人β2微球蛋白基因在大肠杆菌中的稳定、高效表达

目的应用基因工程技术表达人β2微球蛋白基因(β2m)。方法采用逆转录PCR技术,从Raji细胞株获得β2m的基因序列;将其与改建后的质粒pBV220连接,转染大肠杆菌BL21,经42℃诱导后,以SDS-PAGE鉴定阳性表达克隆,产物经过柱纯化。结果获得了编码成熟β2m的全长cDNA和高效、稳定表达人β2m的大肠杆菌克隆。结论成功地在大肠杆菌中获得了β2m基因的高效表达,为制备主要组织相容性复合体(MHC)-四聚复合物系统奠定了基础。     

HBeAg状态及乙型肝炎病毒载量对慢性重型乙型肝炎预后的影响

目的 探讨HBeAg状态及HBV DNA载量对慢性重型乙型肝炎预后的影响.方法 回顾分析2002年1月至2007年12月在南方医科大学南方医院住院的慢性重型乙型肝炎患者406例,研究HBeAg状态、HBV DNA载量对疾病预后的影响.计量资料采用t检验,率的比较采用X2检验.结果 406例重型肝炎患者中,HBeAg阳性208例,占51.2%,HBeAg阴性198例,占48.8%.HBeAg阳性组与HBeAg阴性组比较,两组间男女构成比、TBil峰值及平均凝血酶原活动度谷值差异均无统计学意义;HBeAg阴性组平均年龄(46.7±12.8)岁,显著高于HBeAg阳性组(38.3±13.5)岁(t=6.43,P＜0.01);HBeAg阴性组肝硬化患者占67.7%,亦显著高于HBeAg阳性组的45.7%(X2=19.97,P＜0.01);HBeAg阴性组好转率为32.3%,显著低于HBeAg阳性组的44.7%(X2=6.56,P＜0.05).在208例HBeAg阳性与198例HBeAg阴性患者中,均显示随着HBV DNA载量的升高,其好转率下降,呈显著负相关(X2=22.98,X2=26.04;均P＜0.01).结论 HBeAg阴性重型乙型肝炎较HBeAg阳性者预后差;无论HBeAg状态如何,HBV DNA载量越高,其预后越差.     

臭氧化盐水对肝细胞Keap1-Nrf2-ARE通路的激活作用

Objective To study the effect of ozonized saline on the activation of the Keapl-Nrf2ARE signaling pathway in rat liver cells. Methods Twenty maleSprague-Dawley rats were randomly divided into ozonized saline(OS) group, model group, ozonized saline control (OSC) group and normal control (NC)group. The rats in OS group and model group were intravenously administered with OS or oxygen saline (5 ml/kg) respectively, once a day for 15 days, and then intraperitoneally injected with CCU dissolved in Oliver oil. The rats in OSC group were pretreated with OS for 15 days. The rats in NC group were fed normally for 15 days. On the 16th day, the rats in OSC group and NC group were intraperitoneally injected with Oliver oil (2 ml/kg) without CCU. After 24 hours of CCU or olive oil intraperitoneal injection, the serum levels of alanine transaminase (ALT) and aspertate aminotransferase (AST) were measured. The liver tissues were also collected for detection of total anti-oxygen capability (TAOC), glutathione (GSH), catalase (CAT), Glutathione peroxidase (GPx). Western Blot was used to detect Nrf2 and immunofluorescence staining assay to display intracelluar distribution of Nrf2. Results Compared with the rats in model group,the serum ALT and AST levels of rats in OS group were significantly lower (P < 0.01) ,which were (1240.4 ± 188.2) U/L and (1245.4 ± 176.9) U/L vs (539.8 ± 175.3) U/L and (546.0 ± 130.2) U/L, and the TAOC, CAT, GPx and GSH activity of rats in OS group were significantly higher, which were (0.72 ± 0.24) U/mg, (1.05 ±0.21) mg/g, (676.9 ± 115.1) U/mg and (45.2 ± 14.3) U/mg vs (1.37 ± 0.19) U/mg, (2.23 ± 0.55) mg/g,(1024.6 ± 162.9) U/mg and (68.2 ± 9.9) U/mg, respectively. In contrast with NC group, pretreatment of OS in OSC group elevated TAOC, CAT, GPx and GSH activity (P < 0.01 or P < 0.05). Ozonized saline can strengthen the Nrf2 expression in liver cells. Conclusions Preconditioning injection of ozonized saline can reduce rat's liver injury induced by CCl4- The ozonized saline, as a novel Nrf2 activator, can reduce the oxidative damage of radical oxygen species (ROS) and the deleterious substance by activating the KeaplNrf2-ARE signaling pathway and its downstream genes expression.     

血浆置换治疗肝功能衰竭临床研究

目的观察血浆置换治疗肝功能衰竭的疗效。方法 148例患者在内科综合治疗的基础上给予血浆置换治疗,观察临床疗效和并发症发生情况,监测治疗前后肝功能生化指标的变化情况。结果 148例患者经血浆置换治疗后临床症状有不同程度缓解,有效率为62.2%（92/148）;临床症状无好转48例;死亡8例。治疗后TBil、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、PT均低于治疗前,白蛋白和PTA均高于治疗前,差异均有统计学意义（P〈0.05和P〈0.01）。早期患者临床好转率为85.7%均高于中期的59.5%和晚期的38.0%,差异有统计学意义（P〈0.05）。连续3次以上（包含3次）血浆置换的患者TBil下降幅度为65.93%高于连续3次以下的43.49%,差异有统计学意义（P〈0.01）。148例患者共进行血浆置换治疗436次,出现不良反应58次（13.30%）。结论血浆置换治疗肝功能衰竭疗效明显,连续多次治疗对降低TBil效果更好,治疗早、中期肝功能衰竭最为适宜。     

人β2微球蛋白基因的克隆与鉴定

人 β2微球蛋白基因 (β2 ｍｉｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ,β2 Ｍ)位于染色体15ｑ2 1～ 2 2 .2 ,成熟蛋白产物由 99个氨基酸组成 ,是ＨＬＡ Ⅰ类分子的轻链 ,在ＣＤ8+ 细胞毒Ｔ细胞 (ＣＴＬ)反应中起重要作用。近年发展的ＨＬＡⅠ 肽四聚复合物 (ｔｅｔｒａｍｅｒｉｃｃｏｍｐｌｅｘ)技术 ,就是通过基因工程制备ＨＬＡ Ⅰ类分子的轻链和重链 ,模拟靶细胞膜表面的ＨＬＡⅠ 表位复合物与Ｔ细胞受体 (ＴＣＲ)结合来检测Ｔ细胞群中相应表位的特异性ＣＴＬ[1] 克隆。为此 ,我们采用逆转录聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)克隆了 β2 Ｍ ,并进行了鉴…     

浅谈临床医学教学的新趋势

本文通过解析罗杰斯的教育观,并结合我国目前的临床医学教育改革,力图把罗杰斯教育思想的启示用于促进临床医学教育改革,并从培养学生创新能力、注重理论联系实践、重视个性发展、转变教师角色四个方面进行了阐述.     

血糖水平对慢性重型乙型肝炎预后的影响

目的探讨空腹血糖水平对慢性重型乙型肝炎预后的影响。方法回顾分析387例住院治疗的慢性重型乙型肝炎患者,研究空腹血糖水平对疾病预后的影响。结果387例慢性重型乙型肝炎中,血糖低于2.8mmol/L者59例(15.2%),血糖在2.8~3.9mmol/L者138例(35.7%),血糖在3.9~6.1mmol/L者190例(49.1%)。不同空腹血糖组间的男女构成比、平均年龄差异均无显著;重型肝炎临床分期即早、中、晚期与空腹血糖水平密切相关,临床分期越晚,低血糖发生率越高(P<0.01);空腹血糖水平与疾病严重程度及预后密切相关,空腹血糖水平越低,平均总胆红素峰值越高,平均凝血酶原活动度谷值越低,临床好转率亦越低(均P<0.01)。结论慢性重型乙型肝炎患者常易发生低血糖,其空腹血糖水平与临床分期、疾病严重程度及临床预后密切相关。     

肝动脉灌注化疗术联合靶免对比经动脉插管化疗栓塞术联合靶免治疗中晚期肝癌患者术后引起肝损伤的研究

目的对比分析肝动脉灌注化疗术(HAIC)和经动脉插管化疗栓塞术(TACE)联合免疫检查点抑制剂(ICIs)和多靶点酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)治疗中晚期肝细胞癌(HCC)患者术后肝功能损伤的情况。方法回顾性纳入2019年1月至2021年11月收治于南方医科大学南方医院行HAIC/TACE+ICIs+TKIs治疗的中晚期HCC患者, 随访截至2023年7月。记录介入术前1周内及术后第1天肝功能检查结果, 根据常见不良反应事件评价标准(CTCAE) 5.0对术后肝损伤程度进行分级, 参照实体肿瘤的反应评价1.1标准进行疗效评估。计量资料组间数据比较采用t检验或非参数秩和检验;计数资料组间数据比较采用χ2检验或Fisher精确概率法;采用Log-rank法分析生存情况的差异。结果研究纳入HAIC组82例患者, TACE组77例。两组患者的性别、年龄、体力状态评分、肿瘤数量、有无肝硬化、Child-Pugh分级、白蛋白-胆红素(ALBI)分级及联合的ICIs和TKIs方案差异无统计学意义。HAIC组患者肿瘤分期更晚, 肿瘤负荷更重, 肝储备功能更差, BCLC分期C期患者比例更高(81.7%与...     

慢性HBV感染前C区变异与病毒复制水平关系

探讨HBV前C基因变异与病毒复制水平的关系在慢性HBV感染者中的意义。应用错配聚合酶链反应（PCR）－限制性片段长度多态性（RFLP）分析与荧光定量聚合酶链反应检测HBVDNA相结合,对30例HBsAg（＋）、抗－HBe( )及抗－HBc( )慢性HBV感染者,其中无症状携带者（AsC)9例、慢性乙型肝炎（CHB）12例及慢性重症肝炎（CHF）9例进行前C区基因变异与HBVDNA水平关系进行分析。AsC组3例（33．33％）,CHB组9例（75％）及CHF组8例（88．89％）有A83(nt1896)变异。荧光定量PCR结果表明HBVDNA含量在CHF组中最高。HBV前C变异与HBV不同感染状态中都可见,其病毒复制水平与肝病活动相关。