甲型血友病快速基因诊断方案研究

应用southern印迹杂交技术和PCR技术，进行人FW基因内含子18／BclI、内含子22／Xbal和St14，TaqI RFLPa连锁分析，FW基困内含子13(CA)。多态分析St14(D)（DXS52)VNTR多态连锁分析，选择最佳联合提出甲型血友病快速基因诊断的较佳方案。     

手术室实习护生职业暴露调查与分析

为了解实习护生对手术室职业暴露因素的相关知识和意识,分别对2005年6-12月轮转到手术室的实习护生和手术室的护士进行调查与分析.     

人横纹肌肉瘤细胞中Utrophin表达机制的研究

目的探讨人类横纹肌肉瘤细胞中Utrophin蛋白表达上调的可能因素。方法查阅文献,检索人类Utrophin基因启动子区域可能的调控元件,应用染色质免疫沉淀(CHIP)和凝胶阻滞实验(EMSA)加以验证。并利用RNA干扰和荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法分析人类EN1转录因子调节Utrophin表达的作用机制。结果经查阅文献获知,Utrophin基因启动子区域有2个转录因子EN1的可能结合位点,经CHIP和EMSA实验证实位点2是真正结合位点。通过RNA干扰实验,发现在人横纹肌肉瘤细胞中EN1基因沉默后,可使Utrophin mRNA水平上调。结论如果能进一步验证其蛋白表达水平亦升高,将可能为假肥大性肌营养不良基因治疗提供新的靶点。     

东北地区先天性马蹄内翻足病例-对照研究

目的 探讨中国东北地区（辽宁、吉林，黑龙江省）先天性马蹄内翻足（Idiopathic Talipes Equinovarus，ITEV）发生的可能危险因素。方法 以随访和问卷调查方式获得121个ITEV患者家系资料信息，同时选择220个正常者与其相匹配，进行病例-对照研究。结果 排除9例因合并其他畸形的ITEV患者后，剩余112例．男性与女性患者比为2．6：1，双侧马蹄足约占50％；在单侧发病的病例中，右侧多于左侧。夏冬季发病率明显高于春秋季节。在众多环境因素中，母亲孕前及孕期服药在对照组与病例组之间差异有统计学意义（x^2=8．64及13．49，P〈0．01）；孕期胎儿发育受限占病例组总例数的65．2％，与对照组相比差异有统计学意义（x^2=49．29，P〈0．01），是ITEV的高危因素；母亲孕期吸烟、饮酒及患病史在病例组及对照组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 母亲孕前及孕期用药、胎儿发育受限可能是ITEV的危险因素。     

脊髓小脑性共济失调一家系的基因诊断和产前诊断

目的 确定一脊髓小脑性共济失调(spinocerehellar ataxia,SCA)家系具体分型,并开展症状前患者检测和产前诊断.方法 收集该脊髓小脑性共济失调家系中的2例患者的血液标本,结合该家系的临床表现和我国该类疾病的发病率,采用聚合酶链反应对SCA1、SCA2和SCA3/MJD 3个基因的三核苷酸重复片段进行扩增,并通过琼脂糖凝胶电泳和PCR产物测序的方法确定所有正常和异常扩增等位基因内三核苷酸重复次数.明确致病基因后,对患者子女进行症状前检测,并对1例怀孕症状前患者进行了产前诊断.结果 SCA1和SCA2基因内三核苷酸重复次数在正常范围内,SCA3/MJD的2个等位基因中1个等位基因三核苷酸重复次数在正常范围内,另1个等位基因三核苷酸重复次数在异常范围内.患者子女有1人携带异常等位基因,胎儿携带异常等位基因.结论 该家系经基因诊断确诊为SCA3/MJD型,有1人为症状前患者,该症状前患者所孕胎儿也为症状前患者.     

脊髓性肌萎缩症的基因诊断及其应用研究

目的 对脊髓性肌萎缩症患者及携带者进行基因诊断和产前基因诊断.方法 对26例脊髓性肌萎缩症患者应用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-restiction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测SMN1基因第7外显子是否缺失;对于患者的父母应用多重PCR结合变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)的方法进行携带者诊断;而既往生产过患儿的孕妇于孕中期抽取羊水,进行产前基因诊断.结果 26例脊髓性肌萎缩症患者中查出25例存在SMN1基因第7外显子纯合缺失;患者的父母全部为SMN1基因第7外显子杂合缺失携带者;对20名既往生产过患儿的孕妇进行了产前诊断,8名存在SMN1基因第7外显子纯合缺失.结论 PCR-RFLP、多重PCR结合DHPLC技术可应用于患者及携带者基因诊断;PCR-RFLP可用于脊髓性肌萎缩症的产前基因诊断.     

人类性别决定相关基因的研究进展

人类性别决定是由SRY启动的多基因参与的复杂过程。近年来的研究表明,SRY、SOX9、WT1、SF1、AMH、DAX1及WNT4等基因都在人类性别分化与发育过程中起作用。人类性别决定相关基因的研究对性分化与发育异常等临床疾病的诊断和治疗具有十分重要的意义。     

多重置换扩增——一种新的全基因组扩增技术

全基因组扩增技术用于扩增大量的DNA以满足遗传检测的需要。在高通量的遗传分型中,处理有限的临床样本的基因组DNA,一直是个瓶颈问题。一种新方法—多重置换扩增,能高度忠实的复制整个基因组DNA,扩增出10–100 kb大小的片段,能提供大量均一完整的全基因组序列。MDA是一种简单、有效的方法,非常适用于遗传研究,法医学和临床诊断的需要。     

105例Duchenne肌营养不良患者基因突变分析

目的分析大样本Duchenne肌营养不良（DMD）患者的基因突变特点,探讨基因型与表现型的关系。方法选择2005年至2009年在中国医科大学盛京医院儿科就诊的105例DMD患者。用MLPA法对患者的DMD基因的缺失/重复突变进行突变筛查,同时对先证者的母亲进行基因的缺失/重复突变检测。结果用MLPA方法在105例DMD患者中检测到54例患者有外显子缺失,17例外显子重复和2例点突变,同时检测出59例患儿的母亲为携带者。结论 105例患者中DMD基因重复突变占16.2%,突变热点集中在外显子2-20;缺失占51.4%;点突变占2%。重复突变率高于文献报道（5-10%）。