载脂蛋白-A1在膀胱尿路上皮癌早期诊断及分类中的意义

目的 探讨尿液载脂蛋白-A1(Apo-A1)在膀胱尿路上皮癌(BUC)早期诊断及“两类癌”分类中的意义.方法 设正常对照组(24例)、膀胱良性病变组(8例)、低恶性BUC组(24例)和高恶性BUC组(16例),根据4组间单例尿液标本的双向电泳(2-DE)图谱,挑选表达差异显著的Apo-A1,采用ELISA方法检测该蛋白在4组尿液中的含量,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线来确定Apo-A1对BUC早期诊断和“两类癌”分类的最佳工作点(OOP)并进行临床正确性的验证,计算相应的特异度和灵敏度.结果 双向电泳图谱显示,在4组间Apo-A1呈现逐渐升高的趋势;在正常对照组和膀胱良性病变组间Apo-A1含量无明显差异,而在BUC组Apo-A1含量明显高于正常对照组和膀胱良性病变组,差异有统计学意义(P＜0.01);在高恶性BUC组Apo-A1含量明显高于低恶性BUC组,差异有统计学意义(P＜0.01).以18.22 ng/ml为临界点,可将BUC患者与非患者进行较好区分;以29.86 ng/ml为临界点,可将低恶性BUC与高恶性BUC进行较好区分.进一步的临床验证实验显示,以Apo-A1作为分子标志物诊断膀胱癌的灵敏度和特异度分别为91.6％(98/107)和85.7％(42/49);以Apo-A1作为分子标志物进行膀胱癌分类的灵敏度和特异度分别为83.7％(41/49)和89.7％(52/58).结论 Apo-A1有可能是BUC早期诊断及“两类癌”分类的一个生物学标志物,具有潜在的临床应用价值.     

山莨菪碱拮抗家兔休克时的脂质过氧化作用

观察了失血性休克，肠缺血性休克及创伤性休克时家兔脂质过氧化损伤表现及山莨菪减的影响．结果表明，随着不同类型休克的发生发展，家兔血浆和组织脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量均明显增多，预先给予山莨菪碱可明显缓解休克发生发展，且血浆ＭＤＡ无明显增多。而在休克发生后用药则难以阻止休克的继续发展和ＭＤＡ的产生。结果提示，山莨菪碱可能是通过抗脂质过氧化损伤而对休克动物具有保护作用．     

基线BMI水平对急性胰腺炎发病风险影响的前瞻性队列研究

目的 探讨不同BMI水平对新发急性胰腺炎（AP）发病风险的影响。方法 观察人群来自开滦研究队列,按基线BMI水平分为：正常体重组（BMI<24 kg/m²）,超重组（BMI 24~28 kg/m²）和肥胖组（BMI ≥ 28 kg/m²）,观察不同BMI组人群新发AP发病密度。经Kaplan-Meier法绘制生存曲线,计算累积发病率,以log-rank法进行检验,并采用多因素Cox比例风险回归模型分析基线BMI水平对新发AP事件的影响。结果 共纳入统计分析者123 841人,随访（11.94±2.13）年,共发生AP 395例,总人群AP发病密度为2.67例/万人年,正常体重组、超重组和肥胖组AP发病密度分别为2.20、2.72和3.58例/万人年,累积发病率分别为0.32%、0.40%和0.49%。经log-rank检验,累积发病率的组间比较差异有统计学意义（χ²=13.17,P<0.01）。校正多因素Cox比例风险回归模型分析显示,与正常体重组比较,肥胖组AP发病风险增加,HR=1.45（95%CI：1.10~1.92）。对年龄及性别进行分层,年龄<60岁时,肥胖组发生AP的HR=1.58（95%CI：1.14~2.19）;男性肥胖组发生AP的HR=1.40（95%CI：1.03~1.90）。排除随访2年内发生的AP病例,肥胖组发生AP的HR=1.60（95%CI：1.18~2.15）。结论 肥胖是新发AP的危险因素,中青年男性肥胖人群发病风险更高。     

类固醇糖尿病相关致病因素的研究进展

类固醇糖尿病（steroid-induced diabetes mellitus,SDM）是一种继发性糖尿病,其发病主要与肾上腺皮质的糖皮质激素异常分泌或应用过量的外源性糖皮质激素有关,类似于2型糖尿病,SDM的主要致病机制包括胰岛β细胞功能障碍和胰岛素抵抗（insulin resistance, IR）。SDM具有明显的流行病学特征,发病率因致病因素的差异而不同,其引起的血糖水平升高有可逆性。了解其发病机制和相应的致病因素,对预防SDM的发生和对症高效治疗SDM均有十分重要的意义。     

氯化锂对地塞米松诱导的大鼠胰岛β细胞凋亡的影响及其机制

目的：建立地塞米松（Dex）诱导的大鼠胰岛INS-1细胞凋亡模型,探讨氯化锂（LiCl）对Dex诱导的胰岛β细胞凋亡的影响及其可能机制。方法：将INS-1细胞分为对照组、0.1 μmol·L^-1Dex组和LiCl+0.1 μmol·L^-1Dex组。TUNEL染色和Annexin Ⅴ/PI染色法检测各组INS-1细胞凋亡率,Real-time PCR法检测各组INS-1细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、诱导型-氧化氮合酶（iNOS）、NADPH氧化酶4（Nox4）、NADPH oxidase （p47phox）和糖原合成酶激酶3β（GSK-3β） mRNA表达水平,Western blotting法检测各组INS-1细胞中GSK-3β、p-GSK-3、SOD、iNOS和Nox4蛋白表达水平,GENMED试剂盒检测各组NIS-1细胞中活性氧（ROS）水平,Griess法检测各组INS-1细胞中一氧化氮（NO）水平。结果：与对照组比较,0.1 μmol·L^-1Dex组INS-1细胞凋亡率升高（P<0.05）,SOD mRNA和p-GSK-3β蛋白表达水平降低（P<0.05）,细胞中Nox4、p47phox、iNOS mRNA表达水平升高（P<0.05）,细胞中ROS和NO水平升高（P<0.05）;与0.1 μmol·L^-1Dex组比较,LiCl+0.1μmol·L^-1Dex组INS-1细胞凋亡率降低（P<0.05）,SOD mRNA和p-GSK-3β蛋白表达水平升高（P<0.05）,细胞中Nox4、p47phox和iNOS mRNA表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,细胞中ROS和NO水平降低（P<0.05）。结论：Dex可诱导大鼠胰岛β细胞凋亡,LiCl可通过抑制GSK-3β活性减轻Dex诱导的胰岛β细胞凋亡。     

肢体缺血再灌注后红细胞变形能力的改变及其缺血预适应的保护作用

目的和方法：在家兔肢体缺血再灌注（I/R）损伤模型上观察缺血预适应（PC）对红细胞变形性的影响，并探讨其可能机理。结果：家兔肢体I/R后RBC变形能力明显降低，PC可以减轻I/R引起RBC变形性的改变，即RBC最大变形指数（DI_max）、积分变形指数（IDI）与对照组相比都未见显著差异；并抑制脂质过氧化的发生。结论：PC对家兔I/R红细胞膜有保护作用。     

Protective effect of sodium tanshinon Ⅱ A on lung injury induced by limb ischemia-reperfusion in rats

Objective To investigate the protective effect of sodium tanshinone Ⅱ A on lung injury induced by limb ischemia-reperfusion in rats. Methods 60 SD rats were randomly divided into three groups:control group (group A,n =20),limb-ischemia-reperfusion group (group B,n =20),and tanshinone Ⅱ A group (group C,n =20). The levels of malondialdehyde (MDA),superoxide dismutase (SOD),xanthine oxidase (XOD),interleukin-8 (IL-8),and tumor necrosis factor-α (TNF-α) in plasma and lung tissue were measured. The levels of TXB2 and 6-kcto-PGF1α in serum were measured by radioimmunoassay. The morphological and ultrastructure changes of lung tissues were observed under light microscope and electron microscope,respectively. Results ①Under light microscope,compared with group B,expansion of pulmonary vascular,aggregation of inflammatory cell,pulmonary edema relieved in group C. Under electron microscopy,compared with group B,mitochondrial swelling or degeneration,edema of basement membrane,swelling of pulmonary capillary endothelial cell,and pulmonary interstitial edema relieved in group C. ②MDA and XOD in plasma and lung tissue of group B were significantly higher than those in group A (all P ＜0. 01),and those in group C were significantly lower than those in group B (all P ＜0. 01). SOD in plasma and lung tissue of group B was significantly lower than that in group A (all P ＜0. 01). and that in group C was significantly higher than that in group B (all P ＜0. 01). ③IL-8、TNF-α in serum and lung tissue of group B were significantly higher than those in group A (all P ＜0. 01),those in group C were lower than those in group B ( P ＜0. 05 or P＜0. 01),and there was no statistical significance between group C and group A. ④TXB2 and 6-keto-PGF1α in serum of group B were significantly higher than those in group A (all P ＜0. 01),and those in group C were significantly lower than those in group B (all P ＜0. 01). TXB2 in serum of group C was higher than that in group A ( P ＜0. 05). There was no statistical significance on serum 6-keto-PGF1α between group C and group A. Conclusions Tanshinone Ⅱ A can alleviate lung injury of rats with limb ischemia-reperfusion.     

牛磺酸对大鼠肢体骨骼肌缺血再灌注后内质网应激反应的影响

目的：观察牛磺酸（Tau）预处理对大鼠肢体缺血再灌注（IR）后内质网应激反应的影响。方法：制作大鼠肢体IR损伤动物模型,将大鼠随机分成对照组、IR组和Tau组,测定各组骨骼肌组织湿/干（W/D）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、黄嘌呤氧化酶（XOD）、超氧化物歧化酶（SOD）含量,采用Western blot和实时聚合酶链反应法测定骨骼肌内质网应激（ERS）蛋白-葡萄糖调节蛋白94（GRP94）表达水平,分析牛磺酸对肢体IR损伤与ERS的关系。结果：与IR组比较,Tau组大鼠骨骼肌组织ROS、MDA、XOD和W/D均显著降低（P〈0.05,P〈0.01）,而SOD活性显著增加（P〈0.05）,GRP94在蛋白及mRNA水平表达下调。结论：牛磺酸对肢体IR损伤的保护作用与减轻骨骼肌ERS反应有关。     

内质网应激诱导的细胞凋亡在大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤中的作用及牛磺酸的影响

目的: 探讨内质网应激诱导的细胞凋亡在大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肺损伤中的作用及牛磺酸的影响。方法: 成年雄性SD大鼠40只,随机分成4组:(1)对照组(control);(2)LIR组;(3)牛磺酸处理组(LIR+taurine);(4)生理盐水处理组(LIR+saline)。采用生物化学方法检测血气变化及肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)含量;采用原位末端标记(TUNEL)法观察肺组织细胞凋亡情况;采用蛋白质印记方法(Western blotting)及实时定量PCR(real-time PCR)方法观察LIR后肺损伤发生过程中CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)同源蛋白(CHOP)及活化的转录因子4(ATF4)和X-盒结合蛋白-1(XBP1)基因表达的改变;光镜下观察肺脏组织的形态学改变。结果: 与对照组相比,LIR组的动脉血氧分压(PaO₂)和动脉血二氧化碳分压(PaCO₂)明显下降,肺组织中MDA水平明显升高,SOD和CAT活性明显降低,细胞凋亡数增多,CHOP蛋白表达上调,XBP-1、ATF4和CHOP mRNA表达水平明显上调;而牛磺酸能明显减轻LIR后肺损伤;肺呼吸功能明显改善,肺组织MDA的含量减少,SOD和CAT活性增加,细胞凋亡明显减少,CHOP蛋白表达下调,ATF4、XBP1和CHOP基因表达下调。结论: 内质网应激诱导的细胞凋亡参与LIR后肺损伤,牛磺酸对LIR后肺组织的保护作用与其减轻内质网应激诱导的细胞凋亡有关。     

人胚胎胰腺组织干细胞的分离鉴定和纯化

分离人胚胎胰腺组织中的胰岛细胞于体外培养,应用免疫细胞化学及RT-PCR的方法对其中的胰腺干细胞进行鉴定,并应用免疫磁珠的方法纯化其中的干细胞。结论是人胚胎胰腺组织中存在一定比例的干细胞,可以作为体外向胰岛素分泌细胞诱导分化的细胞来源。