白细胞介素1受体竞争蛋白增加生长因子撤离后急性髓系白血病细胞凋亡

增殖调节失常和程序性死亡(凋亡)调节紊乱是急性髓系白血病发展的一个重要病理环节,其中对细胞因子的反应改变,使其连续进入细胞增殖周期是一个重要原因.本文探讨了撤离生长因子和用白细胞介素1受体竞争蛋白(IL-1RAP)阻断对白细胞介素1(IL-1)应用后对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响.一、IL-1对AML增殖的刺激作用是随着外源性IL-1浓度的增加而增强,当在1×10~6/ml细胞中加入500ng IL-1时,达到最大增殖倍数6.8倍.二、彻底洗掉IL-1再培养3天,IL-1最高剂量组自发性凋亡的比例最高,为48%,     

回输体外培养造血-免疫祖细胞加快亚去髓剂量化疗后造血-免疫功能的恢复

有相当一部分肿瘤可以通过提高化疗药物的剂量来提高治疗效果.然而,化疗强度的提高对机体造血-免疫系统的损伤也加重,造血-免疫功能的损伤会招致反复感染和残存瘤细胞的扩散,反而造成不利.本研究意在建立一种能加快高剂量化疗后造血.免疫功能恢复的方法,结果表明:有序的应用GM-CSF、IL-2、抗肿瘤-抗T细胞双功能抗体建立了培养人造血-免疫祖细胞的培养体系,经过3天的培养GM-CSF扩增了5.8倍,对癌细胞的特异性杀伤提高了3.4～5.7倍.将培养后的造血-免疫祖细胞回输给接受了亚去髓化疗剂量的病人(n=19),同时应用G-CSF.化疗方案:乳腺癌、鼻咽癌:5-FU 7500mg/M~2、CF 1200mg/M~2、VP 900mg/M~2、cDDP 150mg/M~2、TAM 500mg/M~2.肺癌:CTX3600mg/M~2、ADM 150mg/M~2、VP16 900mg/M~2、cDDP150mg/M~2,骨肉瘤:IFO 12000mg/M~2、Mesna 6000mg/M~2、VP16 900mg/M~2、CDDP 150mg/M~2.中性粒细胞绝对数(ANC)维持<100/μl的天数和恢复>500/μl的天数,与未处理干细胞回输组相比,分别缩短了5.9天和5.7天(p<0.05,P<0.05)。用此培养体系培养的造血祖细胞回输对血小板的恢复无影响.抗菌素应用和住空气层流室时间,与未处理干细胞回输组相比,分别减少了5.6天和8.9天(P<0.005,p<0.05)。患者巨噬细胞吞噬功能恢复时间和对卡介     

KG1a细胞体外诱导人外周血T细胞杀伤活性和TCR VβT细胞增殖的研究

【摘　要】　目的　了解急性髓系白血病KG1a细胞体外诱导人外周血T细胞的特异性细胞毒作用和T细胞受体(TCR) Vβ谱系表达和克隆性情况。方法　分别以Jurkat和Raji细胞作为阳性和阴性对照,建立TCR Vβ谱基因扫描技术,并用其检测5例健康个体T细胞克隆表型。采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养方法,以照射后的KG1a细胞作为刺激原体外诱导外周血单个核细胞增殖,应用LDH释放法检测不同效靶比时诱导前后T细胞杀伤KG1a细胞的活性,同时利用基因扫描技术分析诱导后TCR Vβ亚家族的克隆性增殖特点。结果　基因扫描显示5例健康人全部TCR Vβ谱型均呈高斯(钟型)分布,各亚家族表达频率接近,但呈现不同的多态性和长度分布。KG1a细胞可以诱导出呈单克隆、寡克隆或寡克隆趋势生长的亚家族T细胞,并具有特异性识别和杀伤KG1a细胞的功能。结论　KG1a细胞在体外可诱导T细胞呈克隆性增殖,此优势增殖的克隆性T细胞具有特异性细胞毒作用,对KG1a细胞具有选择性杀伤作用。     

γ射线照射预防供者淋巴细胞输注相关移植物抗宿主病的实验研究

作者通过观察６０Ｃｏγ射线照射对小鼠脾Ｔ淋巴细胞增殖活性的影响,借助于动物模型证实了γ射线照射对供者淋巴细胞输注（ＤＬＩ）相关ＧＶＨＤ的预防作用,试图探索γ射线照射能够最大程度地去除Ｔ细胞增殖活性,避免移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）发生而不损害ＤＬＩ抗白血病作用的适宜剂量和方法。材料和方法：（１）动物：近交系Ｂａｌｂ／Ｃ（Ｈ２ｄ）,８～９周龄及出生４８～７２小时的６１５Ｈ２Ｋ／Ｂａｌｂ／ＣＨ－２ｄＦ１小鼠。（２）ＧＶＨＤ动物模型：参照孟玉茹等（中华血液学杂志,１９９３,１４：５６４）方法,稍作改…     

鼻咽癌细胞株体外诱导同种异体T细胞TCR VβCDR3谱型和细胞毒性分析

目的 用鼻咽癌细胞株CNE2体外负载同种异体树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导T淋巴细胞,使之活化为细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocyte,CTL),观察其体外特异性杀伤和克隆性增殖.方法 用GM-CSF,IL-4和TNF-α体外诱导健康志愿者外周血单核细胞,用CNE2负载,使之分化为成熟DC,流式细胞仪检测负载前后DC的表型特征.在IL-2的作用下,用负载CNE2抗原的DC诱导自身T细胞生成特异性CTL.乳酸脱氢酶释放法检测其特异性杀伤活性;采用免疫谱型分析技术分析T细胞的克隆性.结果 健康志愿者外周血单核细胞体外在GM-CSF,IL-4和TNF-α诱导下获得具有典型表型特征的成熟DC,其诱导的CTL对CNE2有明显的特异性杀伤作用;PBMC的TCR Vβ CDR3谱型呈高斯分布,而诱导后的T细胞部分家族出现优势表达.结论 负载鼻咽癌抗原的同种异体DC所诱导的CTL在体外对鼻咽癌细胞有特异性杀伤作用,优势表达的TCR Vβ CDR3家族对鼻咽癌治疗有潜在的临床应用价值.     

NK细胞抑制CD34^＋早期急性髓系白血病细胞克隆形成

目的 探讨同种异体NK细胞对CD34 早期急性髓系白血病细胞的克隆抑制效应.方法 免疫磁珠法分离5例健康个体NK细胞,甲基纤维素克隆形成实验检测NK细胞对KG1a细胞杀伤后的克隆形成,同时与NK杀伤敏感细胞株K562比较.结果 急性髓系白血病细胞株KG1a中CD34抗原表达率为(98.0±1.1)%,分选后的NK细胞(CD3-CD16 CD56 细胞)纯度为(93.2±3.7)%.不同效靶比时NK细胞对KG1a细胞均能抑制其克隆形成.随着效靶比的增高,其克隆抑制率随之增高(P＜0.05).同一效靶比时,NK细胞对KG1a的克隆抑制率低于K562,差异有显著性(P＜0.05).结论同种异体NK细胞对CD34 早期急性髓系白血病细胞的克隆形成具有一定的抑制作用.     

EGCG通过下调Bcl-2诱导KG1A白血病细胞凋亡宰

目的 研究EGCG对KGIA白血病细胞的作用,探讨其作用机制.方法 使用人的白血病细胞株KG1A细胞.MTT细胞毒性测定评价对白血病细胞的作用,使用annexin v染料标记细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡.RT-PCR检测KGIA细胞Bcl-2家族mRNA的表达.结果 EGCG引起KG1A细胞活性的下降.ECA2G诱导KG1A细胞凋亡.且呈时间依赖性.EGCG诱导凋亡与下调Bcl-2和Bcl-xl有关.结论 EGCG可以通过下调Bcl-2和Bcl-xl诱导KG1A细胞凋亡.这些结果有助于提供新的有效联合方案,尤其是针对复发难治白血病的治疗.     

NK细胞抑制CD34+早期急性髓系白血病细胞克隆形吵

目的 探讨同种异体NK细胞对CD34 早期急性髓系白血病细胞的克隆抑制效应.方法 免疫磁珠法分离5例健康个体NK细胞,甲基纤维素克隆形成实验检测NK细胞对KG1a细胞杀伤后的克隆形成,同时与NK杀伤敏感细胞株K562比较.结果 急性髓系白血病细胞株KG1a中CD34抗原表达率为(98.0±1.1)%,分选后的NK细胞(CD3-CD16 CD56 细胞)纯度为(93.2±3.7)%.不同效靶比时NK细胞对KG1a细胞均能抑制其克隆形成.随着效靶比的增高,其克隆抑制率随之增高(P＜0.05).同一效靶比时,NK细胞对KG1a的克隆抑制率低于K562,差异有显著性(P＜0.05).结论同种异体NK细胞对CD34 早期急性髓系白血病细胞的克隆形成具有一定的抑制作用.     

非骨髓清除性HLA半相合异基因外周血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病一例

我们用非骨髓清除性ＨＬＡ半相合异基因外周血干细胞移植治疗 1例慢性粒细胞白血病 (ＣＭＬ) ,报告如下。病例和方法1　病例　女 ,2 3岁 ,因腹胀、乏力 1年余入院。查体 :中度贫血貌 ,脾肋缘下甲乙线 2 0ｃｍ ,甲丙线 2 3ｃｍ ,质硬 ,缘钝 ,表面光滑 ,无触痛。血常规 :ＷＢＣ 196× 10 9/Ｌ ,原始粒细胞 0 .0 6 ,早幼粒细胞 0 .0 3,中性中幼粒细胞 0 .14,中性晚幼粒细胞0 2 2 ,中性杆状核细胞 0 .17,中性分叶核细胞 0 .2 6 ,嗜酸粒细胞 0 .0 5 ,嗜碱粒细胞 0 .0 3,Ｈｂ 79ｇ/Ｌ ,ＢＰＣ 2 6 9× 10 9/Ｌ。骨髓增生极度活跃 ,原始粒细胞 0 .…     

Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤机制的初步探讨

目的 探讨人B细胞淋巴瘤Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤的机制.方法 以K562细胞作为对照,应用LDH释放法检测不同效靶比时同种异体NK细胞杀伤Raji细胞的活性.并分别用PCR方法和流式细胞仪检测K562和Raji细胞MICA/B、ULBP1-3、HLA基因型和分子的表达情况.效靶比20∶1时用单抗分别阻断K562和Raji细胞表面MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3和HLA-Ⅰ类分子,观察NK细胞对其杀伤活性的变化.结果 不同效靶比时NK细胞杀伤Raji细胞的活性明显低于杀伤K562细胞的活性,二者之间差异有统计学意义(P<0.05).K562细胞表达MICMB和ULBP1～3基因和分子,不表达HLA-Ⅰ类分子,Raji细胞表达ULBP1～3基因和HLA-Ⅰ类分子,不表达MICA/B和ULBP1～3分子.Raji细胞HLA基因型为A*3、3.B*71、71,Cw3、4.用单抗封闭MICMB和ULBP1～3分子后,NK细胞对K562细胞的杀伤活性明显降低,对Raji细胞的杀伤活性无明显改变.结论 Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤机制和Raji细胞高表达HLA-Ⅰ类分子,不表达NKG2D的配体MI-CA/B和ULBPI～3有关.