过表达富组氨酸糖蛋白质粒在体外抑制MHCC-97H肝癌细胞增殖

目的：检测原发性肝癌组织富组氨酸糖蛋白（HRG）的表达,及其在体外研究过表达富组氨酸糖蛋白质粒对肝癌细胞增殖能力的影响。方法采用免疫组化法检测8例肝癌组织HRG表达情况,采用Western blot法检测11例手术切除的肝癌组织和癌旁组织HRG表达的差异;在人肝癌细胞株MHCC-97H细胞中转染稳定过表达HRG质粒,使用流式细胞仪分析肝癌细胞的增殖能力。结果8例原发性肝癌组织HRG表达量较非肿瘤组织明显减少;另11例癌组织HRG表达量为（0.14±0.17）,癌旁组织HRG相对表达量为（1.39±2.08）,两者差异有统计学意义（P〈0.05）;稳定过表达HRG的人肝癌细胞株MHCC-97H细胞增殖比例为（1.72±1.19）%,显著低于对照组[（14.3±2.99）%,P〈0.01]。结论原发性肝癌癌组织HRG表达明显减少,过表达HRG的肿瘤细胞增殖能力降低。     

RFLP基因分型在动态监测乙型肝炎病毒基因变异中的应用

目的探讨基因分型结合克隆后测序方法在动态监测ＨＢＶ基因变异中的价值。方法分析１例重型肝炎患者发 病后血清,用 ＰＣＲ扩增血清中 ＨＢＶ ｐｒｅＳ／Ｓ基因片段并克隆,２份标本各随机挑取 ３个阳性克隆进行测序;同时用 ＲＦＬＰ方法分析２份血清中ＨＢＶ毒株的基因型。结果ＰＦＬＰ分析２份血清为Ｂ基因型为主的Ｂ／Ｃ基因型混合毒株感 染;６个克隆中仅１株为Ｃ基因型。比较２份血清ＨＢＶ ｐｒｅＳ／Ｓ克隆核酸序列,有１７０个点位的差异,剔除Ｃ基因型株 后,仅５４个位点差异。结论克隆后测序结合ＲＦＬＰ对ＨＢＶ基因型测定有助于更准确地对ＨＢＶ基因变异进行动态分 析。     

首例中国株乙型肝炎病毒D基因型全序列测定及分析

目的　测定并分析１例中国慢性无症状携带者感染的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｄ基因型的全基因序列。方法　用聚合 酶链式反应（ＰＣＲ）扩增ＨＢＶ全基因,将ＰＣＲ产物克隆后对其进行核酸序列分析并与已发表的ＨＢＶ毒株全序列进行 同源性比较;对 ＧｅｎＢａｎｋ中已发表的３０株ＨＢＶ Ｄ基因型毒株的全序列进行系统进化树分析。结果　该病毒全基因长 ３１８２ｂｐ,为ａｙｗ亚型,Ｄ基因型;此毒株全基因ＧｅｎＢａｎｋ　ＡｃｃｅｓｓｉｏｎＮｏ为ＡＦ２８０８１７;与ＧｅｎＢａｎｋ中已发表的ＨＢＶＤ 基因型全序列同源性为９８．３％～９４．5％,与已发表的 Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｅ、Ｆ和Ｇ基因型全序列同源性均小于８９．５％。结论　首例中 国株 ＨＢＶ Ｄ 基因型全序列与源于瑞典的四株 ＨＢＶ Ｄ 基因型全基因的进化距离最近。     

利用因特网资源进行传染病学教学

分析了当前传染病学新的发展趋势及传染病学教学中面临的“二 空”的困难,即旧的传染病缺乏临床病例及新的传染病缺乏教学资料。针对以上普遍存在的问题,介绍了我们利用因特网于传染病教学中的体会并简介了较有实用价值的有关传染病的一些网址。     

应用多重PCR法对广东地区HBV进行基因型(A-F)分型

目的建立乙型肝炎病毒(HBV)基因型(A-F)多重PCR分型方法,并利用该方法对广东地区HBV PCR阳性血清进行分型。方法将GenBank中114例HBV 全序列进行比较分析,找出每种基因型相对于其他五种基因型的独特序列,并根据这些独特序列设计出六对分别针对A-F基因型的特异引物。利用这六对引物建立HBV的多重PCR分型法。结果多重PCR与以前用PCR-限制温度长度多态型分析法的分型结果一致。对广州周边地区HBV携带者的初步分型结果显示,主要为B型和C型,分别占45.00%和38.75%,另外还有16.25%的D型。结论用多重PCR分型法准确易行,灵敏性高,便于推广应用。     

四氯化碳和醋氨酚急性肝损伤犬模型的比较

摘 要 目的：研究比较四氯化碳（CCl4）和醋氨酚（APAP）所致急性肝损伤犬模型的异同，为药物性肝炎的相关研究提供动物模型选择的实验依据。方法：24只健康杂种犬随机分为CCl4组和APAP 组（n=12）。CCl4组一次性腹腔注射50.0%（W/W）CCl4花生油溶液，0.9ml/kg体重。APAP组三次多点皮下注射600ｇ/Ｌ APAP溶液，首次剂量为750mg/kg体重，于首次注射后9ｈ和24ｈ分别再次注射，剂量为200mg/kg体重。分别观察各犬的全身情况、记录生存时间，测定血液生化指标，包括丙氨酸氨基转移酶（ALT）、丙氨酸氨基转移酶与天门冬氨酸氨基转移酶比值（AST/ALT）、血清总胆红素（TBIL）、凝血酶原时间（PT）、血氨（AMMO）、尿素氮（BUN），犬死亡时或存活15d时取肝脏组织行病理检查。结果：二组生存率比较差异无显著性意义（P>0.05）。二组血液生化指标3天内达高峰；CCl4对肝功能的影响比APAP明显（P<0.05），而APAP肾毒性较CCl4大（P<0.05）；肝炎表现CCl4组较重。肝脏病理改变CCl4较显著。肝外表现CCl4注射后迅速出现消化道和神经症状改变，其精神、饮食变化较APAP模型犬显著。结论：CCl4对犬的生存状态影响和肝脏的损害程度均高于APAP，而APAP的肾毒性较CCl4显著。     

干扰素α个体化治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎2年随访

目的 了解IFN-α个体化治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者的疗效.方法 经肝组织穿刺活检证实的HBeAg阴性CHB患者76例,给予IFN-α1b治疗,每次5 MU,每周3次.治疗结束后随访至少24个月.联合应答定义为血清ALT复常,且HBV DNA<3 loglo拷贝/mL.所有资料均行意向性分析(ITT).结果 脱落6例.疗程中位数为8.5(2～24)个月,终点疗程中位数为6.0(2～19)个月,终点疗程第75百分位数为10.0个月.治疗末时联合应答率为46.1%(35/76),随访12个月时为43.3%(33/76),随访24个月时为40.8%(31/76).随访12个月时复发率为20.0%(7/35),随访24个月时为25.7%(9/35).多变量二分类Logistic分析显示,肝组织炎性活动度较高者较易应答(偏回归系数=0.834,P=0.023,OR=2.303,95%可信区间为:1.120,4.735),而性别、年龄、肝组织纤维化程度、ALT、AST、HBV DNA载量等为非疗效影响因素.结论 IFN-α个体化治疗HBeAg阴性CHB患者有一定的持续效应.     

乙型肝炎病毒C基因启动子变异的意义

目的 了解Ｃ基因启动子区Ｔ１７５２Ａ１７６４变异对其启动子的影响。方法ＰＣＲ产物 直接测序，检测重症乙型肝炎患者乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ和Ｃ基因调节序列的Ｔ１７６２Ａ１７６４野株及变异；并将该调节序列插入到氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）表达质粒中，转染ＨepＧ２细胞并瞬时表达，比较Ｔ１７６２Ａ１７６４野株及变异株的Ｃ基因启动小区序列及ＣＡＴ表达水平。结果Ｔ１７６２Ａ１７６４变异在使ＣＡＴ表达下调中起主要     

重型乙型肝炎病人中乙型肝炎病毒C基因启动子变？…

目的 了解重型乙型肝炎（乙肝）病人血清乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ Ｃ基因启动子（ＣＰ）的变异。方法 对用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法扩增的血清ＨＢＶ ＤＮＡ直接测序。结果 ７例亚急性重型肝炎病人的ＨＢＶ分离株ＣＰ区分别有２￣１２个替代变异,１例病人有１１ｂｐ的碱基插入。ＣＰ变异主要发生于ＣＰ的第１和第２个ＡＴ丰富,ｎｔｌ７６２和ｎｔｌ７６４的替代变异见于７例亚急性重型肝炎病人的４例中,是ＣＰ变异的热点,     

T1762A1764变异对乙型肝炎病毒C启动子活性影响

目的 乙型肝炎病毒Ｃ基因调节序列存在较多变异,为探讨在诸多变异中,Ｔ１７６２Ａ１７６４变异对Ｃ区启动子活性空间起何作用。方法 用克隆及ＰＣＲ产物直接测序,检测Ｔ１７６２Ａ１７６４变异;并将含调节序列的ＰＣＲ产物插入到氯霉素乙酰转移酶表达质粒中,转染ＨｅｐＧ２细胞并瞬时表达。结果 通过比较野生株及变异株在ＣＰ区序列及ＣＡＴ表达水平显示,Ｔ１７６２Ａ１７６４变异在使ＣＡＴ表达下调中起主要作用。结论Ｔ１