大肠癌抗原基因的筛选与初步分析

目的 筛选鉴定大肠癌抗原基因,并进行生物信息学的初步分析。方法 采用自体或异体大肠癌患者血清。应用SEREX方法对大肠癌cDNA噬菌体表达文库进行免疫筛选。阳性克隆噬菌体在扩增、提取、纯化DNA后,用PCR方法和EcoRⅠ、HindⅢ双酶切鉴定cDNA片段的大小。阳性克隆eDNA插入pUCm-T载体测序。序列生物信息学分析采用NCBI的All GenBank＋EMBL＋DDBJ＋PDB Sequences Database进行BLAST基因比对分析。结果 筛选出11个阳性克隆,cDNA片段大小分别为1100、1300、1000、2000、1200、1200,700、900、600、1200和1000bp,代表9个抗原基因,7个与已知基因同源。有3个阳性克隆为同1个基因片段,与干扰素诱导的跨膜蛋白．1基因同源．具有抗增殖作用：另6个阳性克隆分别与不同的基因同源,分别是：BAC clone RP11-453E17“肿瘤解剖计划”基因,功能尚不清楚;软骨．毛发发育不良区基因,发生软骨-毛发发育不良综合征;入5号染色体克隆的序列,有插入突变,功能尚不清楚;类似抗肿瘤坏死因子α抗体的轻链Fab段基因,与IgG1抗体的y链（重链）和k链（轻链）的编码和调控其生物功能有关,可能与肿瘤的生长有关;β2微球蛋白的mRNA,与肿瘤细胞的增殖有关;醛缩酶A基因,异常表达可能促进肿瘤细胞的增殖;尚有2个阳性克隆的cDNA序列没有同源性,功能有待进一步研究。结论 用SEREX方法筛选大肠癌cDNA表达文库,可直接获得有价值的大肠癌抗原基因,对大肠癌发病机制的研究以及探讨早期诊断方法有重要意义。     

外伤性十二指肠破裂16例临床分析

目的 提高对外伤性十二指肠破裂临床特点的认识。方法 对16例外伤性十二指肠破裂进行回顾性分析。结果 上腹部外伤史，右上腹或腰部持续性疼痛且进行性加重，右上腹有明确的固定压痛，腹腔穿刺阳性，B超、X线检查和血清淀粉酶升高等有助于明确诊断；依据十二指肠损伤情况，行十二指肠缝合修补术8例、带蒂肠片修补术3例、十二指肠憩室化手术1例、十二指肠与空肠Roux-en-Y吻合术2例、十二指肠部分切除术2例，痊愈15例，死亡1例。结论 熟悉外伤性十二指肠破裂的临床特点，早期诊断，选择适当的术式，可以提高治愈率。     

外生殖器尖锐湿疣患者NK细胞的研究

目的检测外生殖器尖锐湿疣患者外周血NK细胞（CD56＋）及活化NK细胞（CD56^＋CD69^＋）的变化。方法采用免疫荧光三标记流式细胞术检测36例检测外生殖器尖锐湿疣患者外周血CD56＋和CD56^＋CD69^＋细胞,同时以29例正常人作为对照。结果外生殖器尖锐湿疣患者外周血CD56^＋CD69^＋细胞百分率均显著高于正常对照组（均为P〈0.01）,长病程组和短病程组无明显著性。结论外生殖器尖锐湿疣患者外周血CD56^＋CD69^＋细胞百分率增高,说明NK细胞在外生殖器尖锐湿疣发病中起着非特异性抗病毒免疫的重要作用。     

真核表达载体pEGFP-N1-hSyntenin的构建及其在人脑胶质瘤细胞CHG-5中的表达

目的 构建pEGFP-N1-hSyntenin基因真核表达载体,并观察其在人脑胶质瘤细胞CHG-5中的表达.方法 采用RT-PCR技术从人脑肿瘤组织中扩增hSyntenin,并将PCR产物双酶切后定向克隆入pEGFP-N1的多克隆位点,构建pEGFP-N1-hSyntenin重组质粒.经过菌落PCR、双酶切及测序验证后,采用脂质体转染技术将pEGFP-N1-hSyntenin融合基因转染CHG-5细胞表达,G418筛选建立稳定表达hSyntenin的CHG-hS细胞系.采用荧光检测和免疫印迹技术分析hSyntenin在稳定转染的CHG-5细胞系中的表达.结果 菌落PCR鉴定出1个阳性克隆,阳性克隆经双酶切鉴定得到分别与载体和目的 片段大小一致的4.7 kb和897 bp的两条片段,测序证实目的 基因hSyntenin正确连接到pEGFP-N1的多克隆位点;pEGFP-N1-hSyntenin重组体稳定转染CHG-5细胞后,细胞荧光检测结果显示hSyntenin在CHG-5细胞质发出绿色荧光,免疫印迹检测可见32×103处的阳性条带.结论 成功构建pEGFP-N1-hSyntenin重组质粒,并在人脑胶质瘤细胞CHG-5中获得稳定表达.     

脑实质内颅内压监护在小骨窗开颅治疗幕上高血压脑出血患者中的应用

目的探讨小骨窗开颅手术治疗幕上高血压脑出血患者术后进行持续动态颅内压(intracranial pressure,ICP)监护的临床价值。方法采用脑实质内ICP监护法对19例小骨窗开颅的幕上高血压脑出血患者(2009年1月至2010年12月重庆医科大学附属第一医院神经外科住院患者)进行术后ICP动态监护。选取2008年1-12月该科11例小骨窗开颅手术患者作为对照(既往常规经验治疗组)。结果本组4例重度ICP增高患者在开始出现颅高压时仅2例有症状和体征,1例死亡。ICP监护组20%甘露醇应用天数为(8±3)d,剂量为(925±125)g;既往常规经验治疗组20%甘露醇应用天数为(11±4)d,剂量为(1475±175)g。ICP监护组20%甘露醇应用时间及剂量均明显低于既往常规经验治疗组(P<0.05)。结论脑实质内ICP持续监护有助于对小骨窗开颅治疗幕上高血压脑出血患者病情变化的及时、准确判断,可为疾病的早期、正确治疗提供可靠的依据。     

神经内镜在经颅治疗脑室相关深部肿瘤手术中的应用

目的 探讨神经内镜在经颅治疗脑室相关深部肿瘤手术中的应用.方法 回顾性分析本院2016年1月至2019年3月利用神经内镜及其辅助技术治疗21例脑室相关的深部实质性肿瘤患者的临床资料,评价其手术全切率、术后并发症及神经功能情况.结果 15例患者肿瘤全切除,6例患者肿瘤次全切除.术后3例颅内感染,1例新发脑积水并再次手术,...     

人白细胞介素6在HT-29结肠癌细胞系中的转基因表达

将含IL-6cDNA的PMAM重组载体用脂质体法转染大肠癌细胞株HT-29,克隆出抗性细胞,经Southern印迹杂交证明有IL6基因片段的插入.RNA点杂交结果表明:IL-6基因转染细胞有较强的IL-6mRNA转录,而未转染细胞的转录水平很弱;7TD1-MTT法检测转染前后细胞的上清显示:抗性细胞分泌的IL-6活性明显增强.     

从神经电生理角度探讨亚低温对特重型颅脑伤的疗效

目的　通过诱发电位(EP)监测,探讨亚低温对特重型颅脑伤的疗效。　方法　选择受伤后10h内入院的特重型颅脑伤患者(GCS≤5)24例,患者随机分为亚低温组和常温组。亚低温组体温降至32～34℃,于降温前、降温过程中及复温后监测正中神经短潜伏期体感诱发电位(SLSEP)和脑干听觉诱发电位(BAEP);常温组在同样的时间段监测上述指标。统计分析亚低温组与常温组诱发电位的变化情况。　结果　亚低温组在治疗前后SLSEP的N20波幅变化值为(0.67±0.41)μV,常温组为(0.61±0.39)μV,两者差异无显著性意义(P＞0.05);BAEP的V/I波幅比值,差异也无显著性意义（P＞0.05）。　结论　从神经电生理角度来看,亚低温对GCS为3～5分的特重型颅脑伤无明显疗效。     

神经内窥镜临床应用的初步经验

内窥镜神经外科是微侵袭神经外科的重要组成部分.我科于2000年5月引进美国Clarus神经内窥镜(其硬工作镜外径4.2 mm,工作腔直径2.15mm,组件还包括观察镜、软镜等.)经临床应用,疗效令人满意,现报告如下. 1 临床资料 手术均在全麻下经内窥镜进行,诊断均经病理证实,均于术后八天内出院.病例1、女,57岁.右额顶纵裂蛛网膜囊肿.因头痛伴左侧肢体乏力2年入院.查体:左上、下肢肌力Ⅳ级.头颅CT示:右额顶蛛网膜囊肿.行蛛网膜囊肿-脑池造瘘、囊壁部分切除、囊肿-腹腔分流术.术后头痛缓解,复查CT示:囊肿缩小.1月后随访,左侧肢体乏力明显改善.病例2、男,51岁.Ⅲ脑室颅咽管瘤.因性欲减退1年,左眼视力减退3月入院.查体:左眼视力眼前数指.头颅MRI示:Ⅲ脑室内囊性肿瘤.行肿瘤部分切除、脑室-腹腔分流术.术后左眼视力2米数指.病例3、男,56岁.