TRPC通道调节PUMA的表达参与NO诱导海马神经元凋亡的研究

目的探讨TRPC离子通道通过p53通路参与一氧化氮供体硝普钠(SNP)诱导的原代培养海马神经元凋亡。方法原代培养的海马神经元,经RT-PCR检测TRPC1-6的表达;给予SNP处理后,通过Real-time RT-PCR检测p53下游靶基因Bax、Apaf-1、PUMA和Survivin的表达;给予TRPC通道阻断剂和激活剂,检测其是否影响SNP诱导的p53下游靶基因表达。结果 TRPC在原代培养海马神经元上广泛表达。SNP处理神经元4、8、24h后,p53下游靶基因Bax、Apaf-1和Survivin表达无明显变化(P0.05)。而PUMA则在3个时间点分别增加至1.94、1.86和1.90倍,与对照组比较差异有统计学意义(P0.01)。TRPC通道阻断剂2-APB,可降低SNP诱导的PUMA上调(1.91vs1.12)(P0.01)。结论 TRPC通道可以通过调节PUMA的表达参与SNP诱导的原代培养海马神经元凋亡。     

蒿芩清胆汤和玉屏风散对流感病毒感染湿热证小鼠T淋巴细胞亚群和血清Th1/Th2细胞因子变化的影响

目的:应用蒿芩清胆汤和玉屏风散对流感病毒感染湿热证模型进行治疗,比较用药前后小鼠T淋巴细胞亚群和Th1/Th2细胞平衡的变化,初步探讨两种中药方法各自对改善小鼠免疫功能的特点,为两者更深一层差异的研究打下理论基础。方法:将75只小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药物组、蒿芩清胆汤组和玉屏风组。造模成功后分别用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)的浓度,用双抗体夹心ELISA法和酶标仪测定IL-4/IFN-rOD值,并通过换算得出其浓度。结果:与模型组相比,两组中药方剂均能升高CD3+CD4+/CD3+CD8+(P=0.001,0.04),且玉屏风散比蒿芩清胆汤效果略明显;而在Th1/Th2细胞平衡中,两种中药方剂均能降低IL-4/IFN-r浓度(P=0.006;P=0.03),蒿芩清胆汤较玉屏风散作用显著。结论:两种中药方法均能改善模型小鼠T淋巴细胞亚群比值和Th1/Th2细胞平衡,但效果有所不同,初步认为两者可能在对T淋巴细胞亚群比值和Th1/Th2细胞平衡的信号转导上存在着一定的差异,且有待于进一步的研究。     

G2／M 期阻滞因素及常用诱导方法

细胞周期检查点（ checkpoint ）是真核细胞为保证染色体数目的完整性及细胞周期正常运转而存在的重要控制机制。虽然正常细胞存在多个周期检查点,但肿瘤细胞普遍存在G1期检查点缺陷,并且肿瘤细胞在DNA损伤后,都有选择性地滞留于G2期的趋势。因此G2／M期检查点成为肿瘤治疗的一个诱人靶标［1］。当把肿瘤细胞长时间阻滞于G2／M期,一方面能够抑制肿瘤的生长,另一方面使肿瘤细胞累积DNA损伤而触发凋亡［2］,起到治疗肿瘤的效果,而采用此种治疗策略的前提就是要用有效的方法把肿瘤细胞阻滞于G2／M期。当前,国内外对G2／M期阻滞的研究主要集中于周期素依赖激酶1（CDK 1）和细胞周期素B（Cyclin B）的信号调控和细胞骨架对有丝分裂的影响,本文就G2／M阻滞的因素及常用的G2／M阻滞方法作一回顾,为发现G2／M期阻滞的新机制和方法奠定基础。     

S10l复合制剂在高温下抗疲劳作用的研究

目的：探讨中药复合制剂S101在高温下的抗疲劳作用。方法：SD大鼠随机分为S101组和对照组，置仿真模拟热气候舱内进行疲劳游泳实验。记录大鼠高温下力竭时间，观察高温下急性运动后大鼠血清生化指标的变化。结果：S101组大鼠在40℃水温中平均游泳时间比对照组明显延长(P＜0．05)；高温下急性运动50dn后S101组大鼠血清钙离子、GIu、SOD浓度均高于对照组(P＜0．05)，而血清BUN、LA、MDA浓度均低于对照组(P＜0．05)，血清氮离子浓度则明显低于对照组(P＜0．01)。结论：S101可明显提高机体在高温下疲劳的耐受能力。     

热休克反应对高温诱导循环衰竭的防护作用及其机制

目的探讨热休克反应(HSR)对高温诱导的循环衰竭的保护作用及机制。方法24只SD大鼠随机分为热休克组、高温对照组和常温对照组3组。热休克组给予热休克预处理,而高温对照组则否。两组常温恢复20 h后予以高温热暴露处理,其间监测记录血压、心电。热暴露至73 min时终止实验,检测心肌丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量;运用Chart软件,获取平均动脉压(MAP)、收缩压(SP)、舒张压(DP)、心率(HR)等数据。常温对照组不予任何处理,以获得上述数据的正常值。结果(1)热暴露73 min时,热休克组与高温对照组动物的MAP、SP、DP值明显低于常温对照组(P<0.01),HR值高于常温对照组(P<0.01)。热休克组与高温对照组相比热休克组表现出更高的MAP、SP、DP(P<0.01)、HR值(P<0.05)。(2) 热暴露73 min时,高温对照组心肌MDA、NO含量显著高于常温对照组(P<0.01)。而此时热休克组心肌MDA含量明显低于高温对照组(P<0.05),并与常温对照组无显著差异。热休克组心肌NO含量亦较高温对照组明显为低(P<0.01)。结论HSR可减轻高温诱导的循环衰竭,此作用与HSR抑制热暴露大鼠心肌MDA、NO的生成有关。     

黄芪多糖对脂多糖诱导人THP21单核细胞MCP-1与IL-6表达的影响

目的通过研究黄芪多糖（astragalus polysaccharide,APS）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导人单核细胞株TI-IP21细胞趋化蛋白1（monocyte chemoattractant protein1,MCP-1）及白介素6（imerleukin．6,IL-6）的表达影响,探讨炎症状态下APS对单核细胞炎症因子表达的调控。方法体外培养人单核细胞THP21,以脂多糖刺激建立炎症细胞模型。以MTT法检测黄芪多糖对细胞的毒性,以荧光定量RT-PCR法检测黄芪多糖对THP21细胞MCP-1与IL-6mRNA水平表达的影响,以ELISA法检测黄芪多糖对THP21细胞MCP-1与IL-6细胞外分泌的影响。结果黄芪多糖在50、100、200μg／mL浓度下对THP21细胞均无明显毒性,100μg／mL的黄芪多糖明显抑制LPS诱导THP21细胞MCP-1与IL-6mRNA表达的增加及培养上清中MCP—1与IL-6的增加。结论黄芪多糖抑制脂多糖诱导的人单核细胞株THP21中MCP-1与IL-6的表达及分泌。     

防治高温高湿环境下犬肢体火器伤进行性损伤方法的研究

将18只健康雄性杂种犬随机分为高温高湿组、常温常湿组和热习服组,肢体枪伤后分别置入相应的人工气候舱。于伤后0、4、6、8、12、24h进行组织形态学及细菌学指标的检测。结果发现,热习服组伤肢肿胀和局部病理变化较高温高湿组明显减轻及推迟,但较常温常湿组严重并提前;局部组织菌落计数达到感染临界的时限,热习服组与常温常湿组均为12h,高温高湿组为8h,热习服组感染时限明显晚于高温高湿组。提示热习服的获得可减缓高温高湿环境下火器伤后的组织病理变化,热习服锻炼对机体在热环境下的损伤有保护作用。     

着雨衣热习服锻炼对血乳酸与血气的影响

目的 探索着雨衣服锻炼方法及其对机体血乳酸和血气的影响。方法 男性战士１２名,进行连续１１天的热习服锻炼。其中第１、６、１１天,受试者在人工热室内进行标准试验。其余日穿着军用雨衣在户外锻炼。结果 热应激的第１天对机体血液酸碱平衡产生了不利影响;经过１１在的热习服锻炼后,呈现出了明显的习服表现,血气指标均接近实验前水平,血乳酸含量增幅明显降低。结论 这种锻炼方式能有效地稳定机体酸碱平衡及提高耐热能力。     

大鼠高温热疗模型的建立与评价

目的 探讨模拟全身高温热疗大鼠模型的建立条件及其对血脑屏障(BBB)及脑组织病理学的影响.方法 40只成年雄性SD大鼠被随机分为对照组(C组)、实验A组(Ma组)、实验B组(Mh组)和实验C组(Mc组),每组10只.C组大鼠置于25～26℃室温下4 h;Ma、Mb和Mc组大鼠放入具备生物氧供给的加温仓中,仓内温度分别为34、36和38℃(风速25 cm/s,相对湿度65%),加温3 h后出仓,在室温下降温.加温期间监测肛温、心率(HR)、平均动脉压(MAP)、血气、麻醉药物用量及大鼠死亡情况.当大鼠肛温降至37℃后经股静脉注射伊文思蓝(EB),5 min后经心脏灌注肝素生理盐水至右心耳流出液清亮为止.开颅取脑组织,分别检测脑组织含水量;EB测定法观察大鼠BBB通透性;光镜和电镜下观察脑组织、脑细胞和BBB病理学改变.结果 各组大鼠麻醉药物用量差异无统计学意义.各实验组大鼠肛温较C组明显升高,差异有统计学意义(P均＜0.01).Mc组死亡4只大鼠,Ma组、Mb组各死亡1只.与C组比较,各实验组大鼠HR明显加快,MAP和pH值明显降低,差异有统计学意义(P均＜0.05);脑组织含水量及EB渗出量明显增多(P＜0.05或P＜0.01);而动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)和血细胞比容(HCT)均无显著差异.光镜下观察Ma组脑组织轻度水肿,而Mb组和Mc组都出现中、重度水肿改变.电镜下观察Mb组和Mc组大鼠神经元胞体水肿严重,胞质变空,BBB中内皮细胞中有空泡形成,胶质细胞足板肿胀;而Ma组则未见损害改变.结论 维持36℃加温3 h可使大鼠平均肛温达41～42℃,并引起大鼠BBB破坏、脑水肿及脑细胞损伤的发生,大鼠死亡率低,实验成功率高,建模条件理想.