肠道中的免疫反应,从而维持对膳食组分和肠道微生物群的免疫耐受。我们总结了调节性T细胞和口服免疫耐受的相关性、肠道调节性T细胞的分类和稳定性以及调节性T细胞在肠道的积累机制等方面的研究进展。 相似文献
16.
阮庆国 《医学分子生物学杂志》1996,(6)
近几年来荧光原位杂交(FISH)技术得到了迅速发展,例如联合使用荧光异疏氰酸盐(FITC)或若丹明异硫氰酸盐的avidin-biotin系统和敏感的显微图像数字处理系统。最近有报道利用一种新的染料,3-羟基-N-2′-联二 苯-2-萘亚甲基胺磷酸酯(HNPP)和碱性磷酸酶在组织和中期相染色体上进行FISH杂交。在该方法中,脱磷酸化的HNPP与重氮化盐结台成为一种橙色的荧光混合物,本文报道利用该方法来进行基因定位。 相似文献
17.
阮庆国 《医学分子生物学杂志》1997,(1)
自从1981年Scalenghe等显微切割了果蝇多线染色体以来,该方法已经有了很大的改进。特别是1989年Ludecke等报道利用玻璃针和显微操作器在倒置显微镜下酶促扩增所切割区域的DNA,该方法对于那些基因或基因产物未知的遗传病进行位置 相似文献
18.
基因突变分析技术综述 总被引:4,自引:0,他引:4
基因突变分析是确定某一未知基因与某遗传病之间关系的关键步骤,也是临床上对病人进行基因诊断的重要手段,本文对19种基因突变分析技术进行了分类综述,特别对近几年发展起来的几种新技术进行了详细介绍,并讨论了毛细管电泳在基因突变检测中的应用 相似文献
19.
20.
分离和鉴定人类遗传病的致病基因是人类基因组计划的一个重要目标。由于克隆基因工作的复杂性和艰巨性,迄今为止只克隆到26种遗传病的致病基因。本文分类综述了克隆基因的几种策略,并对它们的优点和局限性进行了讨论。 相似文献