鲍氏不动杆菌对亚胺培南耐药性及碳青酶烯酶基因型分析

目的了解蚌埠医学院第一附属医院临床分离的鲍氏不动杆菌耐药性及碳青酶烯酶基因型。方法采用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MICs),用PCR法扩增碳青酶烯酶blaOXA基因和金属酶基因IMP、VIM,对阳性基因型进行全长扩增并测序鉴定。结果临床分离108株鲍氏不动杆菌有56株对亚胺培南耐药,亚胺培南耐药菌株碳青酶烯酶基因型分析显示,检测出blaOXA-23型基因21株,3株检测出blaOXA-58,50株blaOXA-64-like检测阳性,blaOXA-20、blaOXA-24、blaOXA-48、blaOXA-50、blaOXA-55、blaOXA-60检测结果均为阴性,未检测到金属酶IMP、VIM基因。结论临床分离的鲍氏不动杆菌主要产OXA-23、OXA-51型碳青酶烯酶,这可能与临床上经常使用碳青酶烯类抗菌药物有关。     

肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶型碳青霉烯酶的研究进展

肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶(Klebsiella pneumoniaecarbapenemases,KPC)是碳青霉烯类抗生素耐药机制中的重要一环。自2000年美国报道了第1例病例后,产KPC的菌株便开始在全球陆续报道。一些国家和地区如以色列、希腊、波多黎各、美国东北部等均曾多次发生疫情爆发或流行[1]。由于KPC能迅速水解碳青霉烯类抗生素,并产生广谱耐药,故     

压疮模型大鼠血清和组织中超氧化物歧化酶与一氧化氮的实验观察

目的 前期实验结果显示,压迫超过3 h时,试验大鼠的受压组织明显受损。进一步实验观察不同压迫时间下,SD大鼠血清和组织中的超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)结果差异,为寻找压疮患者最佳的翻身时间提供实验室依据。 方法 将48只SD大鼠分为对照组和实验组,每组8只,对照组未作任何处理,实验组又分为压迫1小时组(即压迫1 h后再解压1 h,再压迫、解压各1 h,依此循环,直至24 h实验结束;简称1 h组,后同)、2小时组(2 h组)、3小时组(3 h组)、4小时组(4 h组)、6小时组(6 h组),共5组,实验组各组的压迫时间与解压时间相等(即缺血和再灌注时间相等),各组缺血和再灌注的总试验时程均为24 h,实验结束后收集各组大鼠的血清和组织,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清和组织匀浆液中的SOD和NO的浓度,比较各组SOD和NO的结果差异。 结果 与对照组相比,3 h组、4 h组和6 h组血清和组织中的SOD均明显降低,而NO明显升高,差异均具有统计学意义(P＜0.05),而且随着压迫时间的延长,差异越明显。但1 h组和2 h组的结果差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论 压迫超过3 h,大鼠血清和组织中的SOD和NO均发生明显改变,因此,SOD和NO可以作为预测压疮发生的早期无创实验室风险指标。      

白细胞增高对血红蛋白测定结果影响的探讨

目的: 探讨白细胞 (WBC) 增高对血红蛋白(Hb)测定结果的影响。方法: 收集住院患者血液标本90份, 其中WBC值在(10～<20)×109/L、(20～<40)×109/L、≥40×109/L的标本各30份, 分别通过XE-2100型血液分析仪和氰化高铁血红蛋白(HiCN)比色法检测各标本的Hb值, 其中HiCN比色法首先在660 nm处用分光光度计测其浊度, 然后高速离心去除WBC, 用上清液进行比色。观察2次测定Hb值的变化。结果: WBC值≥40×109/L, 会对Hb结果产生影响, 且WBC值越高, 产生的浊度越大, 对Hb的影响越明显(P<0.01)。结论: 高WBC的存在将使Hb测定值假性增高, 使用HiCN稀释血液, 高速离心去除WBC后再比色测定可有效消除WBC异常增高对Hb的影响。     

邻苯三酚自氧化法测定血浆超氧化物歧化酶的方法学评价及临床应用探讨

目的对邻苯三酚自氧化法测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)的方法学进行评价,并探索其临床应用价值。方法根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)的评价方法,应用邻苯三酚自氧化法检测血浆SOD,评价其精密度、准确度、线性和回收率;随机选取2014年健康体检者42例作为对照组,2014年3-12月我院住院氧化应激反应相关疾病患者1580例作为疾病组,测定血浆SOD的活性水平,进行临床应用评价。结果用邻苯三酚自氧化法测定SOD精密度试验中批内精密度为1.57%和4.8%,批间精密度为2.17和2.21%;准确性试验相对偏倚为:1.6%和2.4%;线性试验在0~250 U/ml内R2为0.9978;回收率为96.2%~103.4%;SOD在各疾病组与健康对照组差异均具有显著性(P<0.01)。结论邻苯三酚自氧化法测定SOD方法学评价符合要求,其精密度高、准确性好,线性范围宽,具有较高的临床应用价值。     

红细胞碎片对白细胞计数结果的影响

目的　分析在 CD-1 70 0型血液分析仪上作白细胞 ( WBC)计数检测时 ,在 3 5 fl线附近出现一匕首样峰的异常白细胞直方图和不准确的白细胞计数结果的原因。方法　对 2 0例 (肝病患者 1 8例 ,新生儿 2例 )异常白细胞直方图的可能原因进行逐一分析 ;采用制片染色作显微镜检查 ,用稀释液洗涤红细胞后再用仪器检测和进行红细胞渗透脆性试验 ,同时对这些标本用显微镜目测法计数 WBC,并与计数法结果进行配对 t检验。结果　出现异常直方图的 WBC计数结果与目测法结果的差异有显著性 ( P<0 .0 1 ) ,仪器法结果显著增高 ,且这些标本的红细胞渗透脆性均显著降低。结论　白细胞计数假性增高与红细胞膜脆性变化密切相关。建议出现异常白细胞直方图时 ,须用显微镜目测法计数白细胞     

鲍氏不动杆菌blaOXA-23基因定位及其临床意义

目的研究鲍氏不动杆菌blaOXA-23的基因背景,探讨不动杆菌属耐药性产生与抗菌药物使用的关系。方法连续筛选法获得耐亚胺培南鲍氏不动杆菌;PCR检测碳青酶烯酶基因;ERIC-PCR研究菌株遗传相关性;质粒接合实验及blaOXA-23杂交等研究OXA-23基因定位。结果24株中筛选出10株耐药菌,其中有6株检测到blaOXA-23基因;且菌株呈多克隆特点;DNA杂交发现blaOXA-23与整合子无关。结论blaOXA-23可存在于对亚胺培南敏感的不动杆菌属中;抗菌药物选择压力强化了blaOXA-23阳性菌的种群优势,导致耐药性产生;提示应合理应用此类抗菌药物。     

日本血吸虫亮氨酸氨基肽酶和果糖二磷酸醛缩酶重组疫苗对小鼠的保护性免疫效果观察

目的 利用重组亮氨酸氨基肽酶(rSjLAP)和果糖二磷酸醛缩酶(rSjFBPA)辅以佐剂免疫BALB/c小鼠,观察基于2-DE和血清蛋白质组筛选的上述二种重组抗原的免疫保护效果;通过福氏佐剂和纳米C60佐剂在增强免疫效果方面的比较,探讨纳米C60佐剂在血吸虫分子疫苗接种中的价值.方法 从重组质粒转化的E.coli中诱导表达rSjLAP和rSjFBPA,纯化并检测含量.将6周龄BALB/c小鼠随机分为7组,生理盐水对照组(A组)、rSjLAP+福氏佐剂组(B组)、rSjFBPA+福氏佐剂组(C组)、rSjLAP+rSjFBPA+福氏佐剂组(D组)、rSjLAP+纳米C60佐剂组(E组)、rSjFBPA+纳米C60佐剂组(F组)、rSjLAP+rSjFBPA+纳米C60佐剂组(G组),每组6只.除A组外,B～G组小鼠皮下多点注射rSjLAP或rSjFBPA 100 μg,共免疫3次,每次间隔2周.用尾蚴感染小鼠6周后,处死小鼠,收集成虫,计算减虫率;收集肝组织虫卵,计算减卵率.结果 B～G组的减虫率分别为:35.59%、 33.05%、37.98%、38.99%、43.21%和45.75%,与A组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);B～G组的减卵率分别为:40.25%、42.57%、48.88%、41.64%、45.44%和46.88%,与A组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 BALB/c小鼠经rSjLAP和rSjFBPA辅以福氏佐剂或纳米C60佐剂免疫,获得了一定的免疫保护力;福氏佐剂和纳米C60佐剂均增强了重组疫苗的免疫效果,但两种佐剂的免疫增强效果差异无统计学意义.     

支气管哮喘患者外周血TIM4，IgG4及EOS水平表达与其肺功能、哮喘发病严重程度及预后的相关性研究

目的　研究外周血T细胞免疫球蛋白域及黏蛋白域蛋白4（T cells immunoglobulin domain and mucin domain protein 4, TIM4）、血清免疫球蛋白G4（IgG4）及嗜酸性粒细胞（EOS）在支气管哮喘患者中的表达水平及其与患者预后的关系。方法　选取上海交通大学医学院附属第九人民医院2019.01~2020.06间收治的103例支气管哮喘患者纳为研究对象,分为急性组（急性发作期,n=66）和缓解组（哮喘缓解期,n=37）,同时将30例健康志愿者纳为对照组。根据急性发作严重程度,将66例急性发作患者分为重度组、中度组及轻度组。分别比较急性组、缓解组、对照组及急性发作不同严重程度患者外周血TIM4,血清IgG4及EOS水平。分析外周血TIM4,血清IgG4及EOS水平与患者肺功能指标间的相关性。急性发作期患者出院后随访1年,统计急性组哮喘再次疾病发作情况,绘制ROC曲线,分析外周血TIM4,血清IgG4及EOS在预测哮喘急性发作患者预后中的价值。结果　对照组、缓解组及急性组外周血TIM4,血清IgG4及EOS水平呈依次升高趋势,且组间差异有统计学意义（F=309.753, 149.528和155.106,均P<0.001）;相关性分析提示,哮喘患者外周血TIM4,EOS与肺功能指标FEV1%pred间均呈负相关（r=-0.36,-0.33, 均P<0.05）,IgG4与FEV1%pred及FEV1/FVC呈负相关（r=0.41, 0.46, 均P<0.05）;急性哮喘发作轻度组、中度组及重度组患者外周血TIM4及血清IgG4,EOS水平均呈依次上升趋势,组间差异均有显著统计学意义（F=39.175, 73.200, 25.564, P<0.001）;66例哮喘急性发作者中11例1年内再次急性复发,将其纳为预后不良组,统计发现,预后不良组外周血TIM4及血清IgG4,EOS 水平分别为1.49±0.26 ng/ml,1.33±0.35 g/L和（0.55±0.16）×109/L,均显著高于预后良好组[1.02±0.37 ng/ml,0.86±0.22 g/L和（0.38±0.17）×109/L],差异均有统计学意义（t=4.008, 5.810和3.055, 均P<0.05）。绘制ROC曲线发现,外周血TIM4,IgG4及EOS在预测哮喘急性发作者预后中均具有一定价值,各指标单独应用时,TIM4预测效能最高（AUC=0.802,95%CI:0.635~0.975）,预测灵敏度及特异度分别为72.7%,85.5%。联合预测因子预测效能最高（AUC=0.944,95%CI:0.890~0.998）,预测灵敏度及特异度分别为90.9%和89.1% 。结论　哮喘患者外周血TIM4,IgG4及EOS浓度异常升高,外周血TIM4,IgG4及EOS浓度不仅可有效反映哮喘患者病情,还可预测患者后期急性复发风险。