模拟演训软件在军事检验医学一体化教学中的尝试

军事检验医学学科的形成是伴随着医学检验技术的发展及部队在野外条件下对医学检验的特殊需要而产生的。军事检验医学既是军事医学的组成部分,又是检验学的重要研究和应用领域,是军事医学和检验医学相互交叉融合产生的一门新     

严重颅脑损伤脑组织匀浆诱导人脐血MSCs成神经分化的实验研究

目的 探讨严重颅脑损伤时的脑组织匀浆对人脐血间充质干细胞(MSCs)成神经分化的诱导能力.方法 制作小鼠严重颅脑损伤模型,取伤后24 h和正常小鼠脑组织匀浆,对体外培养的第2代MSCs进行诱导.诱导3 d后以荧光免疫细胞组化技术检测细胞内NF和NeuN的表达.结果 成功培养出人脐血MSCs,成神经诱导后,严重损伤性脑组织匀浆诱导组NF和NeuN阳性率分别为(47.31±8.14)%和(58.91±8.12)%,高于正常脑组织匀浆诱导组阳性率(P<0.05).结论 脑组织匀浆可诱导人脐血MSCs向神经元样细胞分化,表达神经细胞特异标志分子NF和NeuN,严重损伤性脑组织匀浆的诱导效果高于正常脑组织匀浆.     

氨基硅烷化超顺磁纳米颗粒的制备及其在小鼠体内的分布

目的:制备氨基硅烷化的超顺磁纳米颗粒(superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPION),并检测其物理性质以及在小鼠体内的自然分布,从而探讨该系统在小鼠体内分布的规律.材料和方法:共沉淀一步法制备葡聚糖外包的四氧化三铁纳米颗粒,然后在通氮、60℃、强力机械搅拌的条件下加入AEAPS,得到氨基硅烷化的SPION.采用透射电镜测量其大小及分布,用气相色谱法检测AEAPS与葡聚糖-SPION的结合率,用原子吸收分光光度计研究其在小鼠体内的分布情况.结果:所得样品核心为四氧化三铁晶体,核心粒径不超过25nm,氨基硅烷化超顺磁性纳米颗粒直径不超过30nm,AEAPS与葡聚糖-SPION的结合率为91.15%,自然状态下经尾静脉给药后氨基硅烷化超顺磁性纳米颗粒主要被肝脏和脾脏摄取,但不被肾脏摄取.结论:制备的样品具有粒径小,分散性好,超顺磁性等优点,同时可以经血液循环系统到达肝脏、脾脏、心脏、肺.     

基于三维刚性DNA桥式纳米探针的DNA甲基化光电化学传感器的制备和效果评价

目的 构建一种基于三维刚性DNA桥式纳米探针(3D-TPN)的光电化学(photoelectro-chemistry,PEC)传感器,用于DNA甲基化位点分析研究.方法 将二氧化钛(TiO2)悬浮液滴加到ITO电极表面,形成薄膜,通过电位溶出法在TiO2纳米膜表面沉积金纳米粒子(AuNPs),进一步通过Au-S将三维刚...     

体内输注CD4+CD25+调节性T细胞对MRL/lps小鼠肾脏损伤的影响

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞（Treg细胞）对MRL/lps小鼠病情进展的影响。方法 实验小鼠分为实验组1、实验组2、对照组共3组,每组8只。采用磁珠分选法分选出MRL/lps小鼠及近交系BALB/c小鼠脾脏中的Treg细胞,浓缩后分别输注入实验组MRL/lps小鼠体内,空白组输注等体积生理氯化钠溶液,3周后测量小鼠尿蛋白、抗-dsDNA抗体的含量,并取肾脏行组织病理及免疫病理检查,比较结果。结果 输注MRL/lps小鼠Treg细胞的实验组1,尿蛋白评分显著低于输注正常小鼠Treg细胞组（实验组2）及对照组,分别为10.63 ± 4.17、20.00 ± 5.35、18.75 ± 8.34;P < 0.05。抗-dsDNA抗体的含量显著低于实验组2及对照组,分别为（5.36 ± 2.40） pg/ml、（9.57 ± 1.97） pg/ml、（10.75 ± 3.98） pg/ml;P < 0.05。肾小球硬化指数3组分别为（32.00 ± 12.09）%、（45.50 ± 13.68）%、（47.50 ± 10.78）%;P < 0.05。肾脏中IgG复合物的免疫荧光评分,3组分别为1.88 ± 0.99、2.88 ± 0.64、2.75 ± 0.71;P < 0.05,实验1组均显著轻于另外两组。肾小管间质损害指数三组间差异无统计学意义,3组分别为4.63 ± 1.92、6.00 ± 1.07、5.75 ± 1.28;P > 0.05）。结论 输注同系小鼠的Treg细胞可显著降低尿蛋白及抗dsDNA抗体的含量,降低肾小球硬化指数及肾脏中IgG免疫复合物的含量,从而延缓MRL/lps小鼠肾脏损伤的进展。     

体外抗原诱导T细胞对NK细胞功能的抑制作用及其影响因素

目的 研究①体外抗原诱导后,T细胞对NK细胞功能的抑制及其机制.②APC及不同T细胞亚群对这一过程的影响.方法 ①分离小鼠APC及T细胞,按1:3混合后分组进行诱导,48 h加入NK细胞通过51 Cr标准4 h释放实验观察NK细胞功能状况;激光共聚焦显微镜观察T细胞对NK细胞功能的抑制作用;RT-PCR法检测抗原诱导后小鼠T细胞bc1、bc2的表达.②标准51 Cr释放试验检测NK细胞功能以观察CD4 CD25 T细胞,抗原诱导的CD4 及CD4-T细胞对NK的抑制以及APC对体系中T-NK细胞间相互作用的影响.结果 ①51 Cr释放率分别为:Anti-CD80诱导组21%,抗原激活组24.4%,细胞对照组34%,无T细胞对照组32%,前3组上清液与NK细胞作用后靶细胞51 Cr释放率分别为34%、31.6%、33.1%.1、2两组51Cr释放率显著低于其余各组(P＜0.01),两组间无显著性差异.无T细胞对照组及各组上清液中51 Cr释放率无显著性差异.共聚焦显微镜下可观察到T细胞与NK细胞的直接接触.经抗原诱导48 h的细胞培养物可检出bc1、bc2的表达.②祛除或未祛除APC两组51 Cr的释放率均显著低于各对照组,且两组间无显著性差异(P＞0.05).CD4 CD25 T细胞组与CD4 T细胞组,51 Cr释放显著低于其他各组(P＜0.01),且前者显著低于后者(P＜0.05);CD4-T组与两对照组间无显著性差异.结论 ①抗原诱导T细胞对NK细胞的抑制作用可通过直接接触的方式,与共刺激因子CD80无关.T细胞上bc1、bc2表达是T细胞抑制NK细胞的可能分子机制之一;②抗原诱导的APC单独或通过T细胞均不能抑制NK细胞功能,提示T细胞对NK细胞的抑制是APC非依赖性的.抗原诱导后CD4 T细胞群体对NK细胞功能有显著抑制,而CD4-群体则无此特性.CD4 CD25 T细胞在无抗原参与情况下对NK细胞有显著性抑制作用.     

CTLA4胞外区蛋白在GS115酵母中的表达和活性鉴定

目的 获取具有生物学活性的CTLA4胞外区蛋白。方法 构建CTLA4胞外区（CTLA4125）蛋白的酵母表达载体，在GS115酵母细胞中表达。通过硫酸铵粗分离和离子交换层析等，获取纯化的目的蛋白，并在CTLI2细胞中鉴定活性。结果 质粒在GS115酵母中可较高水平地表达CTLA4胞外区蛋白，经纯化后的蛋白可抑制IL－2刺激的CTLI2细胞的增殖。结论 GS115酵母可高效表达具有生物学活性的CTLA4胞外区蛋白。     

Treg细胞对细胞毒性T淋巴细胞抗胃癌效应中释放穿孔素、干扰素的影响

目的 观察Treg细胞对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)抗胃癌效应中释放穿孔素、干扰紊的影响.方法 构建CTL细胞对MFC胃癌细胞有效杀瘤体系,加入0.5×105到50.0×105不同剂量的Treg细胞,观察CTL杀瘤活性抑制并检测穿孔素、干扰素浓度.结果 Treg数量达到5.0×105后CTL杀瘤活性受明显抑制,穿孔素、干扰素浓度明显降低(P＜0.05).结论 Treg可通过降低CTL细胞分泌穿孔素、干扰素而抑制其杀瘤活性.