Egr-1特异脱氧核酶抑制血管平滑肌细胞增殖的研究

采用MTT比色法观察空白对照组、等浓度的早期生长反应因子-1(Egr-1)特异脱氧核酶(ED5)、杂码寡核苷酸(EDSSCR)转染后对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活性的影响.应用RT-PCR、Western blot方法观察Egr-1、转化生长因子-β1>(TGF-β1>)的表达.结果 显示,与对照组及EDSSCR相比,ED5对VSMC的增殖有明显的抑制作用;ED5转染后Egr-1、TGF-β1> mRNA及蛋白水平均明显下降.认为Egr-1 mRNA的脱氧核酶可抑制培养的VSMCEgr-1和TGF-β1>的表达,有效阻止VSMC增殖.     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定西洋参中游离氨基酸

目的:建立了一种利用反相高效液相色谱同时测定西洋参中17种游离氨基酸的分析方法.方法:以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,用Venusil-AA氨基酸分析专用柱(5μm,4.6 mm×250 mm),醋酸钠缓冲溶液(pH6.5)-乙腈溶液和80%乙腈水溶液为流动相,采用梯度洗脱,紫外检测器在254 nm波长处检测.结果:氨基酸浓度在0.5～0.012 5 μmol范围内,线性相关系数均大于0.99.17种氨基酸的平均回收率在96.5%～102.3%.结论:西洋参根中的游离氨基酸主要以精氨酸为主,占游离氨基酸总量50%以上,这一结果为进一步研究西洋参的化学成分和药理作用提供了前提条件.     

温阳益心中药对梗死大鼠心肌超微结构的影响

目的观察温阳益心中药对梗死大鼠心肌超微结构的影响,探讨其对心肌缺血-再灌注（IR）大鼠心肌的保护作用及其与心肌缺血预适应（IP）保护机制的关联性。方法选用雄性Wistar大鼠,随机分为4组,其中3组正常喂食,1组灌胃中药悬液,10d后建立大鼠心肌缺血模型。IR组：心肌缺血45min,再灌注48h。温阳益心中药预处理缺血-再灌注组（中药组）：每日灌胃温阳益心中药悬液0．36g／100g,连续10d;心肌缺血45min,再灌注48h。预适应处理缺血一再灌注组（IP组）：心肌缺血5min,再灌注5min,重复3次,然后心肌缺血45min,再灌注48h。采用电镜技术观察各组大鼠心室心肌超微结构改变。结果IR组肌膜破损,肌丝溶解断裂,排列松散,线粒体排列紊乱,有的线粒体呈空化或局部空化状,有的呈凝聚状,糖原减少。心肌损害较重,证实心肌缺血-再灌注后部分心肌坏死。中药组、IP组心肌细胞状态有所改善,肌膜完整,心肌细胞核呈椭圆形,核仁明显,线粒体较为明显,肌丝排列较为整齐,肌节明暗带清晰可见,线粒体较为整齐地排列在肌原纤维之间,但仍可见有些肌丝断裂及个别线粒体部分空化。结论心肌缺血预适应和温阳益心中药预处理可以通过减轻心肌超微结构损伤而保护缺血心肌,且二者对缺血再灌注大鼠心肌的超微结构损伤保护效应相近。     

体外反搏联合补肾通络方抑制冠状动脉炎症反应临床研究

目的观察体外反搏联合补肾通络方对冠心痛（CHD）肾阳亏虚兼痰瘀内阻证患者的临床疗效、心功能变化以及对冠状动脉炎症反应的抑制作用。方法将70例冠心病不稳定型心绞痛患者,随机分为治疗组（36例）和对照组（34例）,两组患者基础治疗相同。治疗组给予体外反搏联合补肾通络方治疗,每日反搏1次,每次1h,12次为1疗程,连续治疗3个疗程;同时给予中药补肾通络方治疗,每日水煎取汁200mL,分两次口服,共服药6周。时照组口服麝香保心丸,每次2粒（每粒22．5mg）,每日3次,共服药6周。分别于治疗前后采集空腹肘静脉血,测定血清高教C-反应蛋白（hs—CRP）、白细胞介素-18（IL-18）、巨噬细胞集落刺激因子（M—CSF）。结果两组治疗后血清hs—CRP、IL-18、M—CSF水平均明显降低（P〈0．05或P〈0．01）,且治疗组治疗后hs—CRP、IL-18、M—CSF水平低于对照组（P〈0．05或P〈0．01）。心功能部分指标改善治疗组优于对照组（P〈0．05）。结论体外反搏联合补肾通络方具有良好的临床疗效,其抑制冠状动脉炎症反应作用可能是其治疗冠心病肾阳亏虚兼痰瘀内阻证的机制之一。     

桡动脉掌浅支Flow-through皮瓣在伴复合组织缺损断指再植中的应用

目的探讨桡动脉掌浅支Flow-through皮瓣在伴复合组织缺损的断指再植应用的临床疗效、手术注意事项以及皮瓣供区损伤的控制策略。方法自2015年3月至2021年8月, 南方医科大学附属小榄医院手足外科对11例手指离断伴皮肤、血管、神经缺损的患者, 急诊采用桡动脉掌浅支Flow-through皮瓣进行桥接修复相应的缺损组织, 完成断指再植。术中根据缺损创面大小, 于腕横纹水平桡掌侧设计皮瓣, 以桡动脉掌浅支走行为轴心线, 皮瓣宽度不超过2.0 cm, 长度2.0～5.0 cm, 皮瓣内携带前臂外侧皮神经终末分支或桡神经浅支鱼际分支备用。皮瓣内动脉桥接修复指掌侧固有动脉, 皮瓣内携带的神经桥接修复指掌侧固有神经。术后观察皮瓣及再植指的成活情况, 门诊定期随访手指外观、感觉、腕及手指关节功能, 并参照中华医学会手外科学会上肢部分功能评定试用标准评定功能恢复情况。结果 11例皮瓣及断指全部成活, 其中1例发生动脉血管危象, 探查后成活。术后随访5～36个月。皮瓣外观不臃肿, 质地优良, 颜色与受区相近, 皮瓣TPD为8～10 mm;除1例出现轻度瘢痕挛缩外, 其余再植指体外形及功能均恢复良好...     

梅毒RPR、TPPA、TPHA试剂盒临床血清实验比较

[目的]了解快速血浆反应素环状卡片试验（rapid plasma regain circle card,RPR）、螺旋体血球凝结试验（treponema pallidum gemagglutination assay,TPHA）、螺旋体明胶凝结试验（treponema pallidum particle agglutination,TPPA）在诊断梅毒中的意义。[方法]采用三种试剂盒,检测60例经临床确诊的梅毒患者、44例健康体检者血清中的梅毒抗体。[结果]在60例梅毒患者血清中,RPR试验50例（20例Ⅰ期梅毒和30例Ⅱ期梅毒）呈阳性反应,阳性检出率为83．3％;TPHA试验38例（8例Ⅰ期梅毒和30例Ⅱ期梅毒）呈阳性反应,阳性检出率为63．3％：TPPA试验60例（20例Ⅰ、30例Ⅱ期和10例早期潜伏梅毒）均呈阳性反应,阳性检出率为100％。在44例健康者血清中,三种试剂均未检测到梅毒抗体。[结论]TPPA试剂具有高度敏感性及特异性,不仅能准确鉴定Ⅰ、Ⅱ期梅毒,还可较早地筛选出早期潜伏梅毒,缩短了梅毒的窗口期。     

雾化吸入法构建博来霉素致大鼠肺间质纤维化模型

目的：特发性肺间质纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)是一种进行性且致命性疾病。病变局限于肺部,引起弥漫性肺纤维化,从而导致肺功能的损害[1]。呼吸困难是肺间质纤维化的标志性症状[2]。发病呈逐年上升趋势,即弥漫性肺纤维病变,是致命性的肺部疾病[3];本实验采用重复刺激、雾化吸入博来霉素的方式建立肺间质纤维化大鼠的模型,使其更接近人类的肺间质纤维化。为进一步肺间质纤维化临床药物试验提供更好的模型制备。方法：本实验采用重复刺激、雾化吸入博来霉素的方式,观察大鼠的一般状态,运用HE、Masson染色观察肺部细胞及肺组织结构变化;通过CT(HRCT)观察肺部影像学变化。结论：通过重复刺激,雾化吸入博来霉素的方式,观察大鼠的一般状态,运用HE、Masson染色显示大鼠肺泡结构不完整,肺泡间隙明显变宽,部分肺泡结构出现紊乱和塌陷的情况,同时伴有炎性细胞的堆积和浸润;影像学显示大鼠的肺部呈磨玻璃或网状弥漫性肺间质改变。     

修复鼻翼软骨肌肉环在单侧唇裂鼻畸形二期整复中的意义

目的探索单侧唇裂鼻畸形的二期有效整形修复方法。方法对58例先天性唇裂鼻畸形患者进行二期整复,采用鼻翼软骨支架重塑修复鼻翼软骨纤维环,鼻肌移位固定重建鼻翼软骨肌肉环,并辅以鼻小柱延长和鼻表浅肌肉腱膜瓣修整术整复。结果本组病例术后双侧鼻翼及双侧鼻孔均对称,鼻表情运动和鼻孔舒缩功能恢复。平均随访9个月,均效果满意。结论鼻翼软骨环状结构发育不良或断裂是形成先天性鼻畸形的重要解剖学基础,重建鼻翼软骨环状结构是确保手术疗效的关键。     

健脾活血解毒法拆方含药血清对人大肠癌细胞HCT-116细胞的增殖抑制作用及其机制研究

目的:探讨健脾活血解毒法拆方含药血清对人结直肠癌细胞系HCT-116细胞的生长、细胞凋亡率、细胞凋亡相关基因和自噬基因表达的影响.方法:实验分为对照组、健脾组、活血组、解毒组、健脾活血组、健脾解毒组和健脾活血解毒组,分别采用酸性磷酸酶法(APA)、流式细胞术(FCM)和Western blot法检测各组含药血清对肿瘤细胞的生长、细胞凋亡率的变化、凋亡相关基因Caspase-3表达以及自噬相关基因LC3表达.结果:各组10％含药血清作用24h后均能抑制HCT-116细胞增殖,但组间不具有明显差异.光镜下可见,健脾活血解毒法各组含药血清作用24 h后,细胞数量减少,且体积变小;细胞早期及中晚期凋亡率与对照组相比无显著性差异,但自噬相关蛋白LC3出现活性剪切条带.结论:健脾活血解毒法含药各拆方血清体外可抑制人结直肠癌HCT-116细胞增殖,机制可能与自噬作用通路密切相关.