microRNA与血液系统肿瘤的研究进展

微小RNA(m icroRNAs,m iRNAs)是一类22个核苷酸左右的非编码调控RNAs,它可以通过切割mRNA或者是抑制翻译两种机制,在转录后水平发挥调控动植物生长发育的重要作用。最近,大量有关文献证实,哺乳动物中m iRNAs可能调控了大量的靶基因,从而影响多种生物学功能。许多从小鼠骨髓细胞中克隆而来的m iRNAs,在各种造血细胞系中受到不同的调控,而其中一些m iRNAs与白血病等造血系统恶性肿瘤有关。     

shRNA表达载体的构建及对HBV复制和表达的抑制

目的:构建shRNA的表达载体,检测针对乙型肝炎病毒(HBV)的shRNA的稳定表达质粒对HBV复制和表达的影响。方法:扩增U6启动子构建shRNA表达载体pU6。针对HBV基因组序列设计并化学合成双链核苷酸克隆到pU6载体得到质粒pU6B/HBVi,脂质体介导转染带有HBV基因组的2.2.15细胞,定量PCR和ELISA法检测pU6B/HBVi对HBV复制和表达的影响。结果:成功构建了shRNA的真核表达载体;针对HBV的pU6B/HBVi质粒对HBV的复制和表达有明显的抑制作用。结论:稳定表达shRNA的pU6B/HBVi质粒可以抑制HBV在2.2.15细胞中的复制和表达。     

发酵条件对毕赤酵母工程菌产rhBSP的影响

Pichia pastrois酵母工程菌GSll5／pPICZaA—hbsp能分泌表达重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)。本文通过其发酵条件的研究，找出摇瓶发酵表达rhBSP的最适条件。以BMGY作为种子培养基，菌体密度A500达到9时，重悬于1／5体积的BMMY培养基中，A500达到45，pH值6．0，2％甲醇诱导4d，rhBSP产量达高峰期，最大表达量为0．255g/L。     

HSV-2的生物信息学分析及其Oligo探针设计

目的设计单纯疱疹病毒2型（HSV-2）诊断芯片的Oligo探针。方法利用BLAST软件对HSV-2的DNA序列进行序列比对,得到有意义的特异序列;用生物学软件Olig06．0设计特异性高、Tm值相近、长度均一的Oligo探针。结果获得13条60-mer Oligo探针。结论利用BLAST系统和生物学软件Olig06.0设计HSV-2诊断芯片的探针,可为后期打印成DNA芯片,用于HSV-2的检测打下基础。     

利用基因表达谱提取乳腺癌细胞分化相关特征基因

目的利用基因芯片数据挖掘识别与乳腺癌组织学分级相关的特征基因,对乳腺癌的临床诊断和生物医学研究起到借鉴和参考作用。方法从公共基因芯片数据库GEO（gene expression omnibus）获得乳腺癌芯片表达数据,利用支持向量机提取获得不同组织学分级的肿瘤样本的特征基因,并对这些基因进行生物学功能分析。结果获得了64个特征基因,分类正确率达到100％,这些基因与癌症有较大的相关性,主要集中在转录调控、离子运输、器官发生发育等多个生物学途径中。结论通过对基因芯片数据的挖掘,可以从全局上了解肿瘤的表达情况,加深对乳腺癌细胞分化分子机制的认识。     

结直肠癌组织特异性治疗靶点的生物信息学筛选

目的 预测与筛选结直肠癌组织特异性基因,作为靶向治疗的候选靶点.方法 利用自主开发的Python语言程序分析人类正常组织与结直肠癌组织mRNA表达的组织特异性,结合人类胚胎干细胞富集基因集以及文献挖掘结果,筛选可能的与结直肠癌发生或发展相关的基因作为候选靶点,并对其进行通路分析及基因富集分析.结果 获得了结直肠癌组织特...     

用多重PCR快速检测登革病毒并分型

目的　建立一种多重聚合酶链反应 (PCR)方法 ,对不同型别登革病毒进行快速检测及分型。方法　采用 4种型别登革病毒通用的外侧引物进行逆转录PCR(RT PCR)反应 ,继用 4对 (5种 )型特异引物在单管内进行巢式PCR ,依据扩增产物的片段大小进行分型。结果　采用多重PCR ,扩增出 4 82、119、2 90及 392bp的特异片段 ,分别代表登革病毒 1～ 4型。结论　该方法快速、敏感、特异 ,有一定的推广应用价值。     

丙型肝炎病毒1b亚型诊断芯片的制备与实验室研究

目的建立一种简单有效的制备、筛选丙型肝炎病毒(HCV)1b亚型cDNA基因芯片探针的技术。方法应用cDNA文库法制备芯片探针，限制性内切酶Sau3AI消化HCV-1b全长cDNA。所得的酶切片段在72℃补平加单个碱基A，然后与pMD18-T载体连接，AT克隆，用载体引物进行PCR初步鉴定，并测序。将筛选出的片段打印在氨基修饰的玻片上制备成cDNA芯片并进行杂交验证分析。样品标记采用限制性显示PCR(Restriction Display PCR RD—PCR)技术。结果应用cDNA文库法，共得到22大小相对一致(250—750bp)的基因片段，序列分析表明，均属于HCV—1b基因，可以作为诊断芯片探针；芯片杂交结果显示，样品和诊断基因芯片杂交的敏感性和特异性均佳。结论用cDNA文库法收集片段是一种快速、简便制备芯片探针的实用方法；制备的诊断芯片可以用于检测HCV-1b RNA，具有敏感、检测结果较为可靠的优点。     

mTn-3xHA/lacZ文库质粒的筛选与鉴定

目的：从pHS6-mTn-3xHA／lacZ质粒文库中筛选出能高水平表达lacZ基因的质粒载体。方法：文库质粒转化大肠杆菌，挑单克隆，提质粒约200个，NotI酶切，分别转化酿酒酵母，通过URA3和lacZ的表达筛选出能发生同源重组，并能高水平表达lacZ的质粒载体。结果：200个质粒分别转化酿酒酵母，通过SC-URA筛选出11株能发生同源重组的重组子，再通过lacZ显色反应，筛选出两株有lacZ基因表达的菌株，其中一株能高水平表达β-gal，另一株有较弱表达。结论：筛选出的质粒载体为其它外源基因在酿酒酵母中稳定高效表达奠定基础。     

基于以太网的虚拟生物医疗仪器系统的研究

介绍基于目前嵌入式生物医疗仪器和虚拟仪器技术(Ⅵ)的发展基础上,提出了虚拟式生物医疗仪器的以太网络设计的思想,目的就是在于利用虚拟仪器的概念来解决和弥补当前昂贵的传统生物医疗仪器方面不足,并以此来寻求一种适合商业化和网络发展新的医疗仪器理念,从而为生物医疗仪器领域的发展提供服务和指导.