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目的:本研究通过使用泛素特异性蛋白酶4(USP4)抑制剂Vialinin A干预大鼠脂肪干细胞(ASCs)的生长分化,探究USP4对ASCs的成骨分化的影响。方法:将分离培养至第3代的ASCs细胞分为6组分别用含0、0.1、0.5、1、5、10μmol/L Vialinin A的培养基培养10 d,CCK-8检测各组细胞增殖情况。将第3代细胞分为实验组、阳性以及阴性对照组,分别用含0.5μmol/L Vialinin A的成骨诱导液、不含Vialinin A的成骨诱导液及普通的α-MEM培养。检测各组第7天细胞内USP4、β-catenin、碱性磷酸酶(ALP)及骨桥蛋白(OPN)基因的表达。将3组细胞培养至第4、7、10、14天进行ALP染色,检测ALP的活性;培养至21 d时进行茜素红染色,检测细胞矿化结节的形成。采用t检验比较组间数据差异,P<0.05时差异具有统计学意义。结果:0.5μmol/L Vialinin A处理的实验组细胞增殖趋势与对照组的差异无统计学意义,表明该浓度的Vialinin A对细胞增殖无影响,作为后续实验组浓度。ALP与茜素红染色结果显示实验组染色效果均较其他组显著。RT-qPCR结果显示与阴性对照组相比,阳性对照组与实验组细胞内USP4与β-catenin表达量较低,差异具有统计学意义。实验组与阳性对照组相比无显著性差异。与阳性对照组相比,实验组的ALP与OPN表达量显著升高,差异具有统计学意义。结论 :0.5μmol/L的USP4抑制剂Vialinin A可以促进大鼠ASCs内ALP与OPN基因的表达。但USP4可能并非通过β-catenin途径调节其成骨分化。 相似文献
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目的:通过观察中药肝复康中剂量浓度含药血清对肝星状细胞T6(hepatic stellate cell-T6,HSC-T6)细胞株中核因子-κB(NF-κB)、Ⅰ型胶原(TypeⅠCollagen,ColⅠ)及Ⅲ型胶原(TypeⅢCollagen,ColⅢ)基因表达的影响,探讨其抗纤维化的作用及分子机制。方法:常规方法制备肝复康中剂量浓度含药血清,并用肝复康含药血清干预,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-Blot方法观察分析NF-κB、ColⅠ和ColⅢ表达的变化并探讨其相关性。结果:经乙醛刺激后的HSC-T6细胞株NF-κB、ColⅠ和ColⅢ表达均上调,肝复康中剂量浓度含药血清处理后可明显下调上述基因的表达。结论:中药肝复康抗纤维化的机制可能与其抑制NF-κB及ColⅠ、ColⅢ的表达有关。 相似文献
95.
目的观察早期生长反应因子1特异诱骗寡核苷酸对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞中早期生长反应因子1和富含半胱氨酸蛋白61表达的影响,初步探讨早期生长反应因子1特异诱骗寡核苷酸抑制血管平滑肌细胞迁移的机制。方法体外培养血管平滑肌细胞并转染早期生长反应因子1特异诱骗寡核苷酸,采用逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学法检测转染后不同时间点对照组与实验组血管平滑肌细胞中早期生长反应因子1及富含半胱氨酸蛋白61的mRNA和蛋白的表达变化,划痕法测定血管平滑肌细胞迁移距离。结果早期生长反应因子1及富含半胱氨酸蛋白61的mRNA和蛋白在对照组、诱骗组及诱骗对照组中均有表达。在不同时间点,诱骗组早期生长反应因子1及富含半胱氨酸蛋白61的mRNA和蛋白的表达均低于对照组(P<0.05)。转染后48 h,对照组、诱骗组及诱骗对照组血管平滑肌细胞的迁移距离分别为105.23±7.81μm、58.65±12.68μm、106.47±7.60μm,诱骗组血管平滑肌细胞的迁移距离明显低于其他两组(P<0.01)。结论对体外培养的血管平滑肌细胞转染早期生长反应因子1特异诱骗寡核苷酸可以抑制早期生长反应因子1及富含半胱氨酸蛋白61的mRNA和蛋白表达,从而抑制血管平滑肌细胞的迁移。 相似文献
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目的 报道应用游离尺动脉腕上皮支上行支皮瓣修复指损伤的临床效果. 方法 2008年6月至2011年11月,我科应用以尺动脉腕上皮支上行支为蒂的游离皮瓣修复手指软组织缺损12例,软组织缺损面积2.0 cm×1.5 cm~5.0 cm ×3.0 cm,皮瓣面积2.3 cm×1.8 cm~5.5 cm×3.5 cm.8例手术在切取皮瓣同时切取前臂内侧皮神经,并将皮瓣内前臂内侧皮神经与受区指固有神经吻合. 结果 12例皮瓣全部成活,2例皮瓣较臃肿,1例患者工作中皮瓣发生破溃,经换药后愈合.术后随访3个月~3年,皮瓣外形与功能满意,皮瓣内吻合神经者,两点辨别觉恢复至6~8 mm. 结论 尺动脉腕上皮支上行支解剖位置恒定,切取容易.该皮瓣供区隐蔽,可恢复部分感觉,术后并发症少,是修复手指软组织缺损的较好方法. 相似文献
97.
目的:探讨急性脑梗死患者神经功能缺损程度与舌下络脉瘀滞程度、pH值的相关性。方法:选择2015年度在本院神经内科住院的全部急性脑梗死(发病时间在24h内的非溶栓治疗)患者120例,评测神经功能缺失程度分型,舌下络脉瘀滞程度分级,舌面pH值,进行三者相关性分析。结果:120例病例中,舌下络脉瘀滞111例,占92.5%,舌下络脉瘀滞程度分级与神经功能缺损程度分型有关(P<0.05),舌下络脉瘀滞程度分级随神经功能缺损程度增高而增加的趋势;舌面pH均值5.55±0.91,舌面pH值随舌下络脉瘀滞程度分级增加、神经功能缺损程度分型加重而差异显著(P<0.05),均呈现下降的趋势。结论:舌面pH值、舌下络脉瘀滞程度分级与神经功能缺损程度分型具有较好的相关性,对指导临床有一定帮助。 相似文献
98.
王莎莎刘鑫张月赵凌李剑男蔡广知 《中国临床药理学杂志》2018,(13):1554-1557
目的在构建核转录因子-κB(NF-κB)通路报告基因模型后,研究竹节香附素A(RDA)抗炎的作用及其作用机制。方法用双荧光素酶报告基因技术,以p NF-kappa B-Luc(p NF-κB-Luc)、pr L-tk质粒转染RAW 264.7细胞,脂多糖(LPS)为激活剂,构建靶向NF-κB通路的报告基因模型,RDA和吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)分别给药验证模型。空白组给予空白培养基,模型组给予含LPS的培养基,对照组给予含PDTC的培养基,实验组给予含RDA的培养基。用Western-blot技术检测RDA对细胞蛋白p65和IκBα表达的影响。结果当LPS浓度为10μg·m L^(-1),转染试剂量为2μL时,成功构建靶向NF-κB通路的报告基因模型。RDA能够降低转染后细胞内p65和IκBα亚基的磷酸化,显著抑制NF-κB信号通路。结论本文构建的模型具有快速、稳定、特异、高通量等特点,可用于抗炎活性成分筛选,确认RDA的抗炎机制与NF-κB通路有关。 相似文献
99.
目的了解河北省唐山市高龄老年人日常生活照顾需求情况并分析其影响因素。方法于2016年7月—2017年1月采取分层随机整群抽样的方法,选取河北省唐山市工人医院和唐山市弘慈医院直属10个卫生服务中心下属的32个社区(分布于唐山市区东南西北中),对在社区登记户籍的年龄≥75岁的3 448位居民应用日常生活照顾需求问卷、The CFAI衰弱综合评估量表、孤独量表、社会支持评定量表进行问卷调查。结果对日常生活照顾无需求者1 784人(51.7%),轻度需求者860人(24.9%),重度需求者804人(23.3%),需求率48.3%。其中,需求项目中需求率前5位依次为使用公共车辆(38.7%),做饭菜(32.4%),购物(31.8%),做家务(31.7%),洗衣(28.0%)。有序logistic回归分析显示,较低年龄(OR=0.263)、空巢(OR=0.591)、高社区活动参与度(OR=0.366)、高月收入(OR=0.324)、低孤独感(OR=0.022)、衰弱程度轻(OR=0.179)、认知功能好(OR=0.269)、无慢性病(OR=0.490)为日常生活照顾需求的保护因素;接受居委会提供服务低(OR=1.631)、自评健康差(OR=14.850)、与子女交流少(OR=2.012)、无医保(OR=1.761)为日常生活照顾需求的危险因素。结论高龄老年人日常生活照顾需求者近半,形势堪忧,应建立完善照顾服务体系,以满足老年人日常生活照顾需求,提高其生存质量。 相似文献
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