基于PLGA纳米粒的SARS-CoV-2 DNA疫苗的制备及初步评价

本研究构建并优化编码新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)刺突(spike protein, S)蛋白基因序列的质粒DNA (plasmid DNA, pDNA) Opt-S,以聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA]纳米粒(nanoparticles, NPs)作为pDNA的递送载体,采用纳米沉淀法制备PLGApDNA NPs,对其体外性质进行初步评价。结果表明所制备的PLGA-pDNA NPs形态规整,边缘清晰,平均粒径为(184.2±2.4) nm,多分散系数(polydisperse index, PDI)为0.093±0.013, zeta电位为(-68.10±0.36) mV,包封率为(98.92±0.22)%,于-20℃储存7个月粒径和PDI变化幅度均较小,稳定性较好,能保护pDNA免受核酸酶降解,并具有一定的缓释效果,细胞毒性低,安全性高,体外转染实验表明SARS-CoV-2 S基因可以进入细胞并表达。以上结果表明PLG...     

高效液相色谱法测定盐酸异丙嗪咖啡因片的含量及溶出度

目的 建立测定盐酸异丙嗪咖啡因片的含量及溶出度的高效液相色谱法.方法 色谱柱:Agilent TC C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-三乙胺水溶液(浓度为3‰,磷酸调至pH2.3)=(50:50);流速:1.0 ml/min;检测波长分别为250和272 nm;柱温:30℃;进样量20μl(溶出度测定时进样量为10 μl).溶出条件采用桨法,温度为37℃,分别以900 ml pH1.2盐酸、pH 4.5醋酸缓冲液、pH 6.8磷酸缓冲液及水为溶出介质,以50、75 r/min作为转速进行溶出条件的筛选.结果 该HPLC检测方法专属性良好;盐酸异丙嗪、咖啡因分别在0.5 ～ 100 μg/ml和4.0 ～ 400 μg/ml范围内线性关系良好,线性回归方程分别为Y=96.21X-7.303(r=1)、Y=51.33X +68.88(r=0.9999);盐酸异丙嗪检测限为15 ng/ml,定量限为40 ng/ml;咖啡因检测限为2 ng/ml,定量限为10 ng/ml.平均回收率分别为盐酸异丙嗪(100.04±1.39)％(n=9),咖啡因(99.42±1.07)％(n=9);供试溶液在12h保持稳定.确立了以900 mlpH 1.2盐酸为溶出介质,桨法转速为50 r/min的溶出方法,溶出时间30 min.制剂在4种溶出介质中溶出度均在15 min内达85％以上,其溶出不受体液pH影响.结论 所选溶出条件适用于盐酸异丙嗪咖啡因片的溶出测定.所建含量及溶出度检测方法简便、快速、灵敏,精密度高,重现性好,结果准确,适合同时对盐酸异丙嗪及咖啡因进行含量及溶出度分析.     

长期应用氨茶碱治愈非阵发性交界性心动过速1例

１病例摘要男性,７４岁。因反复心悸、胸闷７ａ住院。心电图示：交界性心律,非阵发性交界性心动过速。体检：ＢＰ１９／１１ｋＰａ,心界无扩大,心率７２次／ｍｉｎ,律齐,Ａ２＞Ｐ２,各瓣膜区未闻及病理性杂音。动态心电图示窦性停搏伴交界性逸搏,窦房结恢复时间延...     

巴戟天水提物对慢性应激诱导的大鼠抑郁样行为的改善作用和机制研究

目的 探究巴戟天水提物的抗抑郁效果及作用机制。方法 SD大鼠36只,随机分成空白组、模型组、阳性药盐酸氟西汀组、巴戟天水提物低、中、高3个剂量组。采用慢性不可预知性应激方法造模并给药28 d,通过行为学评价巴戟天水提物的抗抑郁效果,苏木精-伊红染色法（HE）观察大鼠海马神经细胞的形态,免疫组化检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体和小胶质细胞活化标志物离子化钙结合适配分子1(Iba-1)的表达水平,Western印迹检测脑源性神经营养因子（BDNF）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、糖原合酶激酶3β(GSK3β)蛋白表达水平。结果 给药组较模型组糖水偏好率明显增加（P<0.01）,强迫游泳的不动时间显著缩短（P<0.05）;大鼠海马CA3区神经元形态有所改善;NLRP3炎症小体和小胶质细胞Iba-1蛋白表达减少;BDNF、PI3K及其磷酸化（p-PI3K）蛋白、Akt及其磷酸化（p-Akt）蛋白表达增加,GSK3β及其磷酸化（p-GSK3β）蛋白表达减少。结论 巴戟天水提物可改善慢性刺激诱导的大鼠抑郁样行为,其作用机制可能是通过改...     

壳聚糖修饰的载胰岛素聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的生物黏附性及毒性评价

 目的 探讨壳聚糖修饰的聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）纳米粒的生物黏附性,阐明其促吸收机制,并考察纳米粒的细胞毒性以评价其安全性。方法 以胰岛素为模型药物,采用FITC标记胰岛素,复乳法制备普通PLGA纳米粒,壳聚糖包裹制备生物黏附性PLGA纳米粒。粒度及表面电位分析仪测量纳米粒的粒径及Zeta 电位,超速离心法测定载药纳米粒的包封率,通过测定胃肠道中胰岛素的总量评价纳米粒的生物黏附性,并采用MTT法评价PLGA纳米粒的细胞毒作用。结果 纳米粒粒径均一,PLGA普通纳米粒及生物黏附性纳米粒的平均粒径分别为（124.7±11）和（136.6±13）nm,粒径差别不大,但壳聚糖包衣显著地增强了纳米粒的正电性,使得Zeta电位由负值（-1.67±0.05） mV逆转为正值（42.6±0.3）mV,并且提高了药物的包封率,由（46.67±1.82）%增至（52.73±2.96）%。生物黏附性纳米粒口服后胃肠道中胰岛素的总量显著高于普通纳米粒,3 h达到1.31倍。MTT法显示生物黏附性PLGA纳米粒及普通PLGA纳米粒在所考察的剂量范围内（≤25 mg·mL-1）,均对细胞无特殊毒性。结论 壳聚糖修饰的PLGA生物黏附性纳米粒是蛋白多肽类药物口服给药的良好载体。     

光学显微镜下非糜烂性反流病食管远端上皮细胞间隙的变化

目的通过光学显微镜(简称光镜)对非糜烂性反流病(NERD)患者食管鳞状上皮细胞间隙增宽(DIS)进行研究,探讨食管鳞状上皮细胞间隙的变化情况及意义。方法 NERD患者(25例,NERD组)和正常对照者(20例,正常对照组)作为研究对象行胃镜检查,并在食管远端齿状线上方2 cm处取一块黏膜组织,常规HE染色,在光镜下观察上皮细胞间隙情况并采集图像进行测量。结果 NERD组食管鳞状上皮细胞的平均细胞间隙、最小细胞间隙、最大细胞间隙均大于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论光镜测量可作为研究NERD食管鳞状上皮细胞间隙增宽的一种简单、实用方法 ,对探讨细胞间隙增宽在NERD发病机制和临床诊断中的意义具有重要作用。     

妊娠期妇女血清瘦素水平的观察

瘦素是肥胖基因的蛋白产物,由脂肪细胞合成及分泌,它通过抑制食欲减少能量摄取,增加能量消耗抑制脂肪合成等途径来减少肌体的脂肪沉积[1].近年来国外研究人员发现瘦素与动物和人类的生育能力及妊娠并发症有关[2],推测其可能是一种与生殖活动密切相关的激素,而且证实除脂肪细胞外,胎盘也能合成和分泌瘦索[3]对女性的生殖构成明显的影响.为此我们特测定了125例普通妊娠妇女和32例妊高症妇女的血清瘦素水平进行相关分析,现报道如下.