胫骨下段3D打印踝关节融合型肿瘤假体在骨肉瘤广泛切除术中的应用

目的:探讨应用胫骨下段3D打印踝关节融合型肿瘤假体重建胫骨下段恶性骨肿瘤切除后骨缺损的安全性和早期临床疗效。方法:自行设计胫骨下段3D打印踝关节融合型肿瘤假体,假体远端的组配节段与距骨和腓骨远端接触面为3D打印金属骨小梁界面,通过锥接的组配式节段调节假体长度。2017年12月至2019年12月在肿瘤切除术中应用3D打印...     

RNA干扰COPS3基因抑制骨肉瘤细胞HOS增殖和迁移能力的实验研究

目的 探讨COPS3基因的表达对骨肉瘤细胞系HOS增殖和迁移能力的影响.方法 构建针对COPS3 mRNA的慢病毒表达载体(Lenti-COPS3si)和阴性对照载体(Lenti-NC),并将其感染高表达COPS3基因的人骨肉瘤细胞系HOS.实时定量PCR检测COPS3 mRNA的表达;Western blot测定COPS3的蛋白表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测HOS细胞的增殖能力;迁移实验检测HOS细胞迁移能力的改变.结果 与空白对照组和转染Lenti-NC的阴性对照组相比,转染48h后Lenti-COPS3si组COPS3 mRNA和蛋白的表达均明显降低,转染48h后,Lenti-COPS3si组HOS细胞的增殖能力明显下降(P＜0.05).迁移实验结果显示,与空白对照组和阴性对照组相比,细胞的迁移能力下降(P＜0.05).结论 慢病毒载体Lenti-COPS3si可以特异性抑制骨肉瘤细胞系HOS中COPS3的表达,并显著降低细胞的增殖和迁移能力,此技术有望成为抑制骨肉瘤生长和转移的新途径.     

单纯后路经椎弓根椎体次全切除内固定联合人工椎体置换治疗胸腰椎转移瘤

目的 探讨单纯后路经椎弓根椎体次全切除内固定联合人工椎体置换治疗胸腰椎转移瘤的临床疗效.方法 2007年1月至2010年3月,对21例胸腰椎转移瘤进行单纯后路经椎弓根椎体次全切除、人工椎体置换及内固定术.男9例,女12例;平均年龄58岁(39～77岁).病变位于胸椎16例,腰椎5例.术前VAS评分平均7.4分(5～10分);术前Frankel脊髓功能分级:C级3例,D级6例,E级12例;术前ECOG功能分级2级1例,3级18例,4级2例.结果 所有患者无术中死亡,平均手术时间3.5h(2-5h).术中出血平均2150ml(800～5000ml).1例转移瘤患者术后2周死于多器官功能衰竭,20例患者术后VAS评分平均降至3.1分(1～4.5分),1例Frankel C级没有改变,1例C级改善为D级,6例D级均改善为E级.3例患者(14.3%)于术后半年至1年复发再次手术.最后一次随访时,20例患者平均随访13个月(3-24个月),其中13例患者死于原发疾病(平均生存10个月),其余存活患者ECOG功能分级为1～3级.结论 单纯后路经椎弓根椎体次全切除内固定联合人工椎体置换术减压充分,症状改善明显,可有效纠正脊柱后凸畸形,重建脊椎前后柱稳定性,改善骨转移瘤患者的生活质量.     

树突状细胞与尤文肉瘤细胞融合诱导肿瘤免疫应答的体外研究

目的检测尤文肉瘤细胞A673和树突细胞(DC)融合构建的肿瘤疫苗对尤文肉瘤细胞株A673 的杀伤作用.方法应用促融合剂PEG对尤文肉瘤A673细胞和从外周血单个核细胞(PBMC)诱生的树突细胞进行融合.利用细胞因子hGM-CSF和hIL-4从 PBMC诱生DC,并对其表型进行流式细胞仪(FCM) 分析,红色荧光染料PKH-26标记A673细胞,绿色荧光染料PKH-67标记DC,应用促融合剂PEG融合后光镜及电镜观察DC细胞和融合细胞形态,FCM检测融合效率,通过同种混合淋巴细胞反应检测其免疫刺激活性.通过IFN-γ ELISA法产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的量,通过51Cr细胞杀伤试验检测融合细胞对A673 细胞的杀伤作用.结果 FCM检测出从PBMC 成功诱生出CD83、CD80、CD86 及HLA-DR 高表达的成熟DC.DCs/A673融合细胞的融合效率达到23%,同种混合淋巴细胞反应显示DCs/A673融合细胞有很强的免疫刺激活性.IFN-γ分泌检测显示DCs/A673融合细胞组较对照组产生CTL水平显著增高.51Cr释放法检测融合细胞体外诱导抗原特异的CTL, 融合细胞激活的CTL对肿瘤细胞系A673细胞的杀伤作用强于DC-A673混合组、DC组、A673组的CTL(P<0.05),作用较对照各组显著增强.结论 DC与A673细胞融合体外致敏自体T 淋巴细胞能生成抗原特异CTL 对尤文肉瘤细胞A673 有一定的杀伤作用.     

天丁颗粒提取工艺的实验研究

目的:寻找天丁颗粒最佳提取工艺.方法:以总黄酮苷含量和浸膏得率为指标,采用正交试验设计,考察乙醇浓度(A)、溶剂用量(B)、提取时间(C)和提取次数(D)4个因素对提取的影响.结果:因素A和因素D对浸膏得率、总黄酮含量有显著影响(P＜0.05和P＜0.01),因素B和因素C对浸膏得率和总黄酮含量无显著影响(P＞0.05).结论:最佳工艺A3B2C2D2,即用10倍量的60%乙醇浸泡1 h,提取1.5 h,第二次用8倍量的60%乙醇提取1h.     

脊柱原发软骨肉瘤的外科治疗

目的：探讨脊柱原发软骨肉瘤的治疗方法及预后。方法：对1993年-2005年收治的16例脊柱原发软骨肉瘤进行回顾性分析。男9例，女7例；年龄19—69岁，平均44岁。累及胸椎7例，腰椎2例，胸腰椎多发1例，骶椎6例。8例伴神经损伤症状，Frankel分级C级3例，D级5例。1例骶骨巨大软骨肉瘤因去分化改变采取化疗，因化疗无效患者放弃治疗出院；其余15例均行手术治疗，根据肿瘤部位不同采取前路、后路或前后路联合肿瘤切除术，并予以相应重建方式。结果：15例手术患者术后随访1—13年，平均6．2年。1例死于术后肺栓塞。术前有神经症状者中1例Frankel C级患者术后无改变，其余7例（87．5％）术后Frankel分级均改善1个等级。2例出现去分化改变，于术后12个月内死亡。术后复发7例，占47％（7／15），复发1次者4例（4／15，27％），复发2次以上者3例（3／15，20％）。除1例去分化软骨肉瘤外，其余6例每次复发后均行手术再次切除。至今存活12例，生存时间1-19年，平均7．5年。结论：对于脊柱原发软骨肉瘤，首选广泛性切除，对难以达到广泛切除者．应尽量争取彻底切除；对复发肿瘤，仍应争取再次手术并尽可能彻底切除，可达到一定的生存时间及功能保留。     

多中心成骨肉瘤的治疗

目的探讨多中心成骨肉瘤的治疗方法。方法1998年1月至2005年6月治疗多中心成骨肉瘤患者9例，男7例，女2例。9例患者的临床特征、影像学表现、病理学检查均证实多中心成骨肉瘤的诊断。其中6例患者初诊时即存在多发骨肉瘤病灶；3例初诊时为单一骨肉瘤病灶，而后分别在确诊6、8、11个月出现第二处骨肉瘤病灶。1例患者因经济原因放弃治疗，其余8例患者接受阿霉素60mg／m^2,顺铂100mg／m^2,氨甲蝶呤8-12g／m^2长春新碱1．4mg／m^2、异环磷酰胺12．5g／m^2化疗1周期。化疗后根据病灶数目、部位以及对化疗的反应等决定包括手术、化疗在内的进一步治疗方案。对病灶数目较少、病灶可广泛切除的患者，如果化疗反应好，则在化疗的基础上广泛切除肿瘤，手术原则同单发性骨肉瘤；如果全身病灶数目多、部分病灶位于中轴骨等不易广泛切除的部位，则根据病情采取适当的姑息手术。对上述化疗反应差的患者，应用三氧化二砷、紫杉醇、VP-16化疗。结果放弃治疗的1例患者于确诊5个月后死于肿瘤引起的全身衰竭，5例初诊存在多发骨肉瘤病灶的患者平均生存时间9．8个月，其中2例对化疗反应好且完成4周期以上化疗的患者平均生存时间为15个月，对化疗反应差以及未能完成化疗的3例患者平均生存时间仅为7．1个月。3例病灶不同时出现的多中心成骨肉瘤患者平均随访2年，2例带瘤生存，无肺转移；1例无瘤生存。结论多中心成骨肉瘤预后较差，经积极的化疗，能够延长患者生命，改善预后。     

热休克蛋白70抑制剂PES对人胃癌BGC细胞NF-κB通路的影响

目的:探讨热休克蛋70(heat shock protein 70,Hsp70)抑制剂PES(2-phenylethynesulfonamide)对人胃癌BGC细胞活性、细胞迁移以及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的影响。方法 :采用Hsp70抑制剂PES处理人胃癌BGC细胞后,应用CCK-8(cell counting kit-8)法检测BGC细胞的活性,细胞划痕实验检测BGC细胞的迁移能力,蛋白质印迹法检测NF-κB信号通路成员及其下游血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,免疫荧光法观察BGC细胞质中p65的表达。结果 :与未经PES处理的BGC细胞(对照组)比较,5、10和20μmol/L的PES处理BGC细胞72 h后,BGC细胞活性和细胞迁移率被明显抑制(P值均<0.05)。20μmol/L的PES处理后,BGC细胞NF-κB信号通路中磷酸化p65(phospho-p65,p-p65)、p65、NF-κB抑制蛋白激酶α(inhibitory protein of NF-κB kinaseα,IKKα)、p-IKKα、p-IKKβ、IKKβ、p-Akt和Akt以及下游VEGF蛋白的表达水平均明显低于对照组(P值均<0.05),且细胞质中p65蛋白的荧光明显减弱。结论 :Hsp70抑制剂PES可抑制胃癌BGC细胞的活性和迁移,下调BGC细胞NF-κB信号通路活性以及下游VEGF蛋白的表达水平,降低BGC细胞质中p65的表达。     

骨水泥椎体成形在治疗脊柱转移瘤中的临床应用

目的:探讨骨水泥椎体成形在脊柱转移瘤治疗中的应用价值。方法:2000年11月～2011年6月我院应用骨水泥椎体成形治疗脊柱转移瘤患者155例,共251个椎体。颈椎1个,胸椎149个,腰椎101个。男性88例,女性67例,平均年龄63.5岁(36~87岁)。采用两种手术方式:应用经皮穿刺椎体成形术或经皮椎体后凸成形术110例,181个椎体;开放性手术椎管减压脊柱内固定,结合术中骨水泥椎体成形或联合其他部位椎体成形45例70个椎体。所有患者术前有严重的腰背痛或合并不同程度的下肢神经功能损害症状。平均VAS评分7.6分(5～10分),术后第3d根据VAS评分评估患者的疼痛缓解情况,术后2周时根据Frankel分级评估神经损害和ECOG评估活动能力的改善。出院后每3个月门诊随访一次,行X线片、CT或MRI检查,每次随访均进行疼痛、神经功能和活动能力的评估。结果:术中无1例出现肺栓塞、截瘫或围手术期死亡,所有患者术后3d内疼痛缓解,平均VAS评分降至2.6分(1～4分),术后2周评估,有神经功能损害者39例,Frankel分级除2例外均有1级及以上的恢复。ECOG分级4级者18例,其中15例改善为3级;3级者92例,其中63例改善为2级;2级45例中13例改善为1级。椎体成形术中骨水泥的平均注入量为4ml(3~7ml)。108(43%,108/251)个椎体术中出现骨水泥渗漏,19个在椎间隙,86个在椎旁或椎旁静脉,3个椎管内渗漏,但均无临床症状。术后患者均接受化疗和(或)放疗,平均随访20个月(3～36个月),122例死于原发病,33例带瘤存活。结论:对脊柱转移瘤患者选择合适方式的骨水泥椎体成形安全、简单,效果显著,减少了椎体置换或前路开放手术的创伤。