2012-2014年某医院常见革兰阴性杆菌耐药率的变移

目的了解蚌埠医学院第一附属医院2012-2014年常见革兰阴性菌耐药率的变移,为临床合理使用抗生素提供依据。方法药敏实验采用自动化仪器法或纸片扩散法。结果临床共分离出13 488株细菌,其中革兰阴性菌8 384株,排名前4位的是:大肠埃希菌40.4%（3 384/8 384）、肺炎克雷伯菌13.6%（1 138/8 384）、鲍曼不动杆菌10.4%（868/8 384）、铜绿假单胞菌9.0%（757/8 384）,占分离革兰阴性菌的73.3%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶菌株的检出率分别为67.8%和39.6%。肠杆菌科细菌（除粘质沙雷菌）对碳青霉烯类抗生素保持高度敏感性。鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对亚胺培南三年的耐药率分别大于77.1%和23.3%,广泛耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的检出率为:84.8%和37.5%。结论该院临床分离的革兰阴性菌耐药情况严重,值得关注的是泛耐药及碳青霉烯类抗生素耐药菌株呈明显的逐年上升趋势,应引起高度重视。     

14-3-3蛋白在神经退行性变疾病诊断中的应用

14 3 3蛋白是分布十分广泛的真核生物蛋白质 ,在脑组织中含量丰富。哺乳动物中 ,1 4 3 3蛋白主要包括 7个亚型 ,在体内发挥诸多重要的生物学功能。目前 ,1 4 3 3蛋白检测主要用于对克 雅病 (CJD)的辅助诊断。 1 4 3 3蛋白也可在一些其他的神经系统退行性变疾病中检出 ,如某些病毒性脑炎、急性脑梗塞、中风等。随着针对 1 4 3 3蛋白各亚型抗体的制备以及 1 4 3 3蛋白检测技术的改进 ,为神经退行性变疾病之间的鉴别诊断提供了可能 ,同时也为进一步研究 1 4 3 3蛋白的作用机制提供了有效的手段     

重组日本血吸虫26 ku谷胱甘肽-硫-转移酶的表达、纯化及其免疫特性分析用于急性血吸虫病免疫诊断

目的将日本血吸虫(中国大陆株)26 ku谷胱甘肽-硫-转移酶(26 ku SjGST)基因克隆入pET28a(+)并诱导表达26 ku rSjGST蛋白,纯化并用于急性血吸虫病免疫诊断.方法构建重组质粒pET28a-SjGST,转化到E.coli BL21,经IPTG诱导表达并进行SDS变性蛋白质电泳,以小鼠抗GST单克隆抗体为一抗,进行Western-blot分析.用His·BandPurification Kit亲和层析纯化重组蛋白,以此重组蛋白作为抗原,用ELISA法检测急性血吸虫患者血清和非流行区正常人血清. 结果成功地构建了重组质粒pET28a-SjGST,SDS变性蛋白质电泳显示可见一与预期分子量大小相符的特异蛋白条带的表达.Western blot分析表明,该重组蛋白能被小鼠抗GST单克隆抗体识别.ELISA结果表明,rSj GST用于急性血吸虫患者血清中抗体检测的阳性率为92.3%.结论 rSj GST得到表达和纯化,该重组蛋白用于急性血吸虫患者血清中抗体的检测具有良好的免疫反应性,为进一步探讨其在血吸虫病诊断中的应用奠定了基础.     

大鼠GAP-43基因的克隆及其在COS-7细胞的表达

目的: 克隆大鼠GAP-43基因,构建其真核表达载体,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法: 采用RT-PCR方法,以大鼠少突胶质前体细胞RNA为模板,扩增GAP-43基因,定向克隆到pEGFP-N3载体中。以LipofectamineTM 2000试剂转染pEGFP-N3-GAP-43表达载体至COS-7细胞中进行瞬时真核表达。以免疫荧光方法鉴定GAP-43的表达。结果: 从大鼠少突胶质前体细胞中克隆到序列正确的GAP-43全长编码序列。所构建的GAP-43质粒在COS-7细胞中获得高效表达。结论: 大鼠GAP-43基因的克隆、真核表达载体的构建及在COS-7中的表达获得成功,为进一步研究其功能,尤其是探讨其在少突胶质细胞发育中的作用奠定了基础。     

血吸虫蛋白组学研究进展

血吸虫病是热带和亚热带地区主要的寄生虫病之一[1],目前全球大约有2亿人感染,每年死亡人数超过28万。由于血吸虫能够在宿主血管内生活数十年,血吸虫明显能够逃逸宿主的免疫反应。因此,血吸虫病已成为寄生虫乃至免疫学领域的研究热点,然而目前对血吸虫参与宿主免疫调节的分子机制认     

对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌KPC基因型分析

目的:分析对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌KPC基因型。方法:使用改良的Hodge实验(MHT)初筛产KPC的肺炎克雷伯菌,PCR和测序鉴定耐药肺炎克雷伯菌是否带有KPC基因,并通过GenBank的比对确定KPC基因型。用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对KPC阳性菌株进行同源性分析。结果:13株对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌中有10株MHT结果为阳性,阳性率为76.92%,其中有2株细菌为KPC基因阳性,阳性率为15.38%,通过GenBank比对,此KPC基因为2型。PFGE结果显示这2株细菌来源于同一克隆。结论:分离出了携带有KPC-2型碳青霉烯酶基因的肺炎克雷伯菌。     

医学检验专业实习教学中存在的问题

医学检验专业是一门技术性和实践性很强的学科,实习教学是培养检验专业学生实践能力的重要阶段,也是教学内容的重要组成部分.如何正视实习教学过程中出现的问题,及时找出解决问题的措施,是培养高素质的检验人员,提高检验专业学生实习质量的重要保障.