~(18)F-脱氧葡萄糖单光子发射式计算机断层显像对肠辐射损伤检测方法的研究

目的:探讨 18F-脱氧葡萄糖(18F-FDG)单光子发射式计算机断层显像(SPECT-CT)对大鼠肠辐射损伤检测的敏感性.方法:选取20只雄性SD大鼠随机分为两组,即正常组和模型组.模型组大鼠进行60Co一次性全身照射8.0Gy,观察大鼠一般情况;模型组腹泻症状明显时立即做18F-FDG SPECT-CT并检测肠道浓聚影;检测后取出大鼠小肠,4%甲醛固定,常规病理切片,于电子显微镜下观察.结果:(1)6只大鼠照射4 d后出现腹泻,3只5 d后出现腹泻,1只观察7 d未出现腹泻.(2)SPECT-CT显示腹泻大鼠肠道有明显浓聚影,正常组大鼠肠道无明显浓聚影.(3)病理显示:模型组大鼠小肠破坏严重,炎症明显;对照组大鼠小肠无粘连、局部充血,肠壁不增厚,未见溃疡.结论:18F-FDG SPECT-CT作为一种无创性检测方法,能够直观有效地检测大鼠肠辐射损伤.     

用单倍体相合小鼠FBL-3红白血病细胞株移植建立CB6F1小鼠红白血病模型

本研究探讨建立F1代单倍体相合小鼠FBL-3红白血病模型的可行性,并观察FBL-3细胞在小鼠体内的生物学特性。将FBL-3H2-d小鼠红白血病细胞经尾静脉分别接种给小鼠C57BL/6和CB6F1H-2b/d(C57BL/6×BALB/c),观察两种小鼠的生存时间和染色体变化,并对濒死小鼠的肝、脾、肺和肾进行病理检查,部分进行电子显微镜检查。分析骨髓和脾脏细胞染色体核型及MHC分子表达情况。结果表明:静脉接种103-107个白血病细胞的情况下,C57BL/6小鼠和CB6F1小鼠发病率分别为100%和92.5%;接种的细胞数量与存活时间呈线性关系;接种相同数量FBL-3细胞的CB6F1小鼠平均生存时间较C57BL/6小鼠延长。白血病细胞主要侵及肝、脾、骨髓、肺和肾组织,糖原染色阳性、氯醋酸染色部分阳性,过氧化物酶、碱性磷酸酶、丁酸染色均为阴性。电子显微镜观察到细胞内病毒样颗粒。脾脏和骨髓细胞染色体多数为非二倍体,且H-2b表达率升高,H-2d表达率降低。结论:经尾静脉接种FBL-3细胞可以建立CB6F1小鼠红白血病模型。     

单倍体相合造血干细胞移植治疗髓母细胞瘤1例

背景:目前部分国外报道显示,自体及全相合造血干细胞移植联合化疗用于转移髓母细胞瘤有一定疗效,可延长患者生存期.但尚未见HLA单倍体相合移植治疗髓母细胞瘤的报道.目的:首次报道应用单倍体相合造血干细胞移植治疗髓母细胞瘤.方法:对晚期骨转移的髓母细胞瘤患儿进行连续6次无关供者淋巴细胞输注联合低剂量化疗, 3次单倍体相合骨髓移植治疗.结果与结论:造血干细胞移植后患儿出现皮疹, 伴发热, 腹泻, 为黄褐色水样便, 考虑为移植物抗宿主病, 以甲强龙冲击治疗并用丙种球蛋白增强免疫力, 吗替麦考酚酯、他克莫司抗排斥及口服激素、抗CD25单抗、抗肿瘤坏死因子, 并纠酸、维持水电平衡、支持营养等治疗好转出院, 后因颅内复发死亡.异基因淋巴细胞输注可杀伤肿瘤细胞, 改善患者生存质量, 但对于高肿瘤负荷的患者, 效果有限, 如考虑进行异基因干细胞移植, 应注意免疫抑制剂(如CD25单抗和肿瘤坏死因子a抑制剂)的及时应用.     

γ射线照射预防供者淋巴细胞输注相关移植物抗宿主病的实验研究

我们借助相关移植物抗宿主病（ＰＴＧＶＨＤ）动物模型,观察不同剂量γ射线照射对Ｔ淋巴细胞增殖及细胞毒活性的影响,以及γ射线照射对ＧＶＨＤ的预防作用。报告如下。材料和方法１　动物　近交系ＢＡＬＢ／ｃ（Ｈ２ｄ）小鼠,雄性,８～９周龄,由第一军医大学实验动物中心提供;６１５（Ｈ２ｋ）小鼠,雌性,８～９周龄,由中国医学科学院血液学研究所提供。出生４８～７２小时新生及成年６１５／ＢＡＬＢ／ｃＦ１小鼠由本实验室繁殖饲养。２　γ射线照射　放射源为６０Ｃｏγ射线,剂量率为０．５Ｇｙ／ｍｉｎ,照射野为１０ｃｍ…     

异基因性NK细胞在小鼠体内抗白血病作用

目的：观察异基因性NK细胞在小鼠体内抗白血病作用。方法：建立荷EL9611（H-2d）红白血病细胞的CB6F₁H-2b/d小鼠动物模型,30只红白血病小鼠随机分为5组,每组6只。实验1组：每只小鼠输注NK细胞2×10⁵;实验2组：每只小鼠输注NK细胞5×10⁵;对照1组：未治疗组;对照2组：阿糖胞苷治疗组;对照3组：同基因NK细胞治疗组。以血象、体重、生存时间和病理组织学变化为观察指标并作组间比较。结果:①生存时间两实验组之间比较差异无显著性（P>0.05）。对照2组、实验组生存时间高于对照1组（P<0.01）;对照2组高于实验组（P<0.01）;实验组高于对照3组（P<0.01）。②注入EL9611后第10天,原始细胞占有核细胞的百分比两个实验组比较差异无显著性（P>0.05）;对照2组、实验1、2组低于对照1组（P<0.01）;对照2组低于实验组（P<0.01）;实验组低于对照3组（P<0.01）。③小鼠发病时脾脏明显肿大,肿大脾脏可达正常5～7倍,HE染色后,镜下可见脾脏正常组织结构破坏,有弥漫白血病细胞侵润。 结论：在荷EL9611（H-2d）红白血病CB6F₁H-2b/d动物模型上证实来源于H-2b的NK细胞能延长荷EL9611（H-2d）红白血病细胞CB6F₁ H-2b/d小鼠的生存时间。     

去甲基化KG1a细胞DNA对人外周血单个核细胞杀伤活性和T细胞受体Vαβ T细胞增殖的影响

目的:研究去甲基化的急性髓性白血病细胞KG1a的DNA体外诱导人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)的杀伤活性和T细胞受体Vαβ(αβ chain variable gene of T cell receptor,TCR Vαβ)谱系的表达和克隆情况.方法:去甲基化试剂盒对KG1a细胞去甲基化处理,并提取其DNA.应用乳酸脱氢酶释放法检测DNA诱导前后PBMC杀伤KG1a细胞的活性,应用RT-PCR方法扩增各组外周血T细胞的32个TCR Vα亚家族和24个TCR Vβ亚家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性.结果:基因扫描显示去甲基化的KG1a细胞DNA可以诱导出呈单克隆、寡克隆或寡克隆趋势生长的亚家族T细胞,且在效靶比为20:1时去甲基化的KG1a细胞DNA诱导前后PBMC杀伤KG1a细胞的活性差异有统计学意义(P＜0.05).结论:去甲基化的KG1a细胞DNA可提高PBMC杀伤活性,且诱导T细胞呈克隆性增殖.     

骨髓细胞形态学在典型和不典型慢性粒细胞白血病鉴别中的作用

目的　探讨骨髓细胞形态学在典型慢性粒细胞白血病 (CML)和不典型慢性粒细胞白血病 (aCML)鉴别中的作用。方法　回顾性观察了 5 2例CML和 2 3例aCML患者的骨髓涂片 ,分别计数各类细胞占有核细胞的百分率 ,并分别观察红系、粒系和巨核系病态造血情况。结果　CML幼红细胞数显著小于aCML(P <0 0 1) ,CML幼粒细胞数显著高于aCML(P <0 0 1) ,CML嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞数显著高于aCML(P <0 0 5 )。原始细胞数两者无差异 (P >0 0 5 )。两者红系、粒系和巨核系均存在不同程度的病态造血。结论　骨髓细胞形态中幼粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞及单核细胞计数在鉴别CML和aCML中有一定的参考价值。     

分子靶向药物诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达

目的：探讨不同分子靶向药物对高表达与低表达ATP结合转运蛋白G超家族成员2（ATPbinding cassette superfamily G member 2,ABCG2）的人耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞（分别简写为ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP）表面NKG2D配体（natural killer group 2 member D ligands, NKG2DLs）表达的诱导作用及其对NK细胞杀伤敏感性的影响。方法：免疫磁珠法分选ABCG2 highCNE2/DDP、ABCG2lowCNE2/DDP细胞及NK细胞。流式细胞术检测分选细胞的纯度和不同分子靶向药物（硼替佐米、索拉非尼、舒尼替尼）处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达率。LDH释放法检测不同药物处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性。结果：ABCG2 highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞表面ABCG2的表达率分别为（91.40±2.32）%和（1.70±0.24）%。分选后NK细胞中CD3-CD16+CD56+细胞的比例达90%以上。药物处理前,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3呈弱表达;经不同分子靶向药物处理后,5种NKG2DLs的表达率均明显上升(P<001),以舒尼替尼处理后NKG2DLs的表达率升高最明显。随着NKG2DLs表达的上调,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性也随之升高。结论：不同分子靶向药物可诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达,以舒尼替尼的诱导作用最强,且肿瘤细胞NKG2DLs的表达与其对NK细胞杀伤敏感性之间存在线性关系。     

基因扫描分析人T细胞受体CDR3谱型检测T细胞克隆技术的建立

目的建立人T细胞受体（TCR）互补决定区3（CDR3）基因谱型的基因扫描分析术,为分析T细胞克隆提供研究方法。方法分别以Jurkat和Raji细胞作为阳性和阴性对照,应用RT-PCR方法扩增5例健康志愿者外周血T细胞的34个TCR Vα亚家族和26个TCR Vβ亚家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性。结果T细胞株Jurkat细胞仅表达TCR Vα1．1和Vβ8基因,且为单克隆,而B细胞株Raji细胞则不表达所有的TCR Vα和Vβ基因。5例健康人表达所有的TCR Vα和Vβ基因,均为多克隆T细胞。结论基因扫描分析人TCRCDR3基因谱型是检测T细胞克隆性的精确敏感方法。