肠道病毒71型重组VP1蛋白的原核表达及初步鉴定

目的利用大肠杆菌原核表达系统表达并纯化肠道病毒71型(EV71)VP1蛋白,并对重组蛋白功能进行初步鉴定。方法 PCR扩增EV71VP1全长基因,在测序正确的基础上,将其插入表达载体pET28a(+),构建表达质粒pET28a(+)/VP1,转化表达菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,利用Ni 2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,经ELISA和Western Blot,验证EV71VP1的抗原性。结果成功构建pET28a(+)/VP1重组质粒,经大肠杆菌表达、纯化获得分子量约为43kDa的融合蛋白,经ELISA和Western Blot,结果显示该蛋白有良好的抗原性。结论实现了肠道病毒7l型VP1蛋白的原核高效表达,为肠道病毒71型诊断试剂和疫苗的研究奠定基础。     

16例产时子痫的护理体会

子痫是妊娠高血压综合征的最危重阶段 ,如抢救不及时 ,护理不当 ,可因抽搐、昏迷或由此而发生的并发症导致母婴死亡。 1995年 1月～ 2 0 0 1年 12月本院共收治产时子痫 16例 ,现将抢救护理体会总结如下。1　临床资料16例中第一胎 8例 ,第二胎 5例 ,第三胎 3例 ;年龄 2 2～ 3 0岁 ;孕 3 8～ 41周。 16例病人中 ,有 3例入院时宫口已开全 ,余13例宫口开 0～ 4ｃｍ。宫口开全及产程进展快者 ,在控制抽搐后 ,阴道助产。本组 5例行阴道助产 ,11例行剖宫产。全部病例均治愈 ,母婴平安出院。2　临床特点本组病例入院时 ,血压均在 2 2～ 2 4/15～ 16…     

哌唑嗪治疗高血压病30例近期疗效观察

盐酸哌唑嗪是喹唑啉(Quinazoli-ne)衍生物,为突触后α-受体阻滞剂,系一新型口服降压药。本文总结了近三个月来哌唑嗪治疗高血压病30例近期疗效观察,主要了解哌唑嗪的降压效果及其副作用。     

右束支传导阻滞心电图形及其临床意义

完全性右束支传导阻滞（CRBBB）在临床上颇为常见，它不同于左束支传导阻滞，除可见于各种器质性心脏病外，还可见于“健康人”，在人群体检中，虽然经病史询问、心脏听诊、X线心脏透视或摄片、血脂测查等筛查，发现右束支传导阻滞者，大多无明显自觉症状和器质性心脏病的诊断依据。     

空气含菌量检测方法简介与商榷

准确采样和检测空气中微生物数量，是评价环境卫生质量及控制污染措施的重要指标之一。目前，国内外空气微生物检测方法及采样器种类较多，但从许多报道及我们自身检测情况看，各种方法检测所得数值不一，给评价工作带来困难。为使检测方法日趋统一、规范，现就当前空气含留量检测方法及相应所用产品作一介绍，并就监测方面有关问题与同道商榷。l常用空气含由量检测方法根据采样原理可分为沉降法、固体撞击、液体冲击和过滤法等4大类。1·1沉降法平板沉降法是其中最简便、国内最常用的方法。它是使空气中微生物粒子自然沉降在营养琼脂平板上…     

人高尔基体蛋白GP73基因的克隆?表达?单克隆抗体的制备及鉴定

目的:高尔基体蛋白73(Golgi protein 73,GP73)是新近发现的肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的重要血清学标志物?通过克隆?表达人GP73,制备抗GP73单克隆抗体并鉴定其特性?方法:克隆GP73基因,构建GP73原核表达载体pComb3XSS-GP73,诱导表达,以HisFF Trap亲和层析柱纯化GP73-6×His重组融合蛋白?以该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗GP73单克隆抗体?以间接法ELISA检测抗体效价;Western blot鉴定抗体特异性;免疫共沉淀法初步检测肝癌患者血清中GP73表达水平?结果:成功表达并纯化了GP73-6×His重组蛋白;获得5株稳定分泌抗人GP73单克隆抗体杂交瘤细胞株;免疫共沉淀证实抗GP73 单克隆抗体能与肝癌患者血清中GP73蛋白特异性结合,GP73水平在肝癌患者血清中较正常人显著升高?结论:成功制备了抗人GP73单克隆抗体,为后期建立检测人GP73的双抗体夹心ELISA方法打下基础?     

全人源抗狂犬病病毒G蛋白单链抗体制备及中和活性鉴定

目的:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,筛选针对狂犬病病毒G蛋白不同表位的单链抗体(scFv)并鉴定其中和活性?方法:分离130例经狂犬病疫苗免疫接种志愿者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,逆转录制备cDNA,构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库?以纯化的狂犬病病毒G蛋白包板筛选,对阳性克隆进行可溶性表达,并鉴定中和活性?结果:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,库容为5.0 × 107,经核酸序列分析,证实插入片段为scFv?经过5轮筛选,从富集的次级抗体库中随机挑出140个克隆,通过phage-ELISA鉴定得到4株核酸序列不同的scFv抗体?经His-Trap纯化后进行中和活性鉴定,获得1株有中和活性的scFv,其中和效价为0.13 IU/mg?结论:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,获得1株具有中和活性的抗狂犬病病毒G蛋白scFv抗体,为进一步研发狂犬病治疗性抗体药物奠定了基础?     

乳腺癌患者信息需求及其影响因素分析

目的调查乳腺癌患者信息需求水平、信息需求内容及影响患者信息需求的相关因素。方法对507例乳腺癌患者运用乳腺癌信息需求问卷进行调查。结果乳腺癌患者信息需求总分为(205.76±26.64)分,对治疗信息需求程度最高;治疗阶段、年龄、经济收入和文化程度是患者信息需求的影响因素。结论乳腺癌患者信息需求水平较高,提示临床医护人员需要重视乳腺癌患者信息需求并提供针对性的信息支持。     

颈静脉与股静脉留置针在NICU静脉输液中应用的效果比较

目的 比较颈静脉和股静脉留置针在NICU患儿中的应用效果.方法 将160例患儿按随机数字表法分为颈静脉穿刺组和股静脉穿刺组各80例.观察两组患儿留置套管针的时间、首针穿刺成功率和各种并发症发生的情况.结果 颈静脉穿刺组患儿留置套管针的时间为(7.26±2.16)d,股静脉穿刺组为(9.87±2.93)d,两组比较差异有统计学意义(t=-6.25,P＜0.05);首针穿刺成功率差异无统计学意义(P＞0.05).静脉炎、堵管、脱管、外渗、渗血、局部感染发生例数股静脉穿刺组均少于颈静脉穿刺组,差异有统计学意义(x2值分别为8.41,7.83,4.10,4.78,5.77,5.77;P ＜0.05).结论 NICU患儿选择股静脉留置套管针可以延长留置时间,降低并发症发生,减轻了患儿的痛苦,也降低了医疗费用,值得临床推广.     

补肾生血解毒方对免疫介导的再生障碍性贫血小鼠淋巴细胞分化及血液学参数的影响

目的探讨补肾生血解毒方对免疫介导的再生障碍性贫血(AA)小鼠淋巴细胞分化及血液学参数的影响。方法以~(60)Co-γ射线照射结合异源免疫细胞尾静脉注射致小鼠骨髓造血抑制模型,阳性对照药物免疫抑制剂环孢素A、中药补肾生血解毒方干预治疗,连续给药28 d。分别于第7、14、21、28天用血细胞计数仪检测外周血中血液学参数的变化;给药结束后用流式细胞仪检测小鼠外周血细胞中T细胞、B细胞、自然杀伤细胞(NK)比率的改变。结果与模型组相比,环孢素A组与补肾生血解毒方组在第21、28天,小鼠外周血中红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)、白细胞(WBC)数量均升高(P0.05),差异有统计学意义。与模型组相比,补肾生血解毒方组大鼠外周血中CD3~+CD4~+细胞比率增多(P0.01),CD3~-CD19~+细胞和CD3~-NK1.1~+细胞比率降低(P0.01),差异有统计学意义。结论补肾生血解毒方能够通过调控AA小鼠淋巴细胞分化修复骨髓造血功能,达到治疗AA的目的。