人单酰基甘油脂肪酶基因的克隆表达、纯化及活性研究

目的人单酰基甘油脂肪酶(human monoacylglycerol lipase,MAGL)是一类促进脂肪分解成甘油和脂肪酸的丝氨酸水解酶,是抗肿瘤药物研发的新靶点。为了建立高通量的MAGL抑制剂筛选模型,本研究对人MAGL进行了基因克隆、体外重组表达、纯化以及活性研究。方法通过RT-PCR方法从人脑总RNA中扩增人MAGL基因,并将该基因克隆入pET28a(+)表达载体。将重组蛋白在E.coli BL21(DE3)宿主菌中通过1mmol/L IPTG诱导表达。表达产物用Ni-NTA琼脂糖亲和层析柱进行分离纯化,通过SDS-PAGE进行分析。以7-hydroxycoumarinyl arachidonate(7-HAC)为荧光底物进行酶的活性测定。结果成功扩增出人MAGL基因,并构建了pET28a-MAGL表达载体。SDS-PAGE检测结果表明重组人MAGL蛋白在宿主菌中的表达量可达菌体总蛋白量的25%,经Ni-NTA琼脂糖亲和层析柱分离纯化后的重组蛋白纯度大于90%,其比活力达到7900IU/mg,,较纯化前提高了23倍。酶活性分析结果证明重组表达并纯化的蛋白具有单酰基甘油脂肪酶活性,另外,利用已知的MAGL抑制剂N-arachidonylmaleimide(NAM)对该酶表现出强的抑制活性,IC50值为0.53μmol/L。结论本研究成功利用大肠埃希菌原核表达体系重组表达并纯化了人单酰基甘油脂肪酶,为建立以MAGL为靶点的抗肿瘤药物筛选模型奠定了基础。     

叶酸片治疗H型高血压的效果研究

目的探讨研究叶酸片对于治疗H型高血压的临床效果。方法回顾性分析100例于2012年7月至2013年7月来我院诊疗的H型高血压患者的临床资料,平均分为对照组50例和观察组50例两组,其中对照组采取给依那普利片进行治疗的模式,观察组采取给叶酸片进行治疗的模式,其余护理程序如查房随访、健康教育等都相同,然后整理分析其临床表现,并在3个月后进行随访,在两组患者一般特征相似的前提下,观察两组患者血浆中同型半胱氨酸(HCY)水平的变化和随访期间心脑血管事件发病情况。结果对照组与观察组一般特征的比较。两组患者在性别、年龄、病程、体质量指数、血压、血糖和生活习惯方面无明显差异;对照组与观察组治疗前后血浆中同型半胱氨酸(HCY)水平的变化,显示采用叶酸片治疗的观察组患者治疗3个月后其血浆中的同型半胱氨酸(HCY)水平变化要优于采用依那普片治疗的对照组患者。治疗前差异P<0.05,治疗后差异P<0.05,有统计学意义。而在收缩压和舒张压的显示上,其治疗效果也是观察组优于对照组,血压值恢复情况较好,P<0.05;对照组与观察组治疗随访心脑血管时间发生率对比,随访时间为3个月,心脑血管时间发生率为总人数的27.8%,心脑血管时间发生率为总人数的9.8%。观察组患者治疗后的随访表示其心脑血管事件发生率小于对照组,两组间有统计学差异,P<0.05。有统计学意义。结论利用叶酸片治疗H型高血压可以显著降低H型高血压患者血浆中同型半胱氨酸(HCY)水平,从而起到缓解并调整血压的作用,临床治疗效果明显,同时对于患者心脑血管疾病的发生也有很好的预防效果。     

腰椎间盘突出症再次手术诊治体会

目的:总结腰椎间盘再次手术诊治的临床经验。方法:1998年来,对50例腰椎间盘术后腰腿痛复发患者进行了再次手术,对其临床资料进行回顾性分析。结果:50例患者共61个节段进行了再次手术,术后随访3～50个月,术后优良率为82%。结论:医源性因素是腰椎间盘手术失败的重要原因。通过完善的术前检查和恰当的手术技巧,腰椎间盘突出症再次手术可望获得良好的疗效。     

反相离子对高效液相色谱法分离甲磺酸加贝酯有关物质及其含量测定

建立蛋白酶抑制剂甲磺酸加贝酯原料药的有关物质分离检测及其含量测定方法。采用反相离子对色谱法,色谱柱为ODS柱;流动相为乙腈 辛烷磺酸钠缓冲液(pH 值 3.5)(40∶60),流速为1.0 ml/min;含量检测波长为236 nm,有关物质检测波长为258 nm。以此建立的色谱方法使有关物质与主药分离良好,甲磺酸加贝酯在12.5~125.0μg/ml内线性关系良好,平均回收率为99.75%,RSD为0.6%。方法简便、准确,可用于甲磺酸加贝酯有关物质的检查及含量测定。     

微创开髓及其牙体的应力分析的研究进展

微创开髓(conservative endodontic access cavity,CEC)是微创根管治疗术的第一步,经CEC治疗后的患牙较大程度保留了牙尖嵴和颈周牙本质等牙体硬组织,对于减少患牙的牙体流失及增强远期疗效具有重要意义。CEC存在多种入路方式及相应的洞型。确定髓腔入路的方法包括X线片定位法、显微CT/锥形束CT定位法以及数字化导板定位法。其中,X线片、显微CT/锥形束CT定位法操作简便,临床较为常用;而较为复杂的根管系统,利用数字化导板可建立更精准的开髓通路,减少牙体硬组织不必要的丧失,但数字化导板定位价格较高,临床上并未得到广泛的应用。CEC的洞型包括微创开髓洞型、超保守微创开髓洞型、"Truss"洞型以及切端洞型。CEC洞型与传统开髓洞型的应力分析目前以万能力学试验机加载离体牙、有限元分析法及临床观察为主,大多数学者的研究显示保留较多牙体组织的CEC可提高牙齿的抗折强度,但二者之间的抗折能力仍存在争议,在达到牙髓治疗目的与最大限度保留牙体结构之间如何达到平衡,仍需进一步的探索。     

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目的 分析国产排龈线对冠桥修复后牙体、牙龈、牙周组织、修复体边缘的适合性。方法 选择2006年1月至2008年12月南阳市口腔医院收治的因前牙缺损或缺失做冠桥修复的患者52例（109颗基牙）,随机分为3组,进行常规牙体预备。阴性对照组32颗牙,不排龈;阳性对照组37颗牙,备牙后采用美国进口的UltraPak排龈线排龈;试验组40颗牙,采用南阳齿康研究所研制的国产排龈线排龈。完成灌注印模后,通过肉眼及探针对牙预备体、牙龈和修复体模型进行评价。结果 采用国产排龈线、进口排龈线和未采用排龈技术的满意率：牙预备体分别为93%、95%、17%;牙龈分别为83%、76%、14%;模型分别为80%、81%、14%;修复体边缘分别为88%、86%、12%。国产排龈线和进口排龈线满意率相当。结论 国产排龈线与进口排龈线临床应用对比差异无统计学意义,可以替代进口排龈线,且成本低,副反应小,安全性能好。     

冠外固位体义齿基牙牙周组织应力分布的三维有限元分析

目的研究下颌第一磨牙缺失、第二磨牙近中倾斜30°或45°时,用栓道附着体义齿或套筒冠义齿2种冠外固位体(extra-coronal retainer,ECR)义齿修复的基牙牙周组织应力分布。方法采用CT扫描技术和Mimics、Freeform、ANSYS软件,建立下颌第一磨牙缺失、第二磨牙近中倾斜30°或45°及ECR义齿修复后的三维有限元模型,模拟加载并计算分析基牙牙周组织应力的分布情况。结果下颌第二磨牙近中倾斜30°、45°模型,修复前第二前磨牙Von Mises应力分别是2.80 MPa、3.47 MPa,栓道附着体义齿修复后分别是19.26 MPa、25.18 MPa,套筒冠义齿修复后分别是19.47 MPa、24.48 MPa,ECR义齿修复后下颌第二前磨牙牙周组织应力明显增大;修复前第二磨牙Von Mises应力分别是20.45 MPa、20.50 MPa,栓道附着体义齿修复后分别是15.02 MPa、11.84 MPa,套筒冠义齿修复后分别是18.04 MPa、12.18 MPa,ECR义齿修复后下颌第二磨牙牙周组织应力明显减小。结论栓道附着体义齿和套筒冠义齿均能改善倾斜基牙牙周组织的应力分布,当下颌第二磨牙近中倾斜角度过大或下颌第二前磨牙牙周状况欠佳时,应该考虑增加近中端基牙数目。     

Contemporary treatments and outcomes of preterm infants with critical congenital heart disease in a tertiary cardiovascular institute in China

Background The survival rate of preterm infants with critical congenital heart disease(P-CCHD) has been improved by medicine advances. The aims of this study were to investigate the contemporary treatments for shortterm outcomes of P-CCHD and to evaluate risk factors associated with the outcomes. Methods Sixty-four PCCHD patients admitted to Guangdong General Hospital between 2011 and 2015 were included in this study. Demographic characteristics and patient records were reviewed. Logistic regression was used to analyze the risk factors of P-CCHD outcome. Results Thirty-six patients underwent surgical treatments for cardiac anomalies.Moreover, 31.25% of the P-CCHD infants did not receive surgery because these parents refused further treatment. The in-hospital mortality rate was 8.3% for the patients who underwent surgeries. During a median followup of 1.2 years, the survivors were basically healthy. However, mental and physical growth retardation remained.Conclusions Compared to infants in developed Western countries, the treatments and short-term outcomes of P-CCHD infants were satisfactory. However, the long-term outcomes remain to be determined.     

晚期肿瘤患者安宁护理实施对策研究

目的:研究晚期肿瘤患者安宁护理实施对策.方法:选择2015年8月至2016年9月于我院就诊的晚期肿瘤病患110例,所有病患均按照随机数表分为两组,即研究组与参考组,各组均包含55例.两组病患均需进行常规护理干预,研究组病患则在以上基础上配合针对性安宁护理干预,统计各组病患的护理情况,对所有病患发放护理满意度调查问卷(均发放问卷55份,回收问卷55份,回收率为100%),统计两组病患的护理满意情况,并计算与对比两组病患的护理满意率进行对比.结果:根据本次调查研究结果显示,研究组病患的整体满意率要显著大于参考组病患,以上组间数据对比差异显著,具有统计学意义(P<0.05);结论:相对于一般护理流程,开展针对性护理干预干预后,病患的整体护理满意度得到显著提升,值得临床推广与应用.     

低分子肝素治疗弥散性血管内凝血产妇的效果及安全性

目的探讨不同肝素治疗弥散性血管内凝血(DIC)产妇的应用效果及安全性。方法选取2016年1-12月在该院进行治疗的90例DIC产妇为研究对象,随机分为观察组和对照组,各45例。观察组给予低分子肝素治疗,对照组给予普通肝素治疗。观察两组患者的临床效果、DIC评分、各项指标、平均出血量、ICU入住时间及不良反应发生情况。结果观察组产妇治疗总有效率(93.33%)较对照组产妇(77.78%)高(P0.05);治疗后,两组产妇DIC评分均有降低,观察组产妇DIC评分(4.17±0.22分)明显低于对照组产妇(5.03±0.29分)(P0.05);治疗后,两组产妇治疗前血浆凝血酶原时间(PT)、凝血酶原时间(APTT)、D-二聚体(D-D)有所下降,纤维蛋白原(FIB)、血小板(PLT)有上升,其中观察组产妇PT、APTT、D-D(16.86±2.54 s、48.54±7.85 s、0.56±0.20 mg/L)低于对照组产妇(28.15±3.17 s、54.72±9.46 s、2.01±0.19 mg/L),FIB、PLT(3.21±0.69 g/L、107.85±29.04 g/L)高于对照组产妇(1.39±0.25 g/L、87.43±40.52 g/L)(P0.05);观察组产妇的平均出血量、ICU入住时间及不良反应发生率(2 877.64±897.46 ml、18.01±5.34 d、2.22%)均少于对照组产妇(6 115.27±1 632.51、25.73±7.42 d、13.33%)(P0.05)。结论应用小剂量肝素治疗DIC产妇的临床效果显著,安全性高,优于应用常规剂量肝素治疗。