乙型肝炎表面抗原不同突变体对细胞免疫的影响

目的　研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)不同突变体对细胞免疫的影响。方法　将野生型和变异型HBsAg基因重组质粒NS2 Swt、NS2 S12 6、NS2 S133、NS2 S14 1、NS2 S14 5分别转染CHO细胞,72h收获细胞上清。采用ELISA法检测各组细胞上清preS2 蛋白的表达量。将这些细胞上清刺激PHA活化的人淋巴细胞,MTS法检测不同变异株抗原对淋巴细胞增殖活性以及淋巴细胞分泌IFN γ、IL 10和IL 2的影响。结果　变异和野毒株(wt)各组细胞上清preS2 蛋白的表达量基本一致。变异和wt重组HBsAg刺激T细胞后,其上清MTS显色后的A4 90 值均高于空白组和pCI neo组,说明HBsAg中的蛋白可以促进T细胞增殖;T12 6S氨基酸变异HBsAg能够刺激IFN γ分泌增加;M133T氨基酸变异刺激IL 10分泌增加。结论　这4种乙型肝炎病毒(HBV)变异株感染人体后,机体对它们的细胞免疫反应可能不会有明显的增强或减弱,但也不能忽视T12 6S和M133T变异抗原改变了某些细胞因子的表达,可能对机体细胞免疫造成的潜在影响。     

透皮免疫佐剂LTB及LTK63的表达与鉴定

目的 研究新型的透皮免疫佐剂。方法 从大肠埃希菌E．coli H10407中扩增出大肠埃希菌不耐热肠毒素（Heat-labile enterotoxin，LT）全长基因，并用基因工程的方法表达出了无毒性的A亚单位蛋白LTKA及B亚单位蛋白LTB。将表达产物纯化后用SDS-PAGE、GMI-ELISA等方法进行鉴定。结果 表达的LTB亚单位仍具有和神经节苷脂GMI特异结合的生物学活性，LTK63已经不具有毒素活性。结论 LTB和LTK63有希望成为候选的透皮免疫佐剂。     

通用型病毒检测芯片在三种人类致病病毒属检测中的应用

目的 研究制备对人类有致病作用的38个属的病毒寡核苷酸（oligo）基因芯片对三种人类致病病毒的检测能力。方法 应用生物信息学软件设计70-mer oligo探针，固定于玻片载体制备成基因芯片。以痘苗病毒天坛株、甲肝病毒、乙肝病毒作为检测样本，提取病毒核酸，经随机引物扩增、荧光标记，用于芯片杂交，清洗和干燥后对芯片进行扫描和数据分析。结果 芯片上oligo探针能与相应病毒的PCR扩增样品杂交，呈现阳性荧光信号。结论 建立的病毒寡核苷酸基因芯片能够检出和区分三种检测病毒，为进行未知病毒的基因芯片筛查方法的建立奠定了基础。     

雌激素受体β及ABCC11基因单核苷酸多态性与腋臭发病的相关性

目的：研究激素受体基因及其他相关基因的单核苷酸多态性与腋臭发病之间的相关性。方法：收集219名腋臭患者及159名正常人全血,提取全基因组DNA,使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱等相关技术对49个候选基因位点的单核苷酸多态性进行检测并分析。结果：雌激素受体β基因rs1256061位点及ABCC11基因的rs17822931,rs16945916和rs62058521三个位点的单核苷酸基因多态性在腋臭患者和正常人中的差异有统计学意义(均P<0.01)。81.1%的腋臭患者携带rs1256061位点G等位基因,而正常人只有63.2%携带了该位点的G等位基因;96.3%的腋臭患者携带 rs17822931位点G等位基因,而正常人只有4.4%携带该位点的G等位基因;28.6%的腋臭患者携带rs16945916位点G等位基因,而正常人组只有0.6%携带该位点的G等位基因;28.0%的腋臭患者携带rs62058521位点G等位基因,而正常人组只有0.6%携带该位点的G等位基因。结论：雌激素受体β基因位点rs1256061的单核苷酸多态性与腋臭的发病有关;ABCC11基因多个位点的单核苷酸多态性均与腋臭的发病相关,它们分别是rs16945916,rs62058521和rs17822931。     

多囊卵巢综合征患者外周血白细胞计数和血脂代谢变化的临床意义

目的探讨多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)患者外周血白细胞计数和血脂代谢变化的临床意义。方法随机抽取2013年2月至2014年2月期间来院就诊未经药物治疗的PCOS患者78例作为研究对象,将体重指数(BMI)≥23的患者41例作为PCOS超重组,将BMI<23的37例患者作为PCOS体重正常组,选择同期来院就诊的非PCOS妇女30例作为对照组,所有患者均于月经期空腹静脉抽血3~4 m L,检测患者的血浆C反应蛋白(CRP)、血常规及血脂代谢指标。结果 PCOS超重组的甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、载脂蛋白B(Apo-B)、外周白细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、CRP指标均较对照组、PCOS体重正常组高,而高密度脂蛋白(HDL-C)、载脂蛋白A(Apo-A)水平较对照组、PCOS体重正常组低,差异均有统计学意义(P<0.05);PCOS体重正常组淋巴细胞、CRP指标较对照组高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论慢性炎症是PCOS的主要病理表现,其中体重超重的PCOS患者主要表现为血脂代谢异常及白细胞升高,而体重正常的PCOS患者主要表现为淋巴细胞升高。     

基层预防医学人员职业压力和社会支持与工作满意度关系的探讨

目的了解基层预防医学工作者职业压力和社会支持与工作满意度的关系。方法采用横断面调查设计和方便抽样的方法抽取广东省某地497名基层预防医学工作者作为研究对象,通过自填式调查问卷收集人口社会学特征、职业史、职业压力、社会支持和工作满意度等相关信息,应用相关分析和多元逐步回归分析职业压力和社会支持与工作满意度的关系。结果在控制年龄、性别、婚姻状况、教育程度等潜在混杂因素后,多因素回归分析发现,感受到“回报”的压力与工作满意呈显著负关联（B=-0．079）,获得的工作支持（B=0．053）、上级支持（B=0．076）和同事支持（B=0．063）与工作满意程度显著正关联,其中,职业压力对工作满意度方程的贡献为13．9％,社会支持的贡献为18．0％。结论职业压力和社会支持是影响基层预防医学工作者工作满意度的重要因素。     

三黄地丁洗方治疗包皮龟头炎358例观察

目的 观察自研中药三黄地丁洗方治疗包皮龟头炎的疗效.方法 选择包皮龟头炎患者358例,其中急性浅表性包皮龟头炎172例,淋菌性包皮龟头炎52例,真菌性包皮龟头炎35例,滴虫性包皮龟头炎5例,环状溃疡性包皮龟头炎36例,生殖器疱疹58例.采用三黄地丁洗方清洗外阴,1次/d,疗程7 d.淋球菌感染者配合静脉滴注头孢曲松钠,真菌感染者配合曲安奈德益康唑乳膏外擦,滴虫性感染者配合口服甲硝唑片,生殖器疱疹者配合肌肉注射单磷酸阿糖腺苷,同时建议患者配偶或性伴到相应专科作检查治疗.观察记录包皮龟头红肿、糜烂、水疱等皮损停止产生、疼痛缓解、完全结痂、皮损消失时间,有无药物过敏反应,治疗前后检测肝肾功.结果 三黄地丁洗方清洗外阴能快速消除患者临床症状,其中痊愈232例,显效110例,有效16例,有效率为100%.无药物过敏反应,治疗前后肝肾功能无明显变化.结论 三黄地丁洗方治疗各种原因所致包皮龟头炎安全有效,值得临床推广.     

肾移植慢性排斥反应动物模型的建立与质量控制

目的建立一种稳定性好、重复性强的肾移植慢性排斥反应动物模型。方法应用F344-Lewis近交系雄性大鼠作为供受、体构成实验组,供体双肾切取为两个受体供肾;移植肾动、静脉及尿路重建均采用端-端吻合;术中切除受体左侧原肾以植入移植肾,保留受体右侧原肾,术后3 d体外结扎右肾血管。结果完成大鼠同种异体肾移植手术40例,手术时间（90±27）min,取肾时间（25±7）min,植肾时间（37±17）min,供肾热缺血时间（20±5）s,供肾冷缺血时间（37±3）min。20例取肾及40例植肾手术操作均获得成功。获得慢性排斥反应模型35例,移植大鼠存活时间（128±34）d,成功率87.5%。术后10、14 w分别获得移植肾脏轻度及典型慢性排斥反应病理标本。结论正确选择实验动物、熟练显微外科操作技术、减少供肾冷或热缺血时间、合理进行免疫抑制治疗是保障慢性排斥反应动物模型成功建立的关键。     

抗β淀粉样肽40人单克隆抗体在昆虫细胞分泌表达

目的通过杆状病毒昆虫细胞系统重组表达抗β淀粉样肽40人单克隆抗体,为全人抗体治疗阿尔茨海默病创造条件。方法将抗β淀粉样肽40人单链抗体重链可变区和轻链可变区分别克隆插入pAC-L-CH3的多克隆位点,构建成pAC-VH-VL表达质粒。将表达质粒和BaculoGold共转染SF9细胞后,用免疫荧光方法进行人IgG表达的检测。将感染重组杆状病毒的昆虫细胞培养液上清过蛋白A-琼脂糖亲和层析柱,洗脱纯化出的抗体经过SDS-PAGE电泳鉴定纯化蛋白质。结果杆状病毒昆虫细胞系统抗β淀粉样肽40人单克隆抗体表达质粒pAC-VH-VL构建成功。将表达质粒和辅助病毒感染昆虫细胞后可见昆虫细胞表达人抗体。经过蛋白A-琼脂糖亲和层析,从昆虫细胞培养基中纯化出抗β淀粉样肽40人单克隆抗体。结论通过基因工程手段在人抗Aβ40抗体可变区羧基端连接人抗体恒定区片段,通过杆状病毒昆虫系统分泌表达并纯化获得完整的人抗Aβ40单克隆抗体。     

白细胞介素-4基因启动子多态性与广西壮族支气管哮喘患儿易感性和血清总免疫球蛋白E水平的相关性

目的研究IL-4基因启动子区域-589C/T和-33C/T位点多态性在广西壮族儿童中的分布及与壮族儿童支气管哮喘(哮喘)易感性及血清总IgE水平的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法对健康儿童102例和哮喘患儿72例IL-4基因-589位点和-33位点进行分析,ELISA方法检测2组血清总IgE水平。采用SPSS 14.0软件进行统计学分析。结果1.IL-4-589位点在健康对照组中基因型分布频率为CC 5.9%、CT 23.5%、TT 70.6%,哮喘组为CC 2.8%、CT 19.4%、TT 77.8%;健康对照组等位基因频率为C 17.6%、T 82.4%,哮喘组为C 12.5%、T 87.5%。2.IL-4-33位点在健康对照组和哮喘组中基因型分布和等位基因频率与IL-4-589位点频率分布一致,连锁不平衡值△=0.978。3.哮喘组与健康对照组之间基因型频率和等位基因频率比较差异均无统计学意义(Pa>0.05)。4.哮喘组血清总IgE水平较健康对照组明显增高(P<0.01);各组不同基因型间血清总IgE水平比较差异均无统计学意义(Pa>0.05);3种相同基因型不同组间比较哮喘组血清总IgE水平均较健康对照组高(Pa<0.05)。结论在广西地区壮族儿童人群中,IL-4基因启动子-589位点和-33位点存在多态性,两位点存在连锁不平衡,其多态性与壮族儿童哮喘的易感性无关联,与血清总IgE水平无相关性。