血浆1-3-β-D葡聚糖检测深部真菌感染的应用研究

目的探讨血浆1-3-β-D葡聚糖水平检测与传统真菌培养方法的一致性,为深部真菌感染的临床诊断寻找快速、准确的方法。方法对212例临床疑似深部真菌感染病例采集静脉血标本,用MB-80微生物动态快速检测系统测定血浆1-3-β-D葡聚糖,同时行痰液真菌培养和真菌涂片染色,比较血浆1-3-β-D葡聚糖水平检测与传统真菌培养方法的一致性。结果本组88例血浆1-3-β-D葡聚糖阳性,24例可疑阳性,阳性率52.8%。84例痰液真菌培养阳性,阳性率39.6%,其中78例(92.9%%)1-3-β-D葡聚糖阳性。46例真菌涂片染色阳性,阳性率21.7%,其中42例1-3-β-D葡聚糖阳性。若以真菌培养结果作为诊断标准,则1-3-β-D葡聚糖检测的灵敏度为95.3%,特异性为90.6%。结论血浆1-3-β-D葡聚糖水平检测比痰液真菌培养能更早、更灵敏地反映深部真菌感染,但具有一定的假阴性率,故应同时行真菌培养,以提高诊断准确性。     

海洋细菌的三种保存方法比较

应用10%脱脂乳、35%甘油肉汤和鉴定卡分别在-80 ℃保存海洋细菌,在保存3个月、6个月、1 a和2 a后分别复苏菌种,进行菌种的生化鉴定和药敏测评.发现10%脱脂乳和35%的甘油肉汤对各种菌种的保存效果都很好,到2 a时复苏率和鉴定率都为100%;鉴定卡对肠杆菌、非发酵和肠球菌保存到2 a时的复苏率和鉴定率为100%,但是对弧菌的复苏率则在保存3个月和6个月时为100%,到1 a时降低为80%,到2 a时仅为30%.认为10%脱脂乳和35%甘油肉汤在海洋细菌保存中效果较好,可以长期保存;鉴定卡短期保存细菌是可行的.     

靶向脐带间充质干细胞的构建及其在小鼠脾脏内的定位

目的 构建含小分子肽P1-GFP融合基因慢病毒载体, 用携带P1-GFP融合基因的慢病毒感染MSC, 使MSC具有靶向性, 将靶向MSC注入小鼠体内后观察MSC在小鼠脾脏的定位及与淋巴细胞的关系。方法 用组织片贴壁法培养健康人脐带间充质干细胞, 用基因工程技术构建含小分子肽P1-GFP融合基因慢病毒载体并感染人脐带间充质干细胞, 通过尾静脉将转入P1-GFP融合基因的MSC注入小鼠体内, 18 h后免疫组化染色观察GFP在小鼠脾脏的定位。 结果 培养的健康人脐带间充质干细胞生长良好, MSC感染含P1-GFP融合基因的慢病毒18 h后MSC开始出现绿色荧光, 随着培养时间的延长, 荧光强度逐渐增强, 72 h达高峰。靶向MSC表达髓系干细胞的表面标记 CD105(90.0%)/CD44(98%),CD73(85.0%)/CD90(98.5%)。将靶向MSC经尾静脉注入小鼠体内, 18 h后小鼠脾脏出现大量GFP阳性细胞, 并与脾脏淋巴细胞密切接触。结论 本研究成功构建了含P1-GFP融合基因的靶向MSC, 靶向MSC成功定向脾脏, 并与脾脏淋巴细胞密切接触, 可用于后续的实验研究。     

155例血培养金黄色葡萄球菌耐药分析

目的了解2003-2011年血培养中金黄色葡萄球菌的耐药性变迁,为临床治疗提供依据。方法采用北京伯泰技术开发中心血培养瓶采样,BacT/ALERT 3D全自动血培养仪进行培养,VITEK微生物仪进行鉴定,BIOMIC仪进行药敏测试,WHONET5.4软件进行耐药性分析。结果 2003年1月-2011年12月从临床送检的血培养标本分离出金葡菌155株,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA）110株,MRSA在金葡菌中平均发生率为70.9%;9年间金葡菌对万古霉素、利奈唑胺未发现耐药株;对呋喃妥因、复方新诺明敏感性尚好,耐药率〈30%;对四环素、左氧氟沙星、克林霉素、环丙沙星、头孢唑啉、阿齐霉素、红霉素、青霉素耐药率均达50%以上,且表现为多药耐药,最高七重耐药（21.6%）;MRSA最高以八重耐药（34.6%）。结论血培养中金葡菌存在严重耐药,MRSA多药耐药性高,应加强MRSA耐药性监测。     

蓖麻毒素快速ELISA检测法的建立

目的:建立蓖麻毒素快速ELISA检测方法。方法:从8株抗蓖麻毒素的杂交瘤细胞中,筛选亲和力较高的单克隆抗体,用Westernblot和ELISA鉴定、ProteinA纯化、HRP标记,经交叉配伍筛选最佳的抗体组合。结果:建立了蓖麻毒素的快速ELISA检测方法,对蓖麻毒素的最低检出浓度为175ng/L,目视检测最低浓度为625ng/L,整个实验不需仪器可在40min内完成检测。结论:蓖麻毒素快速ELISA检测法为蓖麻毒素生物战剂的快速侦检提供了有效手段。     

眼-泌尿生殖道衣原体M_r75000外膜蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

眼泌尿生殖道衣原体Ｍｒ７５０００外膜蛋白单克隆抗体的制备与鉴定郭建巍１秦力维１周学良２（１兰州军区总医院检验科、眼科，兰州７３００５０２卫生部兰州生物制品研究所）眼泌尿生殖道衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｏｃｕｌｏｇｅｎｉｔａｌ，Ｃｏ．），即沙眼衣原...     

004 Th细胞的活化与树突状细胞

树突状细胞(dendritic，DC)是体内功能最强的专职抗原提呈细胞(APC)，具有很强的抗原呈递能力，并能有效激发T细胞应答。DC在免疫学及肿瘤学乃至其它各学科中的作用也日益受到重视。选择性激活Th1和Th2是许多免疫反应发生的关键，而Th的分化由DC所控制，本文就免疫应答中DC和T细胞相互作用方面的最新研究作一综述。     

综合医院感染金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的调查医院住院患者感染金黄色葡萄球菌(SAU)的耐药现状,为临床医师合理使用抗菌药物提供依据。方法对医院感染性标本中培养分离的420株SAU临床资料进行回顾性调查分析,SAU鉴定严格按照《全国临床检验操作规程》进行;药物敏感性(药敏)试验采用K-B法,结果参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)标准判定。结果 420株SAU检出标本以痰(64.2%)和血液(14.5%)为主;SAU感染主要分布在高压氧科、ICU、神经内科和神经外科等,MRSA检出率达75.0%;药敏试验结果显示,SAU对多种抗菌药物均不同程度耐药,仅对万古霉素和呋喃妥因敏感率为100.0%。对红霉素耐药而克林霉素敏感的59株SAU中44株(74.6%)为诱导型克林霉素耐药。结论 SAU感染率呈逐渐升高趋势,其中甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对大部分抗菌药物仍保持较好的敏感性,而MRSA表现为多药耐药性,应引起临床高度重视;检测克林霉素诱导型耐药具有重要的临床应用价值。     

MecA、Nuc基因在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测中的应用

目的通过对180株金黄色葡萄球菌临床分离株MecA、Nuc基因的检测,以期选择出一种适合临床的并能简便、快速、准确检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA）的方法。方法细菌鉴定及药敏采用全自动细菌鉴定和药敏分析仪。MecA、Nuc基因检测采用荧光定量聚合酶链反应（fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR）法。结果FQ-PCR对180株金黄色葡萄球菌MecA、Nuc基因检出率为75.0%,全自动细菌鉴定和药敏分析仪对180株金黄色葡萄球菌的MRSA检出率为72.8%,2种检测方法比较差异无统计学意义（P＞0.05）。全自动细菌鉴定和药敏分析仪对MRSA的检测正确率为94.8%。结论FQ-PCR检测MRSA正确率高,只需要1～2 h即可完成。该方法快速、简便、准确,值得推广应用。     

两种海水采样器的研制及性能比较

目的 设计并制作2种不同的海水样本采集器,为对海洋微生物进行广谱调研、药物敏感性实验等提供适合的样本采集工具.方法 法通过与文献检索及运用理工科知识,根据阿基米德定律计算并设计图纸,与相关专业公司合作制作完成.结果 于在实验过程中灵活选用2种采样器完成了对中国海域近千个采样点的样本采集工作,为中国海域细菌谱的调研和药物敏感性分析提供了基础保证.结论 隆 "椎底简式"海水采样器是一种制作相对简单且比较实用的样本采集器,"拖船式"海水采样器是一种信息集成化程度比较高但尚需进一步开发完善的样本采集器.