急性肝损伤动物模型的研究动态

正肝损伤是多种因素引起的肝脏损害,表现为肝脏合成、解毒、排泄和生物转化等功能障碍,严重时可出现肝功能衰竭(简称肝衰竭)。构建恰当的肝损伤动物模型,是研究肝损伤的发病机制,探索新的治疗方法的基础。Terblanche和Hickman[1]曾提出了理想肝衰竭动物模型的标准,即可逆性、可重复性、死     

非酒精性脂肪性肝病与胆红素：关系, 机制和治疗前景

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是多种因素所致的以肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的代谢相关性疾病。近年随着西式饮食和肥胖的流行, NAFLD的发病率也在逐渐提高, 成为日益严重的公共健康问题。胆红素是血红素的代谢产物, 是一种有效的抗氧化剂。研究发现胆红素水平与NAFLD的发病率呈负相关, 但具体是哪种形式的胆红素在起主要保护作用目前尚有争议。胆红素的抗氧化性、降低胰岛素抵抗以及诱导线粒体功能等特性, 被认为是其在NAFLD中起保护作用的原因。现总结NAFLD与胆红素的相关性、胆红素在NAFLD中起保护作用的机制, 以及胆红素在治疗NAFLD中可能的临床应用。     

肝衰竭患者体外灌流血浆对C3A细胞生物转化功能影响的研究

C3A细胞是培养于体外人工肝支持装置(ELAD)系统的细胞株,来源于人肝肿瘤细胞,是克隆化的建株细胞株,其最大特点是来源稳定,能在短时间内大量培养增殖,因此可以满足生物型人工肝装置对肝细胞数量上的需求;此外,该细胞在培养中不需要培养载体,并具有一些肝细胞的特异功能.     

乙型肝炎病毒动物模型研究现状

乙型肝炎(乙肝)动物模型有助于乙肝发病机制及防治方面的研究。本文就乙肝动物模型研究现状,如人乙肝病毒(HBV)动物模型和其他嗜肝HBV动物模型等作了综述。     

端粒酶逆转录酶小干扰RNA对肝癌细胞的体外抑制作用

目的 研究靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)的小干扰RNA(siRNA)在肝癌细胞SMMC-7721中抗肿瘤作用。方法 针对hTERT基因编码区及非编码区，采用T7转录系统在体外合成了2条siRNA，转染SMMC-7721细胞。以四甲基偶氮唑盐试验、逆转录聚合酶链反应及western blot观察其对SMMC-7721细胞增殖、hTERT mRNA及蛋白表达的影响。结果 2条siRNA以剂量依赖性方式抑制了SMMC-772l细胞增殖，当给药浓度为100nmol／L时，对hTERT mRNA及蛋白表达有明显的抑制作用。结论 靶向hTERT的siRNA对hTERT基因表达有抑制效果，有可能发展为一种新的抗肿瘤药物。     

Smad3 shRNA抑制TGFβ1对HSC-T6细胞活化的抗肝纤维化作用

目的观察Smad3 shRNA对TGFβ1作用于大鼠HSC-T6细胞增殖、细胞周期以及分泌肝纤维化胶原的影响。方法Smad3 shRNA慢病毒感染HSC-T6,应用流式细胞仪检测其感染率,Real-time PCR检测对Smad3 mRNA表达的抑制作用;将HSC-T6对照、HSC-T6+TGFβ1(10 ng/ml)、Smad3 shRNA以及Smad3 shRNA+TGFβ1(10 ng/ml)这4组细胞进行如下检测:(1)MTT检测细胞增殖;(2)流式细胞仪检测TGFβ1作用24、36 h细胞周期分布;(3)Real-time PCR检测24、36 h时细胞周期、增殖及肝纤维化相关基因mRNA的表达变化;(4)ELISA检测24、36 h培养液上清中胶原蛋白(COL)Ⅰ、COLⅢ及α-SMA的含量。结果Smad3 shRNA慢病毒感染HSC-T6细胞至96 h,感染率为71.3%,对Smad3 mRNA的表达抑制率为50%。(1)MTT结果显示,TGFβ1促进HSC-T6增殖;与相应未感染Smad3 shRNA病毒组相比,Smad3 shRNA组以及Smad3 shRNA+TGFβ1组细胞增殖能力均下降。(2)细胞周期检测发现,24、36 h时,Smad3 shRNA+TGFβ1组与Smad3 shRNA组相比,细胞周期分布差异无统计学意义(P>0.05);(3)Real-time PCR显示,Smad3 shRNA+TGFβ1组较HSC-T6+TGFβ1组,Smad3、原癌基因(c-myc)、细胞周期依赖性激酶-2(CDK-2)、细胞周期素E(cyclin E)、表皮生长因子(EGF)、核因子-κB(NF-κB)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、COLⅠ及基质金属蛋白酶(MMP)14等基因的mRNA在24、36 h表达均下调,HGF mRNA及COLⅢmRNA在24 h时上调、36 h时下调,Bcl-2 mRNA、MMP1 mRNA及MMP9 mRNA在24 h和36 h两个时段均表达上调。(4)ELISA检测发现,同一时间点比较,分别在24、36 h,TGFβ1可促进HSC-T6细胞COLⅠ(P=0.00,P=0.02)、α-SMA(P=0.00,P=0.01)的分泌;与HSC-T6+TGFβ1组相比,Smad3 shRNA+TGFβ1组COLⅠ于36 h分泌减少(P=0.00)、而α-SMA在24、36 h两个时间点分泌减少(P=0.00)。结论 Smad3 shRNA抑制了TGFβ1对HSC-T6的活化,显示了抗肝纤维化作用。     

miRNA在肝病中作用的研究进展

<正>1993年,Lee等[1]在线虫中发现第一个miRNA-lin-4。在转录水平,miRNA通过与靶基因mRNA的3'UTR结合,抑制mRNA的翻译或者促进其降解,从而影响基因的表达[2]。虽然miRNA基因数量仅占人类基因组序列的1%~3%,却参与了1/3基因表达的调控,在机体生长发育、细胞分化、增殖、凋亡以及肿瘤发生等各种生理病理过程中发挥重要作用[3]。MiRNA的表达失调广泛存在于乙型肝炎病毒感染及多种恶性     

核苷和核苷酸类药物治疗慢性乙型肝炎过程中耐药突变株动态演变特征的研究进展

核苷和核苷酸类药物长期单药抗HBV治疗过程中易导致病毒发生耐药突变,可能与慢性乙型肝炎的重症化和原发性肝癌的发生相关,是目前研究热点之一。深入理解耐药变异株在长期抗病毒治疗中的演变特征,在基因型耐药发生至病毒学突破发生的时间间隔内,选择适用于临床耐药的监测方法,动态监测耐药株在准种池中的比例变化,及时更改治疗方案,对慢性乙型肝炎的优化治疗有重要的指导意义,同时也有助于研发高效的抗病毒药物。     

N-乙酰半胱氨酸对C3A永生化肝细胞解毒代谢功能的影响

目的:研究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对慢性重型肝炎肝衰竭时肝细胞解毒代谢功能的影响,并比较NAC与还原型谷胱甘肽(GSH)的疗效.方法:体外慢性重型肝炎患者血浆(chronic severe hepatitis plasma,CSHP)培养C3A细胞,并同时分别加入大、中、小三个剂量NAC及对应剂量的GSH,以正常血浆(normal human plasma,NHP)及培养基(100 mL/L FBS-MEM)为对照,分别于24、48、72h 3个时间点检测细胞内GSH及脂质过氧化物(MDA)的含量,并检测安定代谢量的变化.结果:24、48、72h 3个时间点.培养基组、正常血浆组、各剂量NAC治疗组和GSH治疗组C3A细胞中GSH含量与安定代谢量均分别高于慢性重型肝炎血浆组(GSH:F=246.116,235.489,201.536,均P＜0.01;安定代谢量:F=306.812,476.722,502.061,均P＜0.01),而慢性重型肝炎血浆组C3A细胞中MDA含量均分别高于上述各组(F=332.48,662.349,492.983,均P＜0.01).慢性重型肝炎血浆+NAC组与慢性重型肝炎血浆+GSH组比较,前者细胞内的GSH含量和对安定的代谢量,大、中、小剂量组均分别高于后者对应剂量组(P＜0.01),而前者细胞内的MDA含量,大、中、小剂量组均分别低于后者对应剂量组(P＜0.01).结论:NAC可以显著改善慢性重型肝炎肝衰竭时肝细胞解毒代谢功能,GSH也有相似功效,且相同摩尔剂量的NAC效果要优于GSH.     

乙型肝炎病毒动物模型研究现状

乙型肝炎（乙肝）动物模型有助于乙肝发病机制及防治方面的研究。本文就乙肝动物模型研究现状，如人乙肝病毒（HBV）动物模型和其他嗜肝HBV动物模型等作了综述。