HSV-2糖蛋白D在昆虫-杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性分析

目的：在昆虫细胞中表达2型单纯疱疹病毒（HSV-2）糖蛋白D（gD2）胞外区基因,检测其免疫原性。方法：以HSV-2病毒基因组为模板,PCR扩增得到gD2片段,构建至杆状病毒质粒Bacmind中,转染sf9细胞,包装重组杆状病毒,收集后连续感染sf9细胞,收获第4代重组杆状病毒（P4）,通过Western blotting法鉴定蛋白表达情况,采用空斑实验检测重组病毒滴度,将P4代重组病毒作为种子大量感染sf9细胞,上清经镍柱亲和层析进行纯化,将纯化后的蛋白在第0、2和4周免疫BALB/c小鼠（gD2组）,以PBS作为阴性对照（PBS组）,ELISA检测小鼠血清中gD2特异性IgG滴度。结果：PCR鉴定和DNA测序,重组表达质粒gD2-Bacmind构建正确,空斑实验检测重组病毒滴度为2.0×10⁹ pfu·mL^-1,纯化的gD2重组蛋白在相对分子质量37000处出现目标条带,纯度达90%以上。第6周gD2组小鼠免疫血清中gD2特异性IgG抗体滴度Log10平均值达到4.34,与PBS组比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论：利用昆虫-杆状病毒表达系统表达的gD2胞外区蛋白具有良好的免疫原性,可作为HSV-2疫苗的候选。     

利咽通窍方对舌下神经损伤后大鼠舌肌收缩功能的作用

目的采用神经-肌肉电生理方法探讨利咽通窍方对舌下神经损伤后大鼠舌肌收缩功能的作用。方法成年Wistar雄性大鼠60只随机分为3组:假手术组、模型组、利咽通窍方组,每组各20只。模型组和利咽通窍方组建立舌下神经压榨损伤模型,假手术组仅分离舌下神经不压榨。造模后第2天利咽通窍方组开始滴舌利咽通窍方(0.3 mg/d),假手术组和模型组滴舌等量的生理盐水。各组分别于给药第7、14天检测舌左右两侧收缩阈强度、单收缩幅度及强直收缩幅度。结果与同时间点假手术组相比,模型组损伤侧舌肌阈强度升高(P0.05);与同时间点模型组相比,利咽通窍方组损伤侧舌肌阈强度降低(P0.05)。与同组的非损伤侧相比,模型组和利咽通窍方组损伤侧舌肌阈强度升高(P0.05)。与第7天相比,第14天利咽通窍方组和模型组损伤侧舌肌阈强度均降低(P0.05)。与同时间点假手术组相比,模型组损伤侧舌肌单收缩幅度和强直收缩幅度降低(P0.01);与同时间点模型组相比,利咽通窍方组舌肌单收缩幅度和强直收缩幅度升高(P0.05);与同组非损伤侧相比,模型组和利咽通窍方组损伤侧单收缩幅度和强直收缩幅度下降(P0.05)。第14天利咽通窍方组和模型组损伤侧舌肌单收缩幅度和强直收缩幅度均较第7天升高(P0.05)。结论利咽通窍方能够降低大鼠舌下神经损伤后的舌肌收缩阈强度,提高舌下神经-舌肌传导系统的兴奋性,提高舌肌的收缩能力,从而改善吞咽困难。     

AQP4真核表达载体的构建和AQP4-M23蛋白在中国仓鼠肺细胞系V79中的表达

目的：构建水通道蛋白4（AQP4）真核表达载体pmCherry-N1-hAQP4-M23,检测AQP4-M23蛋白在中国仓鼠肺细胞系V79中的表达。方法：采用PCR方法扩增hAQP4-M23基因,经双酶切后与真核表达载体pmCherry-N1连接,构建pmCherry-N1-hAQP4-M23重组表达质粒。采用脂质体将其转染至V79细胞中,将细胞随机分为对照组（未转染重组质粒的V79细胞）和转染组（转染重组质粒的V79细胞）。利用RT-PCR法和荧光显微镜检测2组细胞中hAQP4-M23基因的表达;取视神经脊髓炎（NMO）患者血清中抗AQP4抗体,与2组细胞结合,采用免疫荧光和水通透性法检测2组细胞中hAQP4-M23的活性。结果：成功构建AQP4真核表达载体;荧光显微镜观察,转染组细胞膜清晰表达红色荧光;免疫荧光检测,转染组细胞膜呈现绿色荧光,表明转染组细胞膜AQP4-M23蛋白可与NMO患者血清成分结合;与对照组比较,转染组细胞中hAQP4-M23活性升高（P<0.05）。结论：成功构建表达AQP4基因的真核表达载体,并在V79细胞系中成功表达hAQP4-M23蛋白。     

重度COPD患者营养风险与运动耐量的相关性研究

目的 探讨重度慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)患者营养风险与运动耐量的关系。 方法 根据营养风险筛查2002标准(NRS-2002)对58例重度COPD患者进行营养风险评估,分为无营养风险组(A组,n=33)及有营养风险组(B组,n=25)。两组分别进行血气分析(arterial blood gas, ABG)、常规肺功能(pulmonary function test, PFT)及心肺运动试验(cardiopulmonary exercise test, CPET)。 结果 两组间的年龄和身高差异无统计学意义(P＞0.05)。B组体质量及BMI低于A组(P＜0.01)。血气分析中两组间的p_aO₂和p_aCO₂差异无统计学意义(P＞0.05)。肺功能检测B组DLCO显著低于A组(P＜0.05)。而两组间其他指标(FEV₁、FEV₁%pred、FVC、FEV₁/FVC、RV及RV/TLC)差异无统计学意义(P均＞0.05)。心肺运动试验检查B组Peak V· O₂、Peak V· O₂%pred及Peak O₂ pulse显著低于A组(P＜0.05, P＜0.01)。两组间Peak V· O₂/kg及Peak Load差异无统计学意义(P＞0.05)。58例重度COPD患者的NRS评分与Peak V· O₂呈显著负相关(r=-0.353,P＜0.01)。58例重度COPD患者的NRS评分与Peak O₂ pulse、Peak Load呈负相关(r=-0.322、-0.272,P均＜0.05)。 结论 有营养风险的重度COPD患者的肺换气功能减低更显著,运动耐量下降更明显。重度COPD患者的NRS评分可预测其运动耐量。     

体外诊断行业背景下基于校企合作的医学检验混合式教学模式

医学检验在临床中已成为与内、外科并重的重点学科,传统医学检验技术逐渐与高精尖的生物科技领域接轨.在这一过程中,体外诊断(in vitro diagnosis,IVD)行业迅速兴起,成为医学检验行业的朝阳产业.IVD行业是医学检验的重要手段,而医学检验是IVD行业的潜在市场.IVD在全球医疗市场中的发展趋势迅猛,在临床诊疗及生物医学研究中发挥着越来越重要的作用,如何培养适应IVD产业需求的医学检验人才成为医学检验专业建设中的新课题.本研究结合目前国内IVD产业的需求,基于校企联合的人才培养模式,构建了医学检验技术专业的混合式教学模式,实施了一系列的改革探索.     

实验教学中大学生创新能力培养的探究

创新能力是在实践活动中不断产生具有经济价值、社会价值的新思想、新理论及新发明的能力,是新世纪人才必备的基本素质,亦是社会进步的基石和经济发展的核心力量.如今的社会竞争,不仅是人才之间的竞争,更是创新能力的逐鹿.高等学校是人才培养的重要基地.培养大学生的创新能力,是实现祖国兴盛及民族复兴的必要途径,对我国经济、社会及科技发展具有重要意义.而大学生创新能力的培养依赖于高校的创新环境.创新实验教学是培养大学生创新能力的有效途径,其在激发学生创新意识、提高创新技能、锻炼创新思维及培养创新品格等方面均具有独特优势,因此在培养大学生创新能力过程中发挥着重要作用.本研究以本校检验学院生物技术专业本科生为研究对象,在教学中建立创新实验教学模式,旨在培养学生的创新能力.     

第2节系统红斑狼疮性肺动脉高压

1 概况 1.1 定义同源病是指同一致病因素使不同脏器或系统同时或相继受到损害.虽同源,但受损脏器各异,故其临床表现多样.     

对糖尿病病人进行胰岛素疗法教育

约有 2 %的英国人患有糖尿病 ,其中80 %～ 90 %为非胰岛素依赖型。控制血糖对这类病人同对胰岛素依赖型病人一样重要。有时尽管口服最大剂量的降糖药 ,一些病人还是会出现高血糖症状。非胰岛素依赖型中1 /5的病人将不得不在某个时期接受胰岛素治疗。由于胰岛素口服后会被消化和破坏 ,因而需皮下注射。刚开始胰岛素治疗时病人会感到不安。护士应鼓励病人把心中的恐惧和不安说出来 ,这将有助于病人解除忧虑。病人可能在门诊开始接受胰岛素治疗 ,医护人员将提供给病人有关胰岛素的副作用等方面的信息 ,目的在于 :1教育病人处理好保健和生活方式…