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目的研究湖南省壮族人群FraX中不稳定DNA序列的多态性,建立一种快速筛查FraX中FMR-1动态突变的方法,为提高遗传咨询和诊断水平奠定基础。方法采用经典的PCR-Southem blot法对156例X染色体FRAXA位点(CGG)n重复序列拷贝数进行测定并与PCR-序列分析胶银染法进行比较。结果(CGG)n重复序列范围为6~57,高峰为29;发现一男性携带者,CGG重复数为57;PCR-序列分析银染法结果与PCR—Southerm blot法结果完全一致,从PCR扩增到产物检测只需4,5h即可完成。结论壮族人群(CGG)n频率分布高峰为29,其次为27,30;PCR-序列分析胶银染法快速、直接、简便、实用,适合脆性X综合征的大规模群体筛查。 相似文献
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蛋白质与RNA分子之间的相互作用为生命活动的重要基础。由于蛋白质和RNA分子结合方式的复杂性,局限了蛋白质和RNA相互作用的研究。随着酵母三杂交系统的出现,蛋白质-RNA相互作用的研究也将步入一个新的时期。本文着重介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、局限性及其改进,假阳性结果的对策,并展望了该系统进一步的发展。 相似文献
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背景:肿瘤的细胞遗传学研究表明,肿瘤染色体的改变具有非随机性,一些肿瘤还存在有特异的染色体异常,从而为癌基因的表达提供了细胞遗传学基础。目的:对人类乳腺癌细胞系Bcap-37和MCF-7进行染色体G显带分析,研究其核型特征和标记染色体。设计:以细胞为观察叶寸象的对照实验。单位:北京大学医学部医学遗传学系。材料:实验于1991—04/1992—05在北京大学医学部医学遗传学系完成。人类乳腺癌细胞系Bcap-37和MCF-7。方法:应用低温同步法与秋水酰胺处理制备染色体标本.对人类乳腺癌细胞系Bcap-37和MCF-7的中期及早中期细胞进行G-显带分析。对每个细胞系计数50~60个分裂相,分析15~16个G-显带核型.包括320条带和500条带左右水平的分裂相。主要观察指标:两个乳腺癌细胞系染色体数目以及结构改变。结果:Bcap-37细胞染色体众数为63,可识别其结构的标记染色体17条:MCF-7细胞染色体众数为56,可识别其结构的标记染色体13条。结论:两个乳腺癌细胞系均有复杂的染色体异常,乳腺癌中染色体结构及数目的异常,它们可能引起肿瘤相关基因DNA序列重排,也可能导致某些染色体DNA丢失,从而在乳腺癌发生发展中起一定作用。 相似文献
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目的 肺癌胸腔积液的成分复杂,常规方法难以获得高纯度的胸腔积液肿瘤细胞.在前期建立免疫磁珠阴性富集法获得高纯度肿瘤细胞的基础上,本研究进一步探讨恶性胸腔积液中肿瘤细胞及CD133+细胞数对肺癌患者病情评估及疗效预测的作用.方法 收集2013-04-01 2014 08-31扬州大学临床医学院活检病理确诊且伴有恶性胸腔积液的初治肺癌患者21例.治疗前收集10 mL胸腔积液,采用阴性富集技术、染色体荧光原位杂交整合技术及CD133抗体免疫荧光染色对肿瘤细胞进行富集和荧光染色并计数.分析其与临床病理特征及治疗疗效之间的关系.结果 21例患者胸腔积液的中位肿瘤细胞数及CD133+细胞数分别为4 000个/10 mL和19个/10 mL.肿瘤细胞数及CD133+细胞数在不同性别(x2=0.597,P=0.550;x2 =0.225,P=0.822)、年龄(x2=0.533,P=0.594;x2=1.288,P=0.198)和病理类型(x2=3.253,P=0.197;x2=0.034,P=0.983)之间差异无统计学意义.与不伴有或仅伴有区域淋巴结转移患者比较,当肿瘤伴有肺内或远处淋巴结或其他脏器转移时,其胸腔积液中肿瘤细胞数(x2 =4.398,P=0.036)和CD133+细胞数(x2=4.605,P=0.032)明显增高.全组患者在化疗2个周期或口服吉非替尼2个月后,CR 0例,PR 7例,SD 9例,PD 5例,总有效率为33.33%.不同疗效患者的肿瘤细胞数及CD133+细胞数差异均有统计学意义(x2=7.575,P=0.023;x2 =7.247,P=0.027),疗效越好的患者肿瘤细胞数及CD133+细胞数越少.以肿瘤细胞数及CD133+细胞数的中位值为界值并联合进行分组,将所有患者分为3组:少量细胞数组(肿瘤细胞数和CD133+细胞数均≤中位值)、中等细胞数组(肿瘤细胞数>中位值并且CD133+细胞数≤中位值,或者CD133+细胞数>中位值并且肿瘤细胞数≤中位值)和大量细胞数组(肿瘤细胞数和CD133+细胞数均>中位值).中等-大量细胞数组患者肿瘤伴有肺内或远处淋巴结或其他脏器转移的发生率明显高于少量细胞数组,x2=12.634,P=0.002;少量细胞数组患者治疗疗效显著优于中等-大量细胞数组患者,x2=10.886,P=0.01.结论 胸腔积液中肿瘤细胞和CD133+细胞数有可能是晚期肺癌患者病情评估和疗效预测有效预测因子. 相似文献
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目的通过免疫磁珠技术去除胸腔积液中的白细胞(WBC)后检测其中肿瘤细胞的端粒酶活性,探讨白细胞对胸腔积液肿瘤细胞端粒酶活性的影响。方法收集15例患者胸腔积液,其中良性胸腔积液5例,恶性胸腔积液10例,应用TRAP—PCR—ELISA法检测分别经免疫磁珠阴性法及密度梯度离心法富集后胸腔积液细胞端粒酶活性。结果利用吸光度差值(△A)定性分析显示去除白细胞前后良恶性胸腔积液端粒酶活性无明显差异(P〉0.05);利用患者胸腔积液肿瘤细胞相对端粒酶活性值(RTA)定量分析,10例恶性胸水经两种方法富集后的RTA值比较有差异(P〈0.05),免疫磁珠阴性法富集后恶性胸水肿瘤细胞RTA明显高于密度梯度离心法富集后的恶性肿瘤细胞;5例良性胸水经两种方法富集后的RTA值之间比较无显著性差异(P〉0.05)。结论定量分析显示利用免疫磁珠阴性法富集胸腔积液肿瘤细胞后进行端粒酶活性检测去除了白细胞对肿瘤细胞端粒酶活性的影响,提高了检测的敏感性和特异性,可用于良恶性胸腔积液的鉴别。 相似文献
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肺癌是全世界发病率和死亡率极高的恶性肿瘤,5年生存期不到15%,尤其在中国,发病率和死亡率居全球前列[1]。目前通过手术、化疗、放疗和综合治疗等手段仍无法控制肺癌的死亡率。肿瘤干细胞(tumor stem cell,TSC)的发现为人们进一步了解肿瘤提供了新视野, 相似文献
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目的 寻找Battenin相互作用蛋白的筛选方法,并对筛选出的Battenin相互作用蛋白进行初步鉴定。方法将编码Battenin相互作用蛋白肽段的cDNA序列与pier&质粒的DNA结合结构域基因重组作为诱饵,应用MATCHMAKER LexA酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选与Battenin相互作用蛋白再发生相互作用的蛋白质的cDNA,并进行生物信息学分析。结果从胎脑cDNA文库中筛选得到7个阳性克隆,其中一个基因与人TEGT基因有99%的同源性,TEGT编码蛋白为Bax抑制子1。结论Battenin相互作用蛋白与Bax抑制子1或类似物相互作用,Bax抑制子1具有反式调控因子特性,二者都可能参与基因表达调控。 相似文献
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目的 筛选影响纳武单抗和派姆单抗治疗非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)疗效的差异基因,为免疫治疗药物的选择及治疗预后提供参考。方法 通过GEO数据库搜索“Nivolumab”、“Pembrolizumab”找到目的芯片,下载免疫治疗相关表达芯片“GSE93157”,筛选NSCLC相关样本共35个,利用R语言数据包对样本进行表达差异基因进行聚类分析。对差异基因进行基因功能注释GO分析和KEGG通路分析,构建蛋白相互作用网络,筛选枢纽基因进行生存分析,确定影响不同抗程序性细胞死亡蛋白1药物治疗的关键基因。结果 筛选出影响纳武单抗治疗疗效差异基因共58个,其中免疫相关基因25个;影响派姆单抗治疗疗效差异基因231个,免疫相关基因82个。基于两种药物免疫相关差异基因的蛋白互作网络提示纳武单抗共得到2个子网络,主要模块共11个节点,51个边;派姆单抗共得到4个子网络,主要模块共24个节点,231个边。影响两种药物治疗疗效的前10位主要免疫相关基因生存分析,显示生存差异具有统计学意义(P<0.05)的基因,与纳武单抗相关的免疫差异基因为CD5、... 相似文献
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枸杞子对人成纤维细胞寿命及c-fos基因表达的影响 总被引:14,自引:1,他引:14
目的:检测枸杞子提取液(fructus lycii extract,FLE)对人二倍体成纤维细胞国内标准株(2BS)寿命及c-fos基因表达的影响。方法:实验分两组,25代龄2BS细胞用单纯DMEM培养基培养为对照组,实验组25代龄2BS细胞用0.025% FLE培养,计数实验组及对照组所培养的代龄。制备c-fos探针,并以Northern杂交的方法检测c-fos在0.025% FLE处理后的表达情况。结果:实验组的代龄(61.0&;#177;2.9)代明显大于对照组(49.0&;#177;2.5)代(t=3.31,P&;lt;0.05)。在衰老细胞中发现经0.025%FLE处理后能检测到c-fos的表达,而对照组未检测到。结论:枸杞子能有限的延长2BS细胞寿命,并对衰老2BS细胞c-fos基因转录有诱导作用,为延缓细胞衰老的基因学研究提供理论基础。 相似文献
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目的 探讨Nip样蛋白(Nip-like protein X,NIX/BNIP3L)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达情况及其临床特征和预后中的影响.方法 选择在江苏省靖江市人民医院就诊首次确诊为NSCLC并行手术治疗的68例患者的癌组织、癌旁组织及其临床特征信息... 相似文献