色素上皮衍生因子对糖尿病大鼠视网膜谷氨酸代谢的影响

Objective To observe the effect of pigment epithelium-derived factor(PEDF)on glutamate metabolism in diabetic rat retina.Methods 78 Sprague-Dawley rats were randomly divided into the model group,model control group,PEDF intervention group and intervention control group.There were some dead and euglycemia rats at the end of experiment,so only 12 rats in each group were included in the statistical analysis.The diabetic retinopathy rat model of the model,PEDF intervention and intervention control group were induced with streptozotocin injection.The rats in the model group were not intervened.The monthly-age matched normal rats of model group were in the model control group.The left eyes of rats were received intravitreal injection with 5μl(0.1μg/μl)PEDF(PEDF intervention group)or 5μlphosphate buffer solution(intervention control group).The expressions of L-glutamate/L-aspartate transporter in retina were analyzed by western blot and real time RT-PCR techniques and glutamate content in retina was analyzed by high-pressure liquid chromatography(HPLC).Cultured rat Mailer cells were divided into the control,experimental,PEDF intervention and intervention control group,GLAST expressions were detected by fluorescence immunofluorescence and real-time RT-PCR techniques.The glutamate up-take activity of Müller cells was determined by intracellular[3H] labeled D,L-glutamate concentration with scintillation counting.Results Western blot and real-time RT-PCR showed that GLAST expression decreased(real-time RT-PCR:t=8.86,P＜0.01;Western blot:t=3.42,P＜0.05).glutamate content increased(t=4.01,P＜0.05)in model group compared with the model control group:GLAST expression increased(real-time RT-PCR:t=3.56,P＜0.05;Western blot:t=3.52,P＜0.05),glutamate content decreased(y=4.36,P＜0.05)in the PEDF intervention group compared with the intervention control group.Real-time RT-PCR and fluorescence immunofluorescenee showed that high glucose down-regulate GLAST expressions in Müller cells(real-time RT-PCR:t=3.48,P＜0.05;fluorescence immunofluoreseence:t=4.72,P＜0.05)and impair glutamate up-take activity of Müller cells(t=3.81,P＜0.05).Under high glucose conditions,PEDF up-regulated GLAST expression significantly(real-time RT-PCR:t=6.82,P＜0.01;fluorescence immunofluorescence:t=3.72,P＜0.05)and ameliorated the glutamate up-take activitv of Mailer cells(t=4.14,P＜0.05).Conclusions In diabetic rats,PEDF may improve the activitv of GLAST in Müller cells,thus ameliorate retinal glutamate metabolism and inhibit death of retinal ganglion cells.     

兔角膜重度碱烧伤后羊膜移植的疗效观察

目的 观察兔角膜重度碱烧伤后羊膜移植的疗效。方法 将18只新西兰白兔随机分成3组，每组6只，所有兔眼建立重度碱烧伤模型，左眼羊膜移植，右眼作为对照。分别于1，2，3个月，通过光镜，电镜以及原位杂交方法观察角膜情况。结果 1个月时，羊膜移植组上皮细胞修复优于对照组，基层浸润轻于对照组，基质中TGF－β1mRNA的表达低于对照组，而新生血管增生情况两者无差别。2个月时，除上皮细胞修复羊膜移植组优于对照组外，其他与对照组相比无差异。3个月组情况与2个月组相似。结论 羊膜移植治疗兔角膜重度碱烧伤，早期可促进角膜上皮细胞修复，并能部分减轻基质浸润。     

上丘提取液促培养大鼠视网膜神经细胞生长的研究

目的　观察上丘提取液（ＳＣＥ） 能否促进培养大鼠视网膜神经细胞的存活和生长。 方法　１２ 只生后２ ～３ 天ＳＤ 大鼠视网膜组织经胰蛋白酶消化后制成细胞悬液后,接种于覆有鼠尾胶原的９６ 孔培养板（７５ μｌ／ 孔,约１ ×１０５ 细胞／孔） 。分为１ ,３ ,５ 天培养组,每一培养时期又分为对照组和ＳＣＥ 组。分别用ＭＴＴ 微量自动比色法测量存活细胞ＯＤ 值。结果　培养在鼠尾胶原上的视网膜神经细胞生长良好。培养１ ,３ 天时,ＳＣＥ 组细胞存活ＯＤ 值明显高于同时期对照组（ Ｐ＜ ０ ．０１） ,培养５ 天时,ＳＣＥ 组ＯＤ 值约为对照组的２ 倍（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。 结论　ＳＣＥ 能明显促进培养鼠视网膜神经细胞的存活和生长,可能是由于ＳＣＥ 中存在促进视网膜神经细胞生长的神经营养因子     

准分子激光对角膜内皮细胞影响的实验研究

目的 观察激光角膜光学切除术（ｐｈｏｔｏｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ ｋｅｒａｔｅｃｔｏｍｙ,ＰＲＫ）对角膜内皮细胞损伤的可能性。方法 采用有血清和无血清培养正常兔角膜和ＰＲＫ切削深１５０μｍ角膜１ｗｋ后,观察内皮细胞形态和内皮细胞密度。结果 ＰＲＫ切削深１５０μｍ无血清培养１ｗｋ后,角膜内皮细胞形态、大小不一,部分细胞边界染色较宽,内皮细胞密度明显低于对照组（Ｐ〈０．０５）。ＰＲＫ切削深１５０μｍ有血清     

青光眼滤过性手术中联合应用丝裂霉素C后低眼压性黄斑病变二例

1 临床资料 1．1 病例 例1：患者，男，36岁。于2001年诊断为左眼开角型青光眼。因使用降眼压药物后眼压控制不佳，于2003年6月行左眼小梁切除术，术后初期眼压控制良好。约半年后患者左眼眼压逐渐升高，查体发现原滤过泡完全消失，形成纤维瘢痕。遂联合使用多种降眼压药物，但效果不佳，于2008年4月23日再次行左眼小梁切除术。     

中心视野检查联合周边视野检查在青光眼诊断中的价值

目的探讨中心视野检查联合周边视野检查是否能减少青光眼诊断的漏诊率。方法病例组（青光眼患者）84例（165只眼）与对照组（按性别、年龄、文化程度与病例组相配比的正常人群）110例（220只眼）分别使用Octopus101自动电脑视野计进行中心视野检查和周边视野检查,将中心视野检查及中心与周边视野检查的联合结果请三位医生在盲法的情况下独立进行分析评价,最后将评价结果进行统计学的分析,计算出漏诊率。结果病例组中中心视野检查结果异常的有129只眼,而中心视野检查联合周边视野检查结果异常的有153只眼;对照组中中心视野检查结果异常的有17只眼,而中心视野检查联合周边视野检查结果异常的有36只眼。将其中的中心视野检查结果与联合视野检查结果相比较,使用SPSS11.5统计软件进行分析可知：中心视野检查联合周边视野检查漏诊率为7.3%,单独的中心视野检查的漏诊率为21.8%,P=0.000〈0.05,具有统计学意义。结论使用Oc-topus101自动电脑视野计中心视野检查联合周边视野检查能减少青光眼诊断的漏诊率。     

青光眼视神经保护的研究进展

视网膜神经节细胞死亡是青光眼视神经损伤的最终共同通路,阻断视神经损伤通路和增强视神经存活机制的方法称为视神经保护。目前这一研究领域主要包括抗凋亡途径,促红细胞生成素,谷氨酸拮抗剂,钙离子拮抗剂,一氧化氮合酶抑制剂,神经营养因子,自身保护性免疫,抗青光眼药物等方面。将来视神经保护将成为一种重要的青光眼辅助治疗措施     

灯盏细辛对兔高眼压视网膜神经节细胞及视神经损伤的保护作用

目的观察灯盏细辛对慢性高眼压兔视网膜神经节细胞(RGCs)及视神经损伤的保护作用。方法20只兔制成慢性高眼压模型后随机分成灯盏细辛治疗组(高眼压加灯盏细辛治疗亚组和正常眼压加灯盏细辛治疗亚组)和未治疗组(单纯高眼压亚组和单纯正常眼压亚组),治疗组于高眼压持续7 d后行灯盏细辛灌胃。60 d后取眼球和视神经标本做光镜及电镜检查,观察RGCs密度、视网膜神经纤维层(RNFL)厚度和视神经轴突,并采用计算机图像分析系统定量分析。电镜观察RGCs和视神经轴突超微结构改变。结果①高眼压两亚组与正常眼压两亚组比较,RNFL厚度、RGCs密度减小,轴突数量减少(P<0.05);高眼压加灯盏细辛治疗亚组与单纯高眼压亚组比较,RNFL厚度和RGCs密度大,轴突数量多。②高眼压两亚组胞浆内细胞器数量减少,线粒体空泡变性,轴突排列紊乱,髓鞘变性;但高眼压加灯盏细辛治疗亚组仍有散在细胞器,髓鞘相对不规则,轴突内微管和微丝肿胀,但不消失。结论灯盏细辛对高眼压后RGCs和视神经变性有一定的保护作用。     

羊膜抑制兔角膜眼表纤维化的研究

目的探讨羊膜移植抑制眼表纤维组织增生的机制.方法将传代的兔角膜成纤维细胞接种于羊膜基质面,分别培养1d和7d,采用吖啶橙法观察羊膜对成纤维细胞凋亡的影响.同时采用原位杂交法,观察成纤维细胞中bFGFmRNA表达的变化.结果羊膜对培养1d和7d的兔角膜成纤维细胞均有明显地抑制凋亡作用.在羊膜基质面培养1d的兔角膜成纤维细胞,其bFGFmRNA的表达与对照组相比无明显改变,而培养7d后,bFGFmR,NA的表达明显下降.结论羊膜不仅有抑制体外培养的兔角膜成纤维细胞凋亡的作用,而且还能抑制体外培养的兔角膜成纤维细胞bFGFmRNA的表达,由此可部分解释羊膜抑制纤维增生的机制.     

羊膜移植治疗眼表疾病的近期疗效

目的观察羊膜移植治疗不同眼表疾病的近期疗效。方法对24名翼状胬肉行胬肉头颈部切除合并结膜羊膜移植术，对8名角膜疾病的患者进行角膜表面羊膜移植术，术后定期随访。结果翼状胬肉平均随访时间3.7±2.2月，手术成功率为79.1％，复发率20.8％。角膜病组中6例术后2～4周角膜上皮愈合，1～2月角膜基质内可见新生血管伸入。结论羊膜移植可以抑制结膜下及角膜的纤维化，促进结膜、角膜的上皮化。