短干涉RNA特异性抑制白血病细胞中肺耐药相关蛋白基因表达

背景和目的双链RNA特异性地降解相应序列的mRNA,导致转录后水平的基因沉默。肺耐药相关蛋白的过度表达与白血病细胞多药耐药密切相关。本研究旨在探讨自行设计的LRP特异性siRNA能否发挥特异性降解LRPmR-NA、抑制蛋白质表达的作用。方法构建LRP真核表达载体pcDNA3．0／LRP。以pcDNA3．0／LRP、pEGFP-C1、二者的特异性siRNA分别组和,转染K562细胞。以RT-PCR方法和流式细胞术检测LRP mRNA和蛋白质水平的变化,以荧光显微镜检测GFP的表达的变化。结果K562细胞转染pcDNA3．0／LRP后,LRP mRNA水平明显升高,蛋白质表达由阴性转为阳性,阳性率30％;LRP特异性siRNA与pcDNA3．0／LRP共同转染K562细胞,LRP mRNA和蛋白质表达均明显降低,由阳性转为阴性;LRP特异性siRNA与pEGFP-C1共同转染K562细胞,GFP的表达与pEGFP-C1单独转染无差异;GFP特异性siRNA与pcDNA3.0共同转染K562细胞,LRP mRNA水平和蛋白质表达与pcDNA3．0／LRP单独转染无差异。结论LRP特异性siRNA在K562细胞中能够特异性地降解LRP mRNA、抑制其蛋白质表达。该研究将为利用siRNA逆转LRP引起的白血病细胞MDR奠定理论基础。     

数字减影血管造影诊断并介入治疗广泛肝动脉-门静脉分枝瘘致消化道大出血一例

患儿女 ,4岁 ,因反复血性粪便 2个月余入院。 2岁时开始出现消瘦、面色苍白 ,无皮下出血、鼻衄及血尿等。入院前2个月开始暗红色稀水样便 ,每次 5 0～ 2 0 0ｍｌ,间隔 10～ 2 0ｄ一次 ,每次经输血、止血等处理后病情缓解。入院检查 :神清 ,精神差 ,中等贫血貌 ,心肺正常。腹膨隆 ,腹壁静脉呈上行性曲张 ,全腹无明显压疼 ,肝右肋下 4ｃｍ ,质中 ,边缘锐利 ,无触痛 ,脾于左肋下 3ｃｍ。辅助检查 :ＷＢＣ :4 9× 10 9/Ｌ ,ＲＢＣ :2 84× 10 12 /Ｌ ,Ｈｂ :87ｇ/Ｌ ,红细胞比容 0 2 6 1,血小板 :6 8× 10 9/Ｌ。总胆红素 :9 93μｍｍｏｌ/Ｌ …     

灵芝孢子多糖抗移植性肿瘤实验研究

目的 研究灵芝孢子多糖的抗癌作用。方法 采用小鼠抗移植性肿瘤实验方法。结果 灵芝孢子多糖分别以150 mg·kg^-1、300 mg·kg^-1和600 mg·kg^-1剂量连续12天灌胃给药,对小鼠移植性肝癌Heps的抑瘤率为53.77%～65.25%;连续8天灌胃给药,对小鼠移植性肉瘤S₁₈₀的抑瘤率为50.39%～55.04%,皆呈良好的抑瘤作用。灵芝孢子多糖可分别提高Heps和S₁₈₀荷瘤小鼠的脾指数和胸腺指数。结论 灵芝孢子多糖有良好的抑瘤作用,并可增强Heps和S₁₈₀荷瘤小鼠的非特异性免疫功能。     

SiRNA逆转肺耐药相关蛋白表达介导的白血病细胞多药耐药

目的:研究双链短干扰RNA(siRNA)对白血病多药耐药细胞模型(K562/NaB)肺耐药相关蛋白(LRP)表达及功能的影响.方法:针对LRP基因设计合成特异性siRNA,在脂质体介导下转染K562/NaB;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测K562细胞LRP mRNA的水平;用流式细胞术检测K562/NaB细胞LRP蛋白表达的变化和细胞内柔红霉素(DNR)的蓄积;MTT法检测阿霉素(ADM)对K562/NaB细胞耐药的半数抑制浓度(IC50).结果:siRNA转染后:K562/NaB细胞的LRP mRMA水平明显降低;LRP蛋白表达由阳性转为阴性;细胞内DNR的蓄积明显增加,DNR平均荧光增强3.28倍;对ADM药物敏感相对逆转效率为78.18%.结论:siRNA可逆转由LRP介导的白血病细胞多药耐药.     

小卫星DNA多态性用于脐血中母体细胞的检测

采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增具有高度多态性３３．６位点，联合地高辛标记位点特异性核苷酸探针杂交，制作出ＰＣＲ－小卫星ＤＮＡ片段长度多态性图谱，对我院常规法收集的脐带血３０份（１例用于脐带血移植）进行了母体细胞的检测，结果显示，小卫星ＤＮＡ多态性特异的遗传标志物，３０例被检脐血均未测得母体细胞标志物，地特异、灵敏、简便、快速、无同位素污染，可作为脐血质量监控的可靠方法。     

2005-2007年广州地区住院肺炎患儿呼吸道合胞病毒感染分析

目的 了解广州地区住院肺炎患儿呼吸道合胞病毒(RSV)的感染特点,以指导临床RSV的防治.方法 取2005-2007年广州地区0～14岁12 195例住院肺炎患儿外周血血清进行BSV-IgM检测,应用SPSS 14.0软件对RSV感染率等资料进行统计学分析.结果 1.RSV感染903例,感染率为7.40%.男女比例为2.37:1,男女感染率分别为7.53%和7.12%,无显著性差异(X2=0.634 P=0.426).2.患儿年龄分布于0～11岁,其中0～1岁、>1～3岁、>3～6岁、>6～11岁感染率分别为9.67%、6.81%、3.49%和0.80%,各年龄段感染率比较均有显著性差异(Pa<0.05).3.感染分布于春季(3-5月,496例)和夏季(6-8月,219例)占79.18%.春、夏、秋、冬季感染率分别为11.17%、6.32%、3.54%和5.57%.春夏、春秋、春冬、夏秋、秋冬感染率比较均有显著性差异(Pa<0.05),夏冬感染率比较无显著性差异(P>0.05).4.2005、2006和2007年感染率分别为4.0%、8.92%和8.85%,2005年感染率与2006、2007年感染率比较均有显著性差异(Pa<0.05).5.重症肺炎占RVS感染患儿的7.64%,且住院天数与普通肺炎组比较有显著性差异(P<0.05).结论 RSV足2005-2007年广州地区住院肺炎患儿的重要病源;广州地区儿童RSV感染的临床防治中,要加强对0～3岁儿童的防护;预防工作要全年进行,重点在3-8月;防治工作要注意年度差异.实用儿科临床杂志.2009,24(10):745-747     

Rapid identification of the origin of hematopoietic cells after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation for leukemia with DNA-fingerprinting

Allogeneichematopoieticstemcelltransplan-tation(AHCT)isusedtotreatleukemia,severeaplasticanaemiaandsoon.OneoftheimportantindexesofsuccessfulAHCTisthedetectionofdonorcellsafterreconstitutionofhematopoieticfunctionintherecipient.AvarietyoftechniqueshavebeenusedtoconfirmthesurvivalofthegraftafterAHCT,whichincludeRBCphenotyping,RBCandWBCisoenzymeanalysis,immunoglobu-linallotyping,andsoon,However,thesemarkersmaybeeasilyaffectedbymanyadditionalfactorssuchasmultipletransfusions,samesex,samebl…     

儿童甲型流感研究进展

防治儿童甲型流感具有非常重要的意义，但目前尚无有效手段对儿童甲型流感进行防治。我们研究和总结了国内外近年来关于儿童甲型流感发病病因、发病机制、临床特点及诊疗等方面的科研论文，为儿童甲型流感进一步研究和临床诊治工作提供线索和依据。