二甲亚砜不同浓度对猪肝细胞-80℃保存影响的初步研究

为寻求有效的长期保存肝细胞方法,我们采用含不同浓度二甲亚砜(DMSO)的保存液对猪肝细胞进行保存,以筛选合适的冻存条件与方法,进一步提高冻存肝细胞的活力,为生物人工肝研究提供细胞材料。 一、材料和方法 1.实验分组及方法:体外两步胶原酶灌注法获取新生中国实验性小型猪(第三军医大学动物研究所)肝细胞,以每毫升     

血管钠肽抑制异丙肾上腺素对心肌细胞收缩的增强作用

目的 :研究血管钠肽 （VNP）对心肌细胞收缩的作用及其机制 ,观察 HS- 14 2 - 1、8- Br- c GMP和镁蓝 （methyleneblue,MB）对心肌细胞收缩的影响。方法 :采用单心肌细胞动缘探测技术检测细胞收缩的幅度。结果 :10 - 1 0、10 - 9、10 - 8、10 - 7、10 - 6 m ol/L Iso可剂量依赖性地引起心肌细胞收缩增强 ,与对照组相比较分别增强 （13± 3） %、（2 6± 2 ）%、 （6 0± 5 ） %、（15 3± 4 ） %和 （312± 7） %。此效应可被普萘洛尔 （10 - 6 mol/L ）所阻断。 10 - 1 0 、10 - 9、10 - 8、10 - 7、10 - 6 m ol/L VNP可剂量依赖性地抑制 Iso（10 - 8mol/L）引起的心肌细胞收缩幅度的升高 ,与 Iso（10 - 8mol/L）相比较分别减弱 （99± 3） %、（95± 2 ） %、（84± 6 ） %、（6 6± 3） %和 （6 1± 3） %。 8- Br- c GMP（10 - 7～ 10 - 3m ol/L）也可剂量依赖性地抑制 Iso（10 - 8mol/L）引起心肌细胞收缩的增强。钠尿肽鸟苷酸环化酶 （guanylate cyclase,GC）受体的特异性阻断剂 HS- 14 2 - 1（2× 10 - 5mol/L）使 VNP的作用几乎完全消失。MB是 GC的抑制剂 ,10 - 5mol/L MB不但使VNP的作用完全消失 ,而且增强心肌细胞收缩的效应。VNP和 HS- 14 2 - 1本身对心肌细胞收缩无显著影响。而 MB使心肌细胞收缩幅度升高。结论 :VNP作用于心肌细?     

234例原发不孕症子宫内膜活检病理分析

子宫内膜活检是不孕症临床重要检查方法。内膜变化与卵巢、黄体密切相关。内膜活检可了解卵巢有无排卵、黄体功能和内膜其它病变。本文对234例原发不孕症子宫内膜活俭病理分析，探讨内膜病变与不孕关系，为临床诊治提供依据。材料和方法资料来源于石河子医学院一附院病理科1993至1995年的子宫内膜活俭病理资料。选材标准如下：（1）原发不孕症患者，病史2年以上，一般资料记录完整。（2）月经来潮后12小时内刮宫取材[1]，不规则子宫出血和闭经患者可随时取材，刮宫前未服相关药物。（3）活检取材送检成功，组织常规制片，HE染色，普通光镜…     

湿温病所致发热的辨治体会

湿温病所致发热几乎贯穿其整个病理过程。笔者临证当中 ,依据湿热病的传变规律 ,发热特点 ,灵活运用藿香正气散加减 ,治愈了数十例以发热缠绵不愈为主症的湿温病人 ,对此辨治略有感悟 ,兹述于下。1　病因病机湿温病是由湿热病邪引起的急性热病 ,夏秋季节 ,天气炎热 ,湿气上蒸 ,人处气交当中 ,易感湿邪 ;或因汗后毛孔乍开 ,复受雨淋水激 ,使三焦气化水湿之功失常 ,致湿邪停聚 ,郁久化热 ,或劳作后恣食生冷 ,致湿邪内困 ,中阳不运 ,引发本病。个别也有同房后受风所致。吴鞠通指出 :“内不运水谷之湿 ,外复感时令之湿。”指出仅有外感而无内伤 …     

外科实习中应用启发式教学

临床实习是医学生培养过程中一项重要的教学活动，是医学生获得临床感性认识、巩固课堂知识的关键，也是培养其独立思考、综合分析等实际工作能力的重要环节。过去传统的灌输式、“填鸭式”教学，忽视了学生综合素质和实践能力的培养，导致教学过程枯燥乏味，教学质量不高。因此，探索一种既适合学生又适合教师教学的方法是外科实习教学的必然要求。我们在外科实习教学中采用了启发式教学法，取得了一定经验，现总结如下。     

血管钠肽抑制心肌增殖与机制的研究

应用 NE、低氧或佛波酯 （PMA）等方法刺激心肌细胞和心成纤维细胞的增殖 ,实验证明血管钠肽对增殖有抑制作用 ,它通过升高细胞内 c GMP和降低细胞内 Ca2 + 浓度等发挥作用 ,对肺动脉平滑肌细胞的增殖也有抑制作用 ,表明 VNP对心肌细胞、心成纤维细胞和肺动脉平滑肌细胞有负调控作用 ,对心肌肥大和低氧性肺动脉高压有预防和治疗作用     

PBL与TBL联合模式在心力衰竭案例教学中的应用

结合心力衰竭案例的病史较长,内容涉及多个基础学科且抽象难懂,以及现有教学模式的不足等,提出了在案例教学中引入以问题为导向（Problem-Based Learning,PBL）和团队学习（Team-Based Learning,TBL）的教学方法。实践证明PBL和TBL联合模式的教学方法在小班课心力衰竭案例教学中的应用,可加深学生对多个基础学科知识的融会贯通,提高学生的自主学习能力、学习兴趣及探索精神,从而达到学以致用的目的,同时也为案例教学提供了新的思路和指导。     

罗沙司他对急性高原低氧心脏功能适应的作用及其机制

目的 探讨PHD2抑制剂罗沙司他对模拟海拔5 000 m高原低氧环境小鼠心脏功能适应的作用及其机制。 方法 40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组:常氧组、罗沙司他（100 mg/kg）+常氧组、低氧组、罗沙司他（100 mg/kg）+低氧组。低氧组小鼠置于ProOx-810L动物低压氧舱内饲养7 d;常氧组于常压常氧环境饲养。应用超声心动图、血常规、血生化综合评价高原低氧环境下小鼠心脏功能变化,Western Blotting分析HIF-1α和HIF-2α的表达水平。 结果 高原低氧暴露下,小鼠体质量增长显著减缓,罗沙司他对高原低氧暴露下的小鼠没有明显的毒副作用。高原低氧7 d后小鼠左室舒张末期内径（LVIDd）显著减小（P<0.05）,罗沙司他可增加LVIDd（P<0.05）,提高心脏适应能力。高原低氧导致红细胞生成素（EPO）明显升高,红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hb）和红细胞压积（Hct）增加（P<0.01）,该效应可被罗沙司他进一步增强[RBC（P<0.01）、Hb（P<0.01）和Hct（P<0.05）]。与常氧组比较,高原低氧可以显著增加小鼠心肌HIF-1α（P<0.05）、HIF-2α（P<0.01）和PHD2的蛋白表达水平（P<0.01）,此效应可被罗沙司他进一步增强[HIF-1α（P<0.01）、HIF-2α（P<0.01）和PHD2（P<0.05）]。低氧条件下心肌损伤相关的血清乳酸脱氢酶（LDH）水平显著增高（P<0.01）,罗沙司他可降低LDH水平,减轻低氧对心肌的损伤（P<0.01）。 结论 罗沙司他可通过抑制PHD2活性上调HIF-1α和HIF-2α的蛋白水平,同时减轻心肌损伤,进而促进高原低氧环境下小鼠心脏功能的适应。     

原代乳猪肝细胞低温保存的初步探索

目的：探讨4℃低温保存肝细胞的方法。方法：两步法分离新生乳猪肝细胞，将肝细胞分别以3种不同低温保存液（RPM1－1640培养液；加有聚乙二醇（PEG）的RPM1－1640培养液；UW液）4℃保存24h、48h及72h。复苏后接种培养，作存活率、贴壁率及细胞活性等检测，并观察其形态结构变化。结果：不同低温保存液保存不同时间的猪肝细胞的活力、生物学功能及形态学表现均有所不同，其中单用RPM1－1640培养液组效果最差，PEG组和UW组结果相似，均保持70％以上存活率达48h，活力与药物代谢功能无明显差别，镜下见复苏肝细胞浆内含丰富颗粒，可见较多双核细胞，线粒体无减少，粗面内质网数下降，滑面内质网增多。结论：猪肝细胞在4℃可保存48h，加入PEG的RPM1－1640培养液可更好地保持肝细胞活性。