同一HBV感染者外周血单个核细胞与肝组织中HBV DNA

用聚合酶链反应(PCR)及Southern印迹杂交检测了16例慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)及肝组织中HBV DNA.有13例同时在PBMCs及肝组织中检出HBV DNA,1例仅在PBMCs中检出,1例只在肝组织中检出。结果表明,在慢性HBV感染过程中PBMCs可同时被感染。     

杆状病毒载体介导的氯霉素乙酰转移酶基因在HepG2中的表达

目的 重组杆状病毒AcMNPV载体并观察其在人肝癌细胞株中的基因转移效率及表达。方法 用PCR方法获得氯霉素乙酰转移酶（CAT）报告基因及CMV与核因子（NFκB）启动子和增强子序列,并插入AcMNPV中,用同源重组方法获得CAT重组杆状病毒。分别感染昆虫细胞Sf5和人肝癌细胞株HepG2或HepG2.2.15细胞,测定CAT表达相对活性。结果 由CMV启动子驱动的CAT重组杆状病毒在HepG2或HepG2.2.15细胞均可表达CAT,而NFκB启动子驱动的CAT重组杆状病毒在HepG2细胞中CAT表达低,而在有HBV表达的HepG2.2.15细胞中有较高的CAT表达活性。结论 重组杆状病毒能在人肝癌细胞中表达外源基因,而且成功构建了HBV感染细胞特异性表达的杆状病毒载体。     

慢性乙型肝炎患者外周血IL-2、IL-4与IFN-γmRNA的表达

阐明Ｔｈ1/Ｔｈ2类细胞因子与慢性乙型肝炎肝脏炎症活动的相关性以及这些细胞因子作为慢性乙型肝炎活动调节剂的作用。采用ＲＴ ＰＣＲ法检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)内白细胞介素 2 (ＩＬ 2 )、ＩＬ 4及γ干扰素 (ＩＦＮ γ)ｍＲＮＡ的表达。结果显示 ,在静息期无明显的ＩＬ 4及ＩＦＮ γｍＲＮＡ的表达 ;在活动期ＩＬ 2、ＩＦＮ γ的表达率 ( 10 0 % )明显高于恢复期 ( 50 % ) (Ｐ <0 .0 5)。相反 ,在恢复期ＩＬ 4ｍＲＮＡ的表达率 ( 87% )明显高于活动期 ( 13% ) (Ｐ <0 .0 5)。在慢性乙型肝炎发病机制中 ,在ｍＲＮ…     

丙型肝炎病毒NS5B的体外表达、纯化和RNA多聚酶活性鉴定

目的 研究丙型肝炎病毒NS5B蛋白的表达及其生物学功能。方法 构建长度为1676bp(7261-9036bp,编码558aa)的HCV NS5B编码区cDNA,定向克隆到表达质粒pET16b中,并在大肠杆菌BL21中表达。应用合成的多聚A或寡聚U为模板进行~3H-UTP掺入实验分析纯化蛋白的活性。结果 表达的NS5B蛋白分子量为65KD,以包涵体形式存在细胞内,改变部分表达条件未能减少包涵体的形成及可溶性蛋白的增加,该包涵体蛋白在6M尿素浓度、pH:10及500mM NaCl的溶液中完全溶解。~3H-UTP掺入实验表明纯化的蛋白具有RNA多聚酶活性并依赖多聚A的存在。结论 对NS5B蛋白生物学活性的研究,有助于了解HCV的复制及抗病毒药物的开发。     

SARS研究近况

严重急性呼吸综合征(SARS)传染性强且病死率高，对社会生活及经济影响巨大，引起了世界各国的高度重视，全球病例8422，死亡率10．8％，医务人员感染占21％。一种新型的冠状病毒（coronavirus)满足了从患病的宿主体内能分离到病毒；宿主细胞能够培养该病毒，病毒能够通过滤菌器；培养的病毒能够使相同的或相近的宿主产生类似的症状；能够从实验感染的宿主体内重新分离到病毒；能检测到针     

医用三氧临床应用基础及其在肝炎等疾病治疗中的初步实践

三氧(臭氧,O3)是由3个氧原子组成的,在空气中不稳定,常温常压下约45 min转化成氧气;具强氧化作用,能杀灭多种微生物;在工业、公共卫生、日常生活中广为应用。医用三氧是指臭氧在医学中的治疗应用,它要求三氧浓度必须是能够精确调控的。医用三氧是用医用纯氧通过三氧发生器产生的三氧与医用氧气的混合气体。医用三氧对我们来说还比较陌生。以下就医用三氧的基础研究及其在肝病等疾病防治中的作用与初步实践作一回顾。1医用三氧发展历史[1]1915年Wolff A用三氧局部应用治疗严重感染伤口;1932年外科医生Erwin Payr通过他的牙科医生Fisch EA…     

慢性乙型肝炎患者肝组织及外周血单核细胞内IFN-α/β受体的表达及其临床意义

目的 慢性乙型肝炎患者肝组织的炎症程度是影响干扰素应答率的独立因素,本研究的目的 系从干扰素受体的角度来探讨其机制,此外了解外周血单核细胞干扰素受体与慢性乙型肝炎感染的关系.方法 采用链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法,检测15健康对照、16例慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞及另外21例慢性乙型肝炎患者肝组织内的干扰素受体的表达并进行定量分析.结果 15例健康对照、16例慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞干扰素受体的表达量分别为(21.4060±4.7658)、(23.8365±3.3329)(P=0.374);另外21例慢性乙型肝炎患者根据肝脏病理的炎症程度分为3组G1(5.6913±1.8422)、G2(7.4706±5.3572)、G3(25.1307±7.0700)(P=0.000).结论 慢性乙型肝炎患者肝组织内干扰素受体的表达量与肝组织的病理炎症程度相关,可能是其对干扰素应答率高的原因,而外周血单核细胞干扰素受体的表达与HBV感染无关.     

原发性肝癌患者临床诊疗现状分析及多学科协作诊疗的初步探讨

目的 了解原发性肝癌（PLC）住院患者的临床基本特征及诊疗现况,探讨多学科协作诊疗模式（MDT）在原发性肝癌治疗中的应用价值。方法 2010年1月1日～2013年12月31日期间在南方医院诊疗的PLC患者5390例,对患者的性别、年龄、病因、HBeAg定性、HBV DNA定量、AFP定量、Child-Pugh分级、BCLC分期、治疗方式等临床资料进行回顾性分析。结果 本组PLC患者以男性为主（87.4%）,中位年龄为53岁,HBV感染率为84.15%,AFP阳性（≥20 μg/L）率为65.63%;HBeAg阳性患者AFP阳性率为76.95% （671/872）,高于HBeAg阴性患者的54.11%（685/1266）或HBV DNA阳性（≥1.0×103 IU/ml）患者的70.73 （1022/1445,P<0.01）;患者年龄越小、肝功能越差、BCLC分期越晚,AFP阳性率越高（P<0.01）;PLC病理学分型以肝细胞癌（HCC）为主（84.7%）;BCLC分期以 C期（41.0%）和B期（31.0%）为主;仅10%PLC患者经过综合治疗;在1051例PLC患者中,初治即接受MDT诊疗的56例（5.3%）,而28例（2.7%）非初治患者接受了MDT诊疗;在常规治疗情况下,单次平均住院费用为28234元,而MDT治疗的平均住院费用为26307元,费用减少了6.83%。结论 PLC患者多并有慢性HBV感染,且发病住院时多为中晚期,MDT诊疗模式可以减少住院费用。     

重型乙型肝炎e抗原阴性患者前C变异株及其体外翻译

目的：探讨HBeAg阴性的慢性重型乙型肝炎患者HBV前C区变异及前C区T1862突变体对e抗原合成和分泌影响,方法：选取9例重型乙型重病毒性肝炎患者,用PCR方法扩增血清中HBV前C／C基因区,并克隆后测序和序列分析,构建HBV前C区T1862位点突变体表达质粒pGEMT,经体外翻译比较野毒株和变异株的表达产硪,结果：HBV前C区有3个位点异使氨其酸序列改变,A1896,A1899和T1862,A1899并不单独出现,前C区T1862突变并不阻止HBVe前体外合成,同时,有2例并未检测到前C区的变异,结论：部分重型肝炎HBeAg阳性原因降了T1896变异外,还存在T1862变异,前C1862突变对HBVe抗原前体蛋白合成并无影响,可能e抗原前在分泌过程中受阻。     

重型乙型肝炎病人中乙型肝炎病毒C基因启动子变？…

目的 了解重型乙型肝炎（乙肝）病人血清乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ Ｃ基因启动子（ＣＰ）的变异。方法 对用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法扩增的血清ＨＢＶ ＤＮＡ直接测序。结果 ７例亚急性重型肝炎病人的ＨＢＶ分离株ＣＰ区分别有２￣１２个替代变异,１例病人有１１ｂｐ的碱基插入。ＣＰ变异主要发生于ＣＰ的第１和第２个ＡＴ丰富,ｎｔｌ７６２和ｎｔｌ７６４的替代变异见于７例亚急性重型肝炎病人的４例中,是ＣＰ变异的热点,