一种改良的组织DNA酚抽提法

随着对疾病认识的不断深入 ,人们发现许多疾病在病因上都有着其独特的遗传背景 ,对这些遗传信息的掌握无疑会对疾病的诊断和防治大有裨益 ,其中获得某个个体的基因组ＤＮＡ是进行基础研究及临床检测的先决条件。本室曾报告过适于基因检测用的血细胞ＤＮＡ处理和提取方法 ［１］,本文则对于活检或手术中采集的实质性组织样品的基因组ＤＮＡ的提取进行了研究。通过对以往方法的改进 ,力图使从组织中提取ＤＮＡ的方法变得更为快捷。１材料与方法１．１材料以大鼠组织为材料进行ＤＮＡ提取 ,为了证明所提取ＤＮＡ在临床检测上的有效性和适用性 ,…     

多肌蒂髂骨瓣治疗青壮年股骨颈骨折

目的 探讨治疗青壮年股骨颈骨折的难题。方法 17例(男12例、女5例)患者，平均年龄28.7岁，采用椎管麻醉，骨折切开复位螺纹钉内固定后，取缝匠肌、阔筋膜张肌蒂髂骨瓣植人股骨头颈槽内。结果 17例骨折全部获得愈合。平均愈合时间16周。随访16例未见股骨头缺血性坏死。结论 青壮年股骨颈骨折损伤暴力大，血循环破坏重，骨折愈合慢，股骨头缺血性坏死率较高，采用本方法可以促进骨折愈合，减少股骨头坏死率，提高疗效。     

多沙唑嗪能改善BPH合并性功能障碍患者的性功能

为了解多沙唑嗪控释片和普通片对良性前列腺增生（BPH）合并勃起功能障碍（ED）患者性健康的有益影响，Kirby等全面地回顾分析了针对680例有症状的BPH患者（50～80岁）的早期研究，该研究采用随机、双盲、双模拟、平行分组设计。患者先完成2周的单盲安慰剂治疗，再接受多沙唑嗪控释片4mg、8mg／d或者多沙唑嗪普通片1～8mg／d治疗13周。通过国际勃起功能指数问卷（IIEF）（任何问题得分≤3分定为功能障碍）以及勃起功能的5个方面的问题（包括性交满意度、性高潮、性欲和总体性满意度）评估治疗前后的性功能。入选的680例患者中，237例（35％）患有ED，他们对服用多沙唑嗪控释片和普通片治疗后性功能的改善都很满意，且IIEF5中的每一项都有临床意义的显著改善（P≤0．001），改善幅度从13％到41％，治疗组间无显著性差异。根据IIEF问卷中的独立问题来评价，多沙唑嗪控释片能持续改善性功能。两组在任一性功能问题的评估无显著性差异。最后研究者得出结论，多沙唑嗪控释片和普通片都能改善BPH合并ED患者的性功能，并可能是基于减轻下尿路症状以外的治疗机制，因为有报道多沙唑嗪在无症状的BPH患者中也是有效的。     

多发性肌炎的CT应用价值

目的研究多发性肌炎(PM)的肌肉CT表现特点及应用价值。方法经肌肉活检证实的多发性肌炎20例。所有病例均完成腰背肌、臀肌、大腿肌以及小腿肌的CT轴位扫描,其中大腿肌和小腿肌分肌群组观察。观察内容包括:肌肉的密度;肌肉的体积;肌筋膜的改变;肌肉组织的清晰度;皮下脂肪层厚度。结果CT发现肌肉体积缩小15个部位;肌肉密度减低,脂肪样变53个部位;筋膜增厚18个部位;皮下脂肪层增厚23个部位;肌肉组织模糊3个部位。结论CT能够清楚显示PM肌肉病损程度、判断肌肉萎缩和病变分布情况,为肌肉活检明确定位。     

幽门螺杆菌沙鼠感染模型的定量分析研究

目的　建立幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)蒙古沙鼠感染模型 ,并通过比较定量培养、快速脲酶试验和ELISA三种方法 ,确定Hp动物模型的最佳评判指标。方法　采用临床分离的Hp强毒株对 2 0只蒙古沙鼠进行感染 ,4周后剖杀。取血按常规ELISA法检测抗Hp抗体 ;分别剪取胃窦、胃体和胃底粘膜组织作定量培养 ;其余组织作快速脲酶试验及病理检查。结果　经定量培养结果显示沙鼠的Hp感染率达到 80 % (16/ 2 0 ) ,胃窦、胃体和胃底的Hp定植密度的对数均值分别为 5 2 4± 1 5 0、4 11± 3 2 2、和0 97± 2 3 9;16只Hp阳性沙鼠中脲酶试验有 4只阳性 ,ELISA有 7只阳性 ,阳性鼠的感染均值显著高于阴性鼠。结论　经筛选的Hp强毒株成功感染沙鼠后 4周 ,Hp主要定植于胃窦和胃体部 ;定量培养仍是评价Hp动物模型的最有效方法     

头针治疗脑膜炎后遗症运动性失语

夏××,男,11岁,1983年10月5日初诊,门诊号740827。患儿于四月前高烧、头痛、喷射状呕吐,逐渐转入昏迷。三月前入当地县医院住院治疗,诊断为“急性粟粒性结核”、“结核性     

参赭助运合剂治疗系统性硬化症患者食管病变的疗效观察

目的 探讨参赭助运合剂对系统性硬化症（systemic sclerosis,SSc）患者食管病变的临床疗效.方法 将符合入选标准的64例患者随机分为治疗组（参赭助运合剂＋西沙必利片空白模拟剂）和对照组（西沙必利片＋参赭助运合剂空白模拟剂）,疗程2个月,观察患者临床疗效、食管病变证候积分以及立卧位钡剂食管通过时间、卧位食管钡剂排空指数、食管扩张处最宽横径值等的变化和对患者生存质量的影响.结果 总有效率治疗组（96.9%）优于对照组（56.2%,P＜0.01）;两组治疗后食管病变证候均比治疗前均明显改善（P＜0.01）,且治疗组优于对照组（P＜0.01）;治疗组立卧位钡剂食管通过时间、卧位钡剂排空指数均改善（P＜0.01）,食管横径无明显改善;对照组除卧位钡剂食管通过时间有改善（P＜0.01）外,其余指标均无明显变化;治疗组生存质量明显改善（P＜0.01）,对照组则无明显变化.结论 参赭助运合剂可以增强SSc患者食管动力功能,是治疗SSc食管病变的有效中药复方.     

低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因Nkx-6.1和Nkx-6.2 mRNA表达的影响

Objective To study the influence of low-iodine diet on the expression of homeobox gene Nkx-6.1 and Nkx-6.2 in rat cerebrum tissue, and to explore the possible molecular mechanism of cerebrum development retardation caused by low-iodine. Methods Twenty female Wistar rats were randomly equally divided into two groups: low-iodine group and control group, both fed with low-iodine diet as low as 13.66 μg/kg determinated by spectrophotometry in Tianjin Institute of Endocrinology and the former with deionized water, the later 200 μg/L potassium iodate. Thyroid hormone level was detected using chemiluminescence immunoassay 3 months later and they were mated with male rats normally fed. Rats of 16-day pregnancy, new-born and 20th days old were detected the content of Nkx-6.1 and Nkx-6.2 mRNA in the cerebrum tissue by real-time fluorescence quantitative PCR 0.61), (3.28±0.80)pmol/L] were lower than the control group[(1.04±0.06), (39.42±14.68)nmol/L, (4.83±0.33), day pregnancy, new-born and 20th days old of control group was (1.90±0.23)×10-3,(1.86±0.40)×10-4, (1.11± 0.27)×10-4(F=827.58, P<0.01), Nkx-6.1 mRNA expression level gradually decreased along with aging(all P<0.05). The intra-group difference was significant (F=297.25, P<0.01) and the Nkxr.1 mRNA expression level during 16 days of pregnancy was the highest(P<0.01). It was higher in the control group than in the low-iodine group during 16 days of pregnancy (t=10.14, P<0.01) as well as in the low-iodine group than in the in 16-day pregnancy, new-born and 20th days old of control group was respectively(1.03±0.19)×10-2, (1.33± 0.10)×10-3, (8.79±0,87)×10-3, and that of low-iodine group was (0.31±0.03)×10-2, (1.53±0.13)×10-3, (7.51±0.86)×10-2. The intra-group difference was significant(F=1293.02,1065.83, all P<0.01). Nkx-6.2 expression level during 20th days old was the highest(P<0.01) and that of newborn was the lowest(P<0.01). The Nkx6.2 mRNA expression level in control group were higher than the low-iodine group during 16-day pregnancy and 20th days old(t=14.35, 4.05, all P<0.01). It was higher in the low-iodine group than in the control group during newboru(t=4.78, P<0.01). Conclusions The difference in the expression of Nkx-6.1 and Nkx-62 is highly related to the brain development retardation caused by low-iodine.     

ERCC1表达在Ⅲ期非小细胞肺癌含铂方案新辅助化疗中的意义

目的 探讨Ⅲ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者中人切除修复交叉互补因子1(ERCC1)表达与含铂新辅助化疗敏感性及预后的关系.方法 27例行新辅助化疗患者为实验组,33例同期未行新辅助化疗者为对照组,应用免疫组化法检测两组ERCC1表达.实验组患者于新辅助化疗前后均行CT检查.结果 实验组中ERCC1阳性和阴性患者中位生存时间分别为11、29个月(P<0.05).化疗后有效率分别为21.4%、69.2%(P<0.05).胸部CT检查示新辅助化疗有效率为44.4%.ERCC1表达与有效率具有相关性(r=0.487 6,P<0.01).结论 检测ERCC1表达有助于预测Ⅲ期NSCLC含铂方案新辅助化疗疗效,并与胸部CT检查的化疗有效率相关.     

双启动子shRNA真核表达载体的构建

目的:构建含有双启动子的shRNA真核表达载体.方法:通过PCR分别扩增带有BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/E)和带有Bgl Ⅱ、HindⅢ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/H),用BamH Ⅰ与EcoRⅠ双酶切pcDNA3.1(+)与PCR产物U6-B/E后进行连接,重组质粒命名为psPRO.再用BglⅡ与HindⅢ双酶切psPRO与PCR产物U6-B/H后进行连接,构建含有双启动子的shRNA真核表达载体.结果:酶切鉴定以及DNA测序结果显示载体构建成功.结论:构建双启动子的shRNA真核表达载体,使其在细胞中表达2个不同的siRNA,不仅筛选方便,而且可以通过建立这种模式化工具载体,为今后RNA干扰实验研究的开展和深入提供手段.