核苷（酸）类似物抗病毒治疗慢性重型乙型肝炎的疗效观察

目的评价核苷（酸）类似物抗病毒治疗慢性重型乙型肝炎的疗效。方法治疗组65例慢性重型乙型肝炎患者在内科综合治疗基础上加用核苷（酸）类似物抗病毒治疗,对照组63例慢性重型乙型肝炎患者只采用内科综合治疗,比较2组血清总胆红素（TBil）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、凝血酶原活动度（PTA）、乙肝病毒DNA（HBV-DNA）水平和病死率。结果治疗1个月后2组PTA高于治疗前,但2组升高水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）;2组TBil、ALT和HBV-DNA水平均低于治疗前,但2组降低水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗组死亡6例（9.2%）,对照组死亡6例（9.5%）,2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。治疗3个月后2组PTA均高于治疗前,且治疗组高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;2组TBil、ALT和HBV-DNA水平均低于治疗前,差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗组死亡8例（12.3%）,对照组死亡17例（27.0%）,2组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论核苷（酸）类似物抗病毒治疗慢性重型乙型肝炎3个月后,可以明显降低乙肝病毒DNA（HBV-DNA）水平,改善肝功能,降低病死率。     

乙型肝炎病毒核心启动子部分缺失真核表达载体的构建及对病毒抗原表达的影响

乙型肝炎病毒核心启动子 (ＣＰ)部分缺失变异已证实在几种ＨＢＶ感染的临床现象中存在[1 3 ] 。我们在一组 14例血清抗 ＨＢｅ阳性的无症状携带者中 ,发现有 9例在ｎｔ174 8(或ｎｔ174 7)至ｎｔ176 7间 2 0 (或 2 1)个核苷酸的缺失 ,此 9例中有 5例合并有ｎｔ1896Ｇ→Ａ点变异[4] 。本研究在此基础上 ,拟构建这种ＣＰ 2 0 / 2 1ｂｐ缺失及合并存在Ａ1896点变异的ＨＢＶ全基因重组真核表达载体 ,并转染ＨｅｐＧ2细胞 ,以研究此类变异株对病毒抗原表达的影响。一、材料与方法1 材料 :ＥＢＯ ｐｐｌｐ质粒由美国Ｓｃｒｉｐｐｓ研究所Ｆｒａｎ…     

干扰素α/β受体慢性乙型肝炎肝组织的免疫组化定位

目的:IFNα/βR在慢性乙型肝炎患者肝脏组织内的免疫组化定位及其对干扰素应答的预测作用.方法:应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法,对40例慢性乙型肝炎患者肝脏组织内IFNα/βR的分布特点进行了观察.结果:IFNα/βR在慢性乙型肝炎患者肝脏组织肝细胞膜和胞质内均有不同程度的表达,其中2例患者血管内也有分布.结论:慢性乙型肝炎患者肝肝组织内非溶性的IFNα/βR的表达量可能系IFNα干扰素应答率更为有效的预测指标.     

HBV核心启动子部分缺失重组质粒的构建

目的　构建乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）核心启动子（ＣＰ）部分缺失的真核表达质粒。方法　利用线性化的、从ＣＰ上游顺 序开始且含完整转录单元的ＨＢＶ 基因克隆（Ｐ３．８Ｉ质粒）为工具,采用分子克隆、人工定点突变、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ,鉴定和测 序分析等技术构建目的载体。结果　成功构建了ＨＢＶ全基因ＣＰ ２０／２１个ｂｐ缺失（ｎｔ １７４８／１７４７－１７６７）和ＣＰ２０／２１个ｂｐ 缺失＋１８９６热点变异的重组真核质粒表达质粒,并经ＰＣＲ－ＲＦＬＰ序列分析证实。结论　此重组真核表达质粒构建可为 体外进一步研究上述变异的生物学意义奠定基础。     

慢性乙型肝炎患者HBcAg特异性Th细胞克隆的建立及初步分析

目的 了解Th细胞极化群体在慢性乙型肝炎（CHB）外周血及肝组织中的分布情况。方法 采用有限稀释法,建立CHB患者外周血及肝组织HBcAg特异性Th细胞克隆,并对所获得细胞克隆进行分析。结果 发现自肝组织分离的HBcAg特异性T细胞克隆,92.5%为CD4+表型,以Th1为主;而来源于外周血的T细胞克隆主要以Th0 为主,并与HBeAg是否阳性无关。仅15% （6/40）的T细胞克隆呈现明显的HBcAg特异性淋巴细胞增殖反应。结论 在肝组织及外周血占主导地位的Th细胞极化群的不同,较高比例的Th1细胞在肝组织炎症局部的聚集,提示在HBV的免疫发病机制中,Th1细胞可能起重要作用。     

ＲＦＬＰ基因分型在动态监测乙型肝炎病毒基因变异中的应用

目的 探讨基因分型结合克隆后测序方法在动态监测ＨＢＶ基因变异中的价值。方法 分析１例重型肝炎患者发病后血清,用ＰＣＲ扩增血清中ＨＢＶ perＳ／Ｓ基因片段并克隆,２份标本各随机挑取３个阳性克隆进行测序;同时用ＲＦＬＰ方法分析２份血清中ＨＢＶ毒株的基因型。结果 ＲＦＬＰ分析２份血清为Ｂ基因型为主的Ｂ／Ｃ基因型混合毒株感染;６个克隆中仅１株为Ｃ基因型。比较２份血清ＨＢＶ perＳ／Ｓ克隆核酸序列,有１７０个点位的差异,剔除Ｃ基因型株后,仅５４个位点差异。结论 克隆后测序结合ＲＦＬＰ对ＨＢＶ基因型测定有助于更准确地对ＨＢＶ基因变异进行动态分析。     

血清e抗原状态及甲胎蛋白水平对慢性重型乙型肝炎预后的影响

目的 探讨血清e抗原状态及甲胎蛋白(AFP)水平对慢性重型乙型肝炎预后的影响.方法 回顾分析2002年1月至2007年12月在我院住院的慢性重型乙型肝炎患者325例,研究血清e抗原状态及血清AFP水平对疾病预后的影响.结果 325例慢性重型乙型肝炎中,HBeAg阳性168例(51.7%),HBeAg阴性157例(48.3%).HBeAg阳性组与HBeAg阴性组比较,两组间男女构成比、平均总胆红素峰值及平均凝血酶原活动度谷值均无显著差异;HBeAg阴性组平均年龄及肝硬化比例均显著高于HBeAg阳性组(P值均<0.001);HBeAg阴性组好转率显著低于HBeAg阳性组(P<0.05).在168例HBeAg阳性与157例HBeAg阴性病人中,均显示随着血清AFP的升高,其好转率亦升高,呈显著正相关(P值分别<0.001、0.05).结论 HBeAg阴性重型乙型肝炎较HBeAg阳性者预后差;不管HBeAg状态如何,血清AFP水平越高,慢性重型乙型肝炎预后越好.     

广州地区严重急性呼吸道综合征的临床特点

目的　探讨当前流行的严重急性呼吸道综合征 (SARS)的若干临床特点。方法　回顾性统计分析广州南方医院收治的 85例SARS患者的临床资料。结果　 85例SARS患者的年龄在 4～ 87岁 ,平均 ( 38.2± 16 .7)岁 ,男 41例 ,女 44例。该病的潜伏期为 2～ 16d ,平均为 ( 7.4± 3 .8)d ;主要临床表现有发热 ( 97.6 %)、咳嗽 ( 81.2 %)、乏力 ( 74.1%)、头痛 ( 6 3 .5 %)、肌肉酸痛 ( 41.2 %) ;热程多为 4～ 12d( 81.9%) ,平均热程为 ( 7.8± 3.5 )d ;外周血白细胞计数正常或降低 ( 82 .4%) ,淋巴细胞计数减少 ( 2 7.1%) ;血液生化示丙氨酸转氨酶升高 ( 44 .7%) ,天门冬氨酸转氨酶升高 ( 5 7.6 %) ,乳酸脱氢酶升高 ( 49.4%) ,肌酸磷酸激酶升高 ( 2 0 %) ;肺部X线摄片主要表现为片状或斑片状炎症渗出( 85 .9%) ,少数表现为间质性炎症改变 ( 14.1%) ;炎症多位于双侧下肺 /中下肺 ( 5 1.8%) ,其次为单侧下肺 /中下肺 ( 36 .5 %) ;发病至肺炎症渗出完全吸收的平均时间为 ( 2 0 .3± 8.4)d ,热退后至肺炎症渗出完全吸收的平均时间为 ( 13 .1± 6 .9)d ;经验性治疗为 :病毒唑、对症支持治疗及应用广谱抗生素。结论　SARS具有传染性 ,发热、咳嗽、胸片示肺部炎症表现及外周血白细胞正常或降低是该综合征的临床特点。     

HBV基因型(A～F)多引物对PCR分型法的初步建立

建立一种简便易行的乙型肝炎病毒基因型分型方法 (只需ＰＣＲ)。对ＧｅｎＢａｎｋ中查获的 114例ＨＢＶ全序列进行比较分析 ,找出每种基因型相对于其他 5种基因型的独特序列 ,并根据这些独特序列设计出 6对分别针对Ａ～Ｆ基因型的特异引物。用这 6对引物分别对标本进行ＰＣＲ ,根据阳性结果判断出标本的基因型。进一步简化该方法 ,用多引物对ＰＣＲ法 (ＭｕｌｔｉｐｌｅｘＰＣＲ) :将Ｂ、Ｃ、Ｄ 3种基因型的特异引物混合进行ＰＣＲ ,并根据扩增片断的大小判断基因型。用此方法对已鉴定的Ｂ、Ｃ、Ｄ型标本进行比较与验证。结果表明 ,单引物对…     

宁夏地区乙型肝炎病毒基因型分布及D基因型的测序鉴定

为确定乙型肝炎病毒Ｄ基因型在我国的存在,建立我国ＨＢＶ Ｄ基因型的参照序列,作者用聚合酶链式反应结合限制性片段长度多态性分析技术,调查了可能存在Ｄ基因型的我国宁夏地区ＨＢＶ基因型分布。对９０例ＨＢｅＡｇ阳性ＨＢＶ感染者的血清进行前Ｓ区ＲＦＬＰ基因型分型。结果发现：Ｃ基因型８６．７％（７８／９０）‘;Ｄ基因型１０％（９／９０）无Ａ、Ｂ、Ｅ和Ｆ型不能明确分型者３．３％（３／９０）。２例ＲＦＬＰ分型为Ｄ