小鼠IL-17A-GST融合蛋白的克隆表达

目的: 构建含有小鼠IL-17A(mIL-17A)基因的重组原核表达载体,获得高效表达mIL-17A 的基因工程菌,以及较高产量的mIL-17A蛋白.方法:以PMA 活化后小鼠脾脏单个核细胞的总RNA 逆转录合成的cDNA为模板,PCR 法扩增mIL-17A的编码序列,并分别亚克隆至pMD18-T 载体和原核表达载体pGEX-4T-1 中,经酶切和DNA测序鉴定后,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果:PCR 产物大小及其双酶切鉴定均证明所克隆的基因是mIL-17A,DNA 序列测定进一步证实与GenBank 报道的序列完全一致成功构建了重组原核表达载体pGEX-4T-1/mIL-17A,并在大肠杆菌中高效表达出相对分子质量(Mr)约40 000的具有可溶性的融合蛋白,且Western blot证实确为目的蛋白结论: 成功构建了基因重组体pGEX-4T-1/mIL-17A;并制备出可溶性IL-17A-GST融合蛋白. E3),IPTG诱导表达,产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果:PCR 产物大小及其双酶 鉴定均证明所克隆的基因是mIL-17A,DNA 序列测定进一步证实与GenBank 报道的序列完全一致成功构建了重组原核表达载体pGEX-4T-1/mIL-17A,并在大肠杆菌中高效表达出相对分子质量(Mr)约40 000的具有可溶性的融合蛋白,且Western blot证实确为目的蛋白结论: 成功构建了基因重组体pGEX-4T-1/mIL-17A;并制备出     

进行性系统性硬化症误诊34例分析

进行性系统性硬化症 (PSS)是一种以胶原纤维增生、硬化为主要特点的结缔组织疾病 ,本病根据典型的皮肤症状即可确诊 ,但是本病变症繁多、损害范围广 ,可累及皮肤、肌肉、筋骨关节及内脏各系统 ,而且亦可有完全无皮肤症状的 PSS存在 ,给诊断造成困难。笔者统计近期我院收治确诊为 PSS患者 10 0例 ,其中 34例入院前被误诊 ,误诊率 34 % ,现报告如下。1　临床资料1.1　一般资料　本组男 15例 ,女 2 9例。年龄最大者 74岁 ,最小者 4岁 ,平均 41.7岁。病程最长者 18a,最短者 5个月 ,平均2 0 .4个月 ;春季发病者 4例 ,夏季发病者 9例 ,秋季发…     

三联用药治疗80例慢性细菌性和慢性炎症性前列腺炎的疗效评价

目的探讨联合应用热淋清、前列安栓、抗生素治疗慢性细菌性和慢性炎症性前列腺炎的疗效.方法调查120例慢性细菌性和慢性炎症性前列腺炎患者,治疗组80例行三联疗法,对照组40例单用抗生素治疗,治疗12周前后,采用两杯判定试验(PPMT)结果和慢性前列腺炎症状指数评分(CPSI)的差异.结果治疗组三联疗法中PPMT 检查21例Ⅱ型患者有15例实验室检查转为正常,59例ⅢA型患者中41例实验室检查转为正常;CPSI评分判定:临床治愈11例(13.8%),显效(CPSI减少＞15)48例(60.0%),有效(CPSI减少5～15)16例(20.0%),无效CPSI减少<5为5例(6.3%).总有效率70%,对照组总有效率为35%,两组治疗效果比较,有显著性差异.结论三联用药对慢性细菌性和炎症性前列腺炎比单用抗生素治疗具有更好的效果.     

纤维蛋白在软骨组织工程中的应用

纤维蛋白是纤维蛋白原经激活后形成的聚合物凝胶,作为软骨组织工程研究的载体材料,在相关的生物学和物理特性上具有其一定的优势。对纤维蛋白在软骨组织工程中应用的现状和发展方向进行综述。     

晚期非小细胞肺癌中LRP表达及其与NP方案化疗敏感性关系研究

目的:探讨晚期非小细胞肺癌组织中肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)表达水平与NP方案化疗耐药及预后的相关性。方法:应用免疫组化SP法检测72例非小细胞肺癌组织中LRP的表达并分析其与顺铂化疗耐药及1a生存率的关系。结果:晚期非小细胞肺癌癌组织LRP表达水平与非小细胞肺癌患者性别及组织学类型无关,而与非小细胞肺癌患者以NP化疗的耐药性有关。LRP的表达阳性患者1a生存率为25.7%,低于阴性患者的51.4%,有统计学意义(P<0.05)。结论:LRP在非小细胞肺癌组织中的表达水平与NP方案化疗耐药有关,LRP的高表达往往提示预后不佳。     

白藜芦醇对离心运动后骨骼肌微损伤的修复

背景:白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂和自由基廓清剂,具有清除自由基、减轻脂质过氧化等重要药理作用,目前有关白藜芦醇在减轻骨骼肌损伤、促进损伤修复方面的研究尚不多见.目的:观察白藜芦醇对离心运动后骨骼肌超微结构损伤、血清丙二醛和肌细胞浆Ca2+浓度的影响.设计、时间及地点:对照观察动物实验,于2007-08/2008-06在南方医科大学完成.材料:成年雄性SD大鼠72只,实验室适应性喂养3 d后随机分为蒸馏水组(n=40)、白藜芦醇组(n=32).白藜芦醇制剂购自湖南省洪江华光生物有限公司.方法:白藜芦醇组大鼠每日腹腔注射1次白藜芦醇制剂60mg/kg,蒸馏水组大鼠腹腔注射等量蒸馏水,连续2周.2周后,将大鼠在动物跑台上进行一次性下坡跑运动,速度为16 m/mjn,下坡坡度为16°,5 min运动,2 min休息,总运动时间为120 min.运动过程中采用人工驱赶和声刺激,不使用电刺激.主要观察指标:于运动前、运动后即刻、运动后24,48,72 h电镜下观察比目鱼肌纤维Z线,TAB法测定血清丙二醛和流式细胞仪检测肌细胞浆Ca2+浓度.结果:与蒸馏水组比较,白藜芦醇组镜下肌纤维损伤程度减轻,骨骼肌细胞Z线异常百分率在运动后即刻、运动后24,48,72 h比蒸馏水组分别降低了50.34%,52.67%,52.65%和53.26%(P＜0.05),离心运动引起的血清丙二醛升高程度分别下降了27.7%,29.56%,34.38%和27.79%(P＜0.05),胞浆Ca2+浓度分别降低了27.53%,25.84%,22.14%和11.62%(P＜0.05).结论:白藜芦醇可降低离心运动后血清丙二醛浓度和肌细胞浆Ca2+浓度,减轻运动导致的肌肉损伤.     

不同人群踝关节跖屈肌群肌肉形态与力量的相关性

背景:骨骼肌肌肉形态与力量关系密切,采用CT、核磁共振等仪器对人体骨骼肌进行活体形态测量,结合相关肌肉力量测量手段探索两者之间相关关系的报道尚不多见.目的:对比观察不同人群肌肉形态与力量的差异,探讨踝关节跖屈肌群形态特征与肌肉收缩力量之间的关系.设计、时间及地点:对比观察,于2006-05/12在中国医科大学附属第二医院完成.对象:选择普通男性青年学生14人作为对照组,测试前未专门从事过力量训练;另选健将级速滑运动员10人作为运动组.所有测试对象试验期间踝关节均无损伤.方法:采用螺旋CT对受试对象双侧小腿进行不问断连续扫描,影像分析采用Xiphoid CT专用图像分析软件,由CT图像计算得出小腿围、踝关节跖屈肌横截面积,根据体视学原理采用数值积分法计算跖屈肌群体积.采用CYBEX-NORM型多关节等速测力系统对踝关节跖屈肌群进行60,120,180,240,300(.)/s不同角速度下的等速测试.主要观察指标;①各组受试者跖屈肌形态及不同角速度下跖屈峰力矩和跖屈相对峰力矩的变化.②各组受试者不同角速度下跖屈峰力矩与跖屈肌群体积、最大横截面积、小腿围相关性. 结果:①与对照组相比,运动组跖屈肌最大横断面积、体积和小腿围均显著增大(P<0.05).在踝关节等速向心测试中,运动组的跖屈向心峰力矩在每一个角速度下均显著高于对照组(P<0.05),但随着关节运动角速度的增加,对照组和运动组的跖屈向心峰力矩都相廊地减小,②在不同的角速度F,跖屈肌群最大横截面积、肌肉体积、小腿围与跖屈峰力矩之间均具有显著的正相关性(r>0.725,P<0.05-0.01).结论;跖屈肌群峰力矩变化趋势与肌肉形态相一致,肌肉形态可作为观测肌力变化的一个重要参考指标.     

经尿道2μm激光膀胱部分切除与膀胱肿瘤电切术后护理的比较

目的对比经尿道2μm激光膀胱部分切除术与膀胱肿瘤电切术术后的护理。方法将膀胱肿瘤需行手术治疗的88例患者按手术方法不同分为2μm激光组45例和电切组43例,统计并分析手术时间、术后持续膀胱冲洗时间、膀胱痉挛发生次数、下床活动时间、手术后住院日等。结果2μm激光组患者在术后持续膀胱冲洗时间、膀胱痉挛发生次数、下床活动时间、术后住院天数等方面均优于电切组患者。结论经尿道2μm激光膀胱部分切除术具有创伤小、出血少、恢复快等优势,在治疗效果相近的前提下减轻了患者的痛苦,降低了护理难度,提高了医疗护理工作效率。     

电视胸腔辅助小切口肺叶切除44例临床分析

目的 探讨胸腔镜辅助小切口肺叶切除在早期肺癌及肺良性病变治疗中的应用价值.方法 回顾性分析行胸腔镜辅助小切口肺叶切除44例的临床资料,中周围型肺癌(T1N0-1M0)23例,囊肿4例,结核9例,肺上叶不张并脓肿2例,性假瘤6例.结果 本组无中转开胸,术时间90～120 min,均105 min.术中出血100～300 mL,均200 mL.全组44例无严重术后并发症,除胸腔闭式引流管时间2～5 d,均3.5 d.结论 胸腔镜肺叶切除对周围型肺癌(T0N0-1M0)及肺部局限性良性病变是一种安全可行的手术方法.     

大鼠小肠分泌胰岛素基因水平研究

目的:明确小肠内胰岛素的存在情况及其表达水平。方法:8周龄雄性Wister大鼠,禁食24 h,灌胃50％葡萄糖溶液、牛血清白蛋白溶液、油脂悬液各2 mL,分别灌胃后在第0、5、10、15、20、25 min时脱臼处死,按不同时间段分为6组,取其胰腺、十二指肠。提取各组织总RNA,反转录成cDNA,普通PCR检测胰岛素mRNA的存在,实时荧光定量PCR检测不同时刻胰腺和十二指肠胰岛素mRNA的相对表达量。结果:反转录普通PCR在大鼠十二指肠中扩增出胰岛素基因片段（经测序证实与胰岛素基因序列完全一致）;十二指肠与胰腺胰岛素mRNA的相对表达量有显著差异（P<0.05）,远远低于胰腺组织。灌胃后胰腺和十二指肠分泌胰岛素的表达水平呈动态表化,且十二指肠分泌胰岛素的表达高峰晚于胰腺。结论:该实验证实了除胰岛β细胞外十二指肠组织具有分泌胰岛素的功能,灌胃后十二指肠胰岛素mRNA的相对表达量呈动态表化,从而推测糖尿病的一种可能发病机制。