护士发生腰椎间盘突出症的现况分析

腰椎间盘突出症是临床常见病、多发病,以反复发作的慢性疼痛为主要表现,严重影响病人的生活和工作质量,而反复弯腰、扭转、承重等慢性积累伤是发生腰椎间盘突出症的主要诱因。国外文献报道,护士腰背痛终身患病率和现患率均高于一般办公室人员。     

T淋巴细胞标记染色—ANAE法的改进

用酸性α—醋酸萘酯酶染色法(ANAE法)检测血液中的T淋巴细胞及其亚群，来观察机体的细胞免疫功能，已广泛应用。AKAE法虽较简单，但影响因素很多，我们在常规染色方法的基础上，对几个主要步骤进行了改进，效果较好。     

大鼠脑缺血对海马bFGF表达的影响

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作为多种细胞的丝裂原，参与神经元的保护、修复和抗细胞凋亡作用。在几种脑缺血模型中均可见到该蛋白基因的mRNA或蛋白本身表达增加及可能的机制。在给以外源性的bFGF实验中，发现此蛋白在脑缺血时表现出强大的神经保护作用，使脑梗塞面积减小，脑水肿程度减轻，存活神经元数量明显增加，尤其在协同其他神经营养因子时更为显著，显示出良好的应用前景。     

心脑血管疾病患者血清总胆汁酸与血脂分析

目的探讨在心脑血管疾病中血清总胆汁酸水平变化的临床意义。方法脑中风病组29例、高血压病组36例、冠心病组31例、健康对照组51例,日立7170型自动生化分析仪,总胆汁酸(TBA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度胆固醇(HDL-c)、低密度胆固醇(LDL-c)、载脂蛋白AⅠ(ApoAⅠ)检测。结果脑中风病、高血压病、冠心病组的血总胆汁酸高于健康对照组,高血压组血清总胆汁酸为最高。结论血脂代谢紊乱可使胆汁酸水平发生变化,胆汁酸可能参与血压的调控,并与脑血管疾病的发生有一定的关系。     

模拟推拉动作对大鼠脑皮层神经元损伤的实验研究

目的 探讨大鼠经不同强度推拉动作暴露后，脑皮质神经元损伤程度和时相变化规律。方法 健康雄性Wistar大鼠35只，随机分为7组，每组5只；除对照组外，各组大鼠于暴露后0.5,6,24h进行灌注固定，取大脑半球，切片后分别进行HE染色和尼氏染色，镜下观察结果。结果 实验B2，B3组可见大鼠额叶皮质有一定数量的神经元形态发生改变。但实验B3组损伤程度相对较轻，其他各组无明显变化。结论 低强度推拉动作不会引起明显的大鼠脑皮质神经元损伤，而高强度推拉动作可对大脑造成较大损害。     

不同冻存复苏条件影响K562细胞的生物学特性

目的:观察不同冻存复苏条件对白血病K562细胞株生物学特性的影响,并优化培养条件与方法。方法:实验于2006-02/2006-04在吉林医药学院临床检验实验室进行。①将欲冷冻保存的细胞调整到良好的生长状态,即对数生长期。将细胞分成密度相同的4个组。离心收集后分别加入冻存保护液二甲基亚砜,其终浓度依次为5%、10%、15%、20%分装于冻存管。冻存15d后,每组取出1支复苏并接种于细胞培养板培养。培养12h后吸取少量实验细胞,加入等体积的0.1%台盼蓝染液,5min后在血球计数板上计数,被染成深蓝色的细胞为死细胞;染色很淡、边缘光滑且胞体透明的细胞为活细胞。每个标本计数500个细胞,计数2次取平均值,计算细胞的复苏率。②选择冻存条件和冻存细胞密度相同的2支冻存细胞,采用2种不同的方法进行复苏。第1组:立即将冻存管置37℃水浴中,待融化后1000r/min离心5min,吸去上清液,加入含10%小牛血清的RPMI-1640培养基,混匀后接种于细胞培养板继续培养。第2组:将冻存细胞于40℃水浴中迅速溶解后转入37℃水浴箱,融化后离心、加培养基等操作同第1组。复苏细胞培养12h后采用台盼蓝染色计算细胞的平均存活率。③用无血清RPMI-1640培养基制备3×104/mL的K562细胞悬液接种于细胞培养板中,每孔1mL,然后分别加入5%、10%、12%、15%、20%的灭活小牛血清,每种血清浓度设置4个试验孔并于培养12,24,36,48,60,72,84,96h后每种浓度各取1孔计数细胞量,绘制细胞生长曲线。结果:①5%、15%、20%二甲基亚砜组冻存K562细胞复苏率分别与10%二甲基亚砜组比较,差异显著(86.70%,82.03%,63.09%,88.13%,P均<0.01)。②传统37℃水浴方法复苏后的细胞平均存活率,与40℃溶解后37℃恒温方法比较,差异非常显著[(69.13±1.01)%,(87.50±2.24)%,P<0.01]。③在5%血清含量培养基中,K562细胞基本不生长,且有逐渐死亡的趋势;在10%血清含量培养基中K562细胞生长趋势明显,但生长速度相对较慢;在12%、15%、20%血清含量培养基中K562细胞生长迅速,但3种血清浓度之间细胞生长趋势无明显差异。结论:以10%二甲基亚砜作为K562细胞冻存保护剂并采用改良复苏方法可使细胞保持最佳生物学特性,12%血清为K562细胞常规培养的最适浓度。     

人参皂甙单体Rh2对人K562白血病细胞增殖和凋亡的时效和量效分析

目的:观察人参皂甙单体Rh2对人K562细胞增殖和凋亡的影响,分析该影响的时间和剂量依赖性。方法:实验于2006-07/08在吉林医药学院临床检验系实验室完成。①取对数生长期人K562细胞制成细胞悬液,浓度1×108L-1,接种于96孔培养板内,每孔100μL,6h后加入终质量浓度分别为6.25,12.5,25.0,50.0,100.0mg/L的人参皂甙单体Rh2100μL(购自吉林省宏久生物科技股份有限公司),每一浓度组均设4孔。对照孔及调零孔加100μL培养液。各孔总体积均为200μL。在加药后48h采用四甲基偶氮比色法检测各孔中细胞的抑制率。在接近于半数抑郁浓度的人参皂甙单体Rh2处理作用于细胞6,12,24,48和72h后采用四甲基偶氮唑盐比色法计算抑制率。②在倒置显微镜下观察加药与未加药孔K562细胞形态。③常规苏木精-伊红染色,检测25.0mg/L人参皂甙单体Rh2作用0,12,24和48h后K562细胞的凋亡率,并观察人参皂甙单体Rh2质量浓度分别为0,12.5,25.0,50.0,100.0mg/L时,培养24h后的细胞凋亡率。结果:①人参皂甙单体Rh2对K562细胞生长抑制作用:当人参皂甙单体Rh2质量浓度为6.25,12.5,25.0,50.0和100.0mg/L时,抑制率逐渐升高,呈现明显剂量依赖性。人参皂甙单体Rh2对K562细胞的半数抑制浓度为25.8mg/L,处理K562细胞6,12,24,48,72h后细胞抑制率逐渐升高,且后4个时间点明显高于处理6h时(t=11.79～50.89,P<0.01)。②人参皂甙单体Rh2对K562细胞形态的影响:细胞经人参皂甙单体Rh2作用后呈现出明显的凋亡细胞形态,细胞分散,体积缩小,胞浆浓缩,细胞核膜消失,细胞核断裂呈小块或碎片状,但细胞膜较完整并可见凋亡小体。③人参皂甙单体Rh2对K562细胞凋亡的影响:在25.0mg/L人参皂甙单体Rh2作用K562细胞0,12,24和48h后,K562细胞的凋亡率依次升高,分别为(3.8±0.5)%,(9.4±1.1)%,(23.2±2.2)%和(34.5±3.5)%(与作用0h比较,t=8.78～20.06,P<0.05～0.01)。人参皂甙单体Rh2质量浓度分别为0,12.5,25.0,50.0,100.0mg/L培养K562细胞24h,细胞凋亡率依次升高,分别为[(3.7±0.6)%,(9.4±1.3)%,(21.2±2.1)%,(28.5±2.5)%,(31.8±3.4)%,与0mg/L人参皂甙单体比较,t=9.39～18.54,P<0.01]。结论:人参皂甙单体Rh2能抑制体外培养的K562细胞增殖并诱导其凋亡,且呈时间和剂量依赖性。     

人参皂甙单体Rh2对人K562白血病细胞增殖和凋亡的时效和量效分析

目的：观察人参皂甙单体Rh2对人K562细胞增殖和凋亡的影响，分析该影响的时间和剂量依赖性。方法：实验于2006-07／08在吉林医药学院临床检验系实验室完成。①取对数生长期人K562细胞制成细胞悬液，浓度1&;#215;10^8L^-1，接种于96孔培养板内，每孔100μL，6h后加入终质量浓度分别为6.25，12.5，25．0，50.0，100．0mg／L的人参皂甙单体Rh2 100μL（购自吉林省宏久生物科技股份有限公司），每一浓度组均设4孔。对照孔及调零孔加100μL培养液。各孔总体积均为200μL。在加药后48h采用四甲基偶氮比色法检测各孔中细胞的抑制率。在接近于半数抑郁浓度的人参皂甙单体Rh2处理作用于细胞6，12，24，48和72h后采用四甲基偶氮唑盐比色法计算抑制率。②在倒置显微镜下观察加药与未加药孔K562细胞形态。（蓼常规苏木精-伊红染色，检测25．0mg/L人参皂甙单体Rh2作用0，12，24和48h后K562细胞的凋亡率，并观察人参皂甙单体Rh2质量浓度分别为0，12．5，25．0，50．0，100．0mg／L时，培养24h后的细胞凋亡率。结果：①人参皂甙单体Rh2对K562细胞生长抑制作用：当人参皂甙单体Rh2质量浓度为6．25，12．5，25、0，50．0和100．0mg／L时，抑制率逐渐升高，呈现明显剂量依赖性。人参皂甙单体Rh2对K562细胞的半数抑制浓度为25．8mg/L处理K562细胞6，12，24，48，72h后细胞抑制率逐渐升高，且后4个时间点明显高于处理6h时（t=11．79-50．89．P〈0、01）。②人参皂甙单体Rhz对K562细胞形态的影响：细胞经人参皂甙单体Rh2作用后呈现出明显的凋亡细胞形态，细胞分散，体积缩小，胞浆浓缩，细胞核膜消失，细胞核断裂呈小块或碎片状，但细胞膜较完整并可见凋亡小体。③人参皂甙单体Rh2对K562细胞凋亡的影响：在25．0mg／L人参皂甙单体Rh2作用K562细胞0，12，24和48h后，K562细胞的凋亡率依次升高，分别为（3．8&;#177;0.5）％，（9．4&;#177;1．1）％，（23.2&;#177;2.2）％和（34.5&;#177;3.5）％（与作用0h比较，t=8.78&;#177;20.06．P〈0.05-0．01）。人参皂甙单体Rh2质量浓度分别为0，12.5，25,0，50.0，100.0mgL培养K562细胞24h，细胞凋亡率依次升高，分别为[（3．7&;#177;0.6）％，（9．4&;#177;1.3）％，（21.2&;#177;2.1）％，（28.5&;#177;2．5）％，（31．8&;#177;3.4）％，与0mg／L人参皂甙单体比较，t=9．39～18、54．P〈0．01]。结论：人参皂甙单体Rh：能抑制体外培养的K562细胞增殖并诱导其凋亡，且呈时间和剂量依赖性。     

细胞培养中霉菌感染应对措施

细胞培养在科学研究中是一种常用的研究手段,而培养操作不当则容易造成污染,常见的生物污染类型有7种：细菌污染、支原体污染、真菌污染、黑胶虫污染、原虫污染、病毒污染以及非细胞污染。