APO－1／Fas（CD95）分子研究进展

ＡＰＯ－１／Ｒａｓ为Ｉ型跨膜糖蛋白，分子量４５ＫＤ，属于ＮＧＦ／ＴＮＦ受休家族，广泛分布于多种组织中，与之结合的配体及单克隆抗休均可诱导细胞凋亡。已发现ＡＰＯ－１／Ｆａｓ参与了胸腺细胞选择，ＣＴＬ效应、免疫应答调节等多项生理活动，与自身免疫疾病的发生联系密切，与肿瘤的生长和转移也潜在相关，提示ＡＰＯ－１／Ｆａｓ和相应配体的相互作用可能是机体维持自身稳定的一条重要途径。第五届国际白细胞抗原会议命名ＡＰＯ－１／Ｆａｓ为ＣＤ９５。     

KIR基因的进化、表达与功能

KIR基因位于人染色体19q34,呈共显性表达.编码蛋白主要分布于NK细胞和T细胞,特异性识别HLA分子,传导活化或抑制信号,调控杀伤功能.观察表明,骨髓移植时供者KIR表型与受者HLA表型可影响骨髓移植的预后.不同种族的KIR表达有着明显的差异,因此有必要研究中国人的KIR遗传背景.本文对杀伤免疫球蛋白样受体(KIR)的进化、遗传、表达规律和功能进行综述.     

移植性C57BL/6小鼠FBL-3红白血病模型的建立及其生物学特性

目的探讨利用国内传代培养的FBL-3细胞建立H-2相合C57BL/6小鼠FBL-3红白血病模型的可行性,并观察模型的生物学特性。方法把FBL-3小鼠红白血病细胞经尾静脉接种C57BL/6小鼠,观察小鼠的生存时间和染色体变化,并对濒死小鼠的肝、脾、肺和肾进行病理检查,部分进行电镜检查。结果静脉接种1×10^3-1×10^7个白血病细胞,C57BL/6小鼠发病率分别为100%;接种细胞的数量与存活时间呈线性关系;白血病细胞主要侵及肝、脾、骨髓、肺和肾组织,糖原染色阳性、氯醋酸染色部分阳性,过氧化物酶、碱性磷酸酶、丁酸染色均阴性。电镜下观察到细胞内病毒样颗粒。脾脏和骨髓细胞染色体多数为非二倍体,只表达H-2b。结论经尾静脉接种FBL-3细胞可建立C57BL/6小鼠红白血病模型。     

骨髓细胞形态学在典型和不典型慢性粒细胞白血病鉴别中的作用

目的　探讨骨髓细胞形态学在典型慢性粒细胞白血病 (CML)和不典型慢性粒细胞白血病 (aCML)鉴别中的作用。方法　回顾性观察了 5 2例CML和 2 3例aCML患者的骨髓涂片 ,分别计数各类细胞占有核细胞的百分率 ,并分别观察红系、粒系和巨核系病态造血情况。结果　CML幼红细胞数显著小于aCML(P <0 0 1) ,CML幼粒细胞数显著高于aCML(P <0 0 1) ,CML嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞数显著高于aCML(P <0 0 5 )。原始细胞数两者无差异 (P >0 0 5 )。两者红系、粒系和巨核系均存在不同程度的病态造血。结论　骨髓细胞形态中幼粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞及单核细胞计数在鉴别CML和aCML中有一定的参考价值。     

人神经营养因子-3基因的亚克隆及其基因工程细胞模型的建立

目的 亚克隆人神经营养因子-3(human neurotrophin-3，NT3)并转染至体外培养的人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)，建立能够表达和分泌NT3的基因工程细胞模型。方法 采用低糖DMEM培养液 10％胎牛血清体外培养BM-MSCs，流式细胞仪分析其表面标记；构建真核表达载体pcDNA3.1( )／NT3并通过脂质体介导转染BM-MSCs；收集部分细胞提取其中的总RNA，经逆转录PCR检测NT3基因表达；利用培养上清液体外孵育毛细胞以鉴定其生物学活性。结果 BM-MSCs表达CD13、CD29、CD59．不表达CD11、CD14、CD31、CD34、CD45、CD80、CD86、CD117、HLA-DR；pcDNA3．1( )／NT3转染BM-MSCs后，能够表达和分泌NT3，并具有生物学活性，可促进离体的豚鼠耳蜗毛细胞存活。结论 在体外建立表达NT3基因并分泌NT3的基因工程细胞是可行的。     

MHC Ⅰ类基因逆转录病毒表达载体的构建及其在造血细胞中的表达

目的构建BALB/c小鼠MHC Ⅰ类基因的逆转录病毒表达载体并探讨该基因在C57BL/6小鼠造血细胞中的表达.方法由逆转录病毒载体pMSCV介导,将BALB/c小鼠的H-2Dd基因导人C57BL/6小鼠的造血细胞中,并用逆转录聚合酶链反应和流式细胞仪检测转染后基因的表达.结果用EcoRⅠ和Xho Ⅰ双酶切鉴定证实,H2Dd基因正确插入载体pMSCV.重组逆转录病毒感染的C57BL/6小鼠造血细胞整合了BALB/c小鼠的H2Dd基因,且能转录为mRNA,在其细胞膜上有H2Dd分子的表达.结论成功构建小鼠H-2Dd编码基因的逆转录病毒载体,该基因已稳定地整合进C57BL/6小鼠造血细胞的基因组内,且在细胞中得到表达.     

Tju103和CTLA4-Ig诱导T淋巴细胞免疫耐受的比较

目的观察比较Tju103和CTLA4-Ig分别调节、诱导T淋巴细胞免疫耐受的作用.方法用经丝裂霉素处理的异基因正常BALB/c(H-2d)小鼠巨噬细胞做耐受诱导原,分别用Tju103和CTLA4-Ig体外训导、调节C57BL/6(H-2d)小鼠T淋巴细胞,通过增殖效应(单向混合淋巴细胞反应,MLR)和杀伤效应(MTT法),考察经训导的C57BL/6小鼠T淋巴细胞分别对BALB/c小鼠和CBA(H-2k)小鼠脾细胞以及EL9611(H-2d)红白血病细胞的增殖效应和杀伤效应的改变.结果经Yju103调节后,C57BL/6 小鼠T淋巴细胞对BALB/c和CBA小鼠脾细胞以及EL9611红白病细胞的增殖反应和杀伤效应抑制作用明显,未能诱导对已接触抗原(BALB/c小鼠)产生特异性免疫耐受.经CTLA4-Ig孵育后,C57BL/6 小鼠T淋巴细胞对这三种细胞的增殖反应和杀伤效应抑制作用明显;对已接触抗原呈现免疫耐受,而对第三种抗原(CBA小鼠)和EL9611白血病细胞保持反应性.结论在特异抗原存在下,Tju103和CTLA4-Ig均能明显抑制异基因小鼠T淋巴细胞增殖反应性和杀伤效应,但Tju103诱导非特异免疫抑制,而CTLA4-Ig诱导特异免疫耐受,更适合于诱导移植免耐受.     

双花环标记法测定人外周血全T细胞和抑制性T细胞

以AET-SRBC花环为总T细胞的指标,采用Ts单克隆抗体Wu102作为第一抗体同T细胞(AET-SRBC~ )中Ts结合后,与兔抗鼠IgG致敏的SPA菌体形成双花环细胞。24倒正常人外周血淋巴细胞中T细胞(AET-SEBC~ )百分率为74.0％(SD=9.3),Ts(AET-SRBC~ 、SPA-Ig~ )为21.2％(SD=6.6),与国内外文献报道基本一致。     

人P58.1重组逆转录病毒载体的构建及其在淋巴细胞中的表达

目的构建人P58.1基因的逆转录病毒表达载体并探讨该基因在淋巴细胞中的表达。方法由逆转录病毒栽体pMSCV介导，将白血病受者的P58．1基因导入健康供者的淋巴细胞中，并用逆转录聚合酶链式反应和流式细胞仪检测转染后基因的表达。结果测序及BglⅡ、EcoRⅠ双酶切鉴定证实，获得了P58.1基因且已正确插入载体pMSCV。流式细胞仪检测空载体、未转染及重组pMSCV转染供者淋巴细胞的P58．1分子表达率差异有显著性，重组逆转录病毒感染的供者淋巴细胞整合了受者的P58．1基因，且能转录为相应的mRNA并在细胞膜上有P58．1分子表达。结论成功获得P58．1基因并构建重组逆转录病毒载体，该基因已稳定整合入淋巴细胞的基因组中，且获得了表达。     

双特异抗体介导活化T细胞杀灭耐药肿瘤细胞

原发性和继发性的肿瘤细胞对化疗药物的抵抗是肿瘤化学治疗失败的主要因素，目前已用离子通道阻断剂试图逆转肿瘤细胞由耐药变为敏感，但临床应用产生的效果甚微，因此需要另辟蹊径。本文报告双特异性抗体能够介导T细胞杀灭耐药的肿瘤细胞。