基于Au_(nano)-PB、AEAPS-Dextran-Fe_3O_4和Au_(nano)修饰的前列腺特异性抗原电流型免疫传感器的研究

目的采用普鲁士兰-纳米金(Au_(nano)-PB)、氨基硅烷化-葡聚糖-四氧化三铁纳米复合物(AEAPS-Dextran-Fe_3O_4)及纳米金(Aunano)共修饰于氧化铟锡(ITO)电极表面固载抗体制得高灵敏前列腺特异性抗原电流型免疫传感器。方法先将ITO电极表面滴加适量Au_(nano)-PB,随后将AEAPS-Dextran-Fe_3O_4滴涂在ITO玻璃电极的Au_(nano)-PB膜上,然后通过静电吸附Au-nano并固定前列腺特异性抗体(anti-PSA),制得电流型免疫传感器。结果在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与前列腺特异性抗原(PSA)浓度在该传感器(0.8～20)ng/mL及(20～170)ng/mL的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.6ng/mL。结论成功建立了前列腺特异性抗原免疫传感器,该方法制备简单,操作便捷,检测下限低。     

CTLA4Ig-重组腺病毒载体延长大鼠异基因原位移植气管存活期

目的　研究腺病毒介导的CTLA4Ig基因在大鼠异基因原位气管移植中的作用。 方法　建立异基因大鼠原位气管移植模型。分别采用腹腔注射生理盐水 (Saline组 ,2ml/只 )、腹腔注射CTLA4Ig重组腺病毒载体 (Ad CTLA4Ig组 ,2× 10 9PFU/只 )和肌肉注射环胞素A(CsA组 ,5mg/kg) ,观察术后大鼠的存活时间和移植气管的病理改变。 结果　Ad CTLA4Ig组大鼠存活时间为(2 7 3± 5 88)d ,较Saline组 (7 3± 1 63 )d和CsA组 (18 3± 1 70 )d明显延长 (P <0 0 5 )。同时 ,术后 10dAd CTLA4Ig组大鼠气管组织学改变与CsA组大鼠比较无明显差异。结论　Ad CTLA4Ig可延长大鼠异基因原位移植气管的存活时间     

TH1、TH2细胞与外科应激

机体许多因素参与TH1、TH2细胞分化和功能的维持。在机体遭受创伤、烧伤、出血、手术等应激性打击以后，TH1、TH2细胞反应类型便受到神经-内分泌和其自身分泌的细胞因子的调节。在上述外科应设过程中，机体免疫反应中淋巴细胞的示现并不是单纯的免疫抑制，而是从TH1诱导的反应转向TH2诱导的反应占优势为特征。     

GITR抗体介导增强NK细胞杀伤活性的实验研究

目的 探讨糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptorfamily related receptor,GITR)的抗体通过抑制Treg细胞的功能,进而增强NK细胞杀伤活性来对L615白血病细胞产生杀伤作用.方法 通过不同的给药方式将L615白血病小鼠设立为4个实验组,提取实验分组后的小鼠脾脏中NK细胞作为效应细胞,以L615白血病细胞作为靶细胞,在体外观察了NK细胞的杀伤活性变化情况,并运用RT-PCR,进一步观察了体现NK细胞杀伤活性的几个相关指标的变化.结果 GITR抗体可以明显增强小鼠脾脏中NK细胞的杀伤活性,具体表现为同NK细胞活性密切相关的3个指标穿孔素(Perforin),γ干扰素(IFN-γ),Fas的表达量明显增加.结论 GITR抗体能够通过Treg细胞的调节增强NK细胞的杀伤活性,进而有效的抑制L615白血病细胞.     

CD4+CD25+Treg细胞对B细胞的作用机制分析

目的研究CD4 CD25 调节性T细胞对B细胞作用机制.方法用尼龙毛柱法分离B细胞,用MACS磁珠分选法从Wistar大鼠脾脏淋巴细胞中分离CD4 CD25 Treg细胞,然后将分离纯化的Wistar大鼠Treg细胞负载SD大鼠抗原.以Trans Well Millcell-PCF分隔培养槽分隔或共培养Treg细胞与不同淋巴细胞组成的反应体系,然后向共培养体系中加或不加入Anti-TGF-β1、Anti-CTLA4的阻断方法,培养5天后用ELISA法检测不同组上清中的IgA和IgG分泌水平. 结果分隔培养组上清中的IgG和IgA水平分别为(4.7±1.1)、(10.5±1.7)μg/ml,与阳性对照组中IgG的含量(5.1±1.0)μg/ml以及IgA的(11.2±1.6)μg/ml相比没有显著差异(P＞0.05).而与阳性对照组相比较,共培养组上清中的IgG和IgA水平明显降低(P＜0.01),分别达到了(2.2±0.8)μg/ml和(5.4±0.9) μg/ml.在共培养体系中加入Anti-TGF-β1后,上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到(3.1±0.5)μg/ml和(6.9±0.8)μg/ml;加入Anti-CTLA4后,上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到(3.2±0.6)μg/ml和(7.2±0.9)μg/ml;两种阻断剂同时加入后,上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到(3.5±0.5)μg/ml和(7.4±0.6)μg/ml,三组分泌水平都较共培养组明显升高(P＜0.05),但仍明显低于阳性对照组的水平(P＜0.05). 结论CD4 CD25 Treg通过细胞-细胞间接触机制直接抑制B淋巴细胞反应,在这一过程中TGF-β1和CTLA4都发挥了一定作用.     

腹腔注射1,25(OH)2D3对调节性T细胞及大鼠肾移植存活的影响

目的观察1,25(OH)_2D_3对大鼠CD4~ CD25~ 调节性T细胞、IL-10以及大鼠肾移植后存活的影响。方法以SD大鼠为供体,Wister大鼠为受体,建立大鼠肾移植模型。受体随机分为4组：(1)对照组(组Ⅰ);(2)CsA组(组Ⅱ)：3mg·kg~(-1)·d~(-1)腹腔注射治疗组,术后连续给药13d;(3)1,25(OH)_2D_3组(组Ⅲ)：1μg·kg~(-1)·d~(-1)腹腔注射治疗组,术后连续给药13d;(4) CsA 1,25(OH)_2D_3组(组Ⅳ)：按VD3组和CsA组用药剂量给药。观察移植后4组大鼠存活时间,并于术前4d,术后6、16d检测血清肌酐、IL-10以及术后6d脾脏Treg含量。结果组Ⅲ、组Ⅳ大鼠移植存活时间分别为(13．3±3．2)d和(24．8±2．6)d,较对照组(8．7±1．8d)明显延长(P＜0．01);组Ⅲ、组Ⅳ移植后6d Cr水平分别为(62．7±7．5)mmol／L、(77．1±9．4)mmol／L,明显低于对照组(424．3±61．2)mmol／L(P＜0．01)。给予1．25(OH)_2D_3后大鼠IL-10水平(268．1±24．3)pg／ml以及脾脏CD4~ CD25~ T细胞的比率(18．51±3．73)％,较时照组[分别为(50．1±3．0)pg／ml和(8．95±2．01)％]明显增高(P＜0．01)。结论1．25 (OH)_2D_3能显著促进体内IL-10的产生和CD4~ CD25~ T细胞的增殖,适量1,25(OH)_2D_3与CsA联合应用可以明显改善肾功能,延长移植肾的存活时间。     

CO2激光用于微流控免疫分析芯片加工的初步研究

目的建立微流控芯片的CO2激光直接微加工方法。方法构建激光加工装置,设置激光微加工程序,并对激光加工过程中一些影响因素进行分析,最后将加工后的芯片用于免疫分析。结果CO2激光可用于微流控芯片的加工,微流控芯片通道的深度主要受激光加工强度和激光加工次数的影响。对微通道表面的修饰可以改善通道的光滑度,采用该方法加工后的芯片可以用于免疫分析。结论CO2激光微加工法是一种操作方便、所需设备简单、加工周期短的微流控芯片加工方法。     

院系互动式教学模式实施及效果评价指标

临床医学检验已成为医学领域中快速发展的学科之一，为了有效解决教学实践过程与临床应用严重脱钩的现实矛盾，我们设计了院系“互动式”教学模式，设想通过合理的教学理论和临床实际结合“教与学”模式，改变现行教学中先单纯理论后实习的脱钩式教学模式。