CTLA4Ig基因转染猪皮异种移植的体外实验研究

目的 探索重组腺病毒载体（Recombinant adenovirus,rAdv）介导CTLA4Ig基因转染猪皮异种移植免疫耐受的分子机制。方法 构建CTLA4Ig重组腺病毒载体,转染猪树突状细胞（Dendritic Cell,DC）,以猪表皮细胞匀浆液为刺激原,观察DC递呈猪表皮抗原刺激人T细胞增殖、活化及信号转导的影响;同时,以CTLA4Ig转染小鼠DC细胞,观察该DC膜表面分子CD40、CD80表达。结果 CTLA4Ig转染DC能显著抑制人外周血T淋巴细胞增殖能力（P＜0.01）和T细胞肌醇磷脂信号系统转导活性,IL－2分泌亦受到明显抑制（P＜0.05）;转染CTLA4Ig的小鼠DC膜表面分子CD80表达降低（P＜0.05）。结论 腺病毒介导CTLA4Ig基因转染转皮能诱导人外周血T淋巴细胞免疫耐受。     

18%Ⅲ度烫伤对小鼠脾脏T淋巴细胞肌醇脂质信号系统及其功能的影响

目的：探索18％Ⅲ度烫伤对小鼠脾脏T淋巴细胞肌醇脂质信号系统活性的影响及其与T细胞功能受抑，IL-2、IL-10分泌的关系，即烧伤后T淋巴细胞功能受抑的信号转导分子机制。方法：以18％Ⅲ度烫伤小鼠为模型，检测烫伤后不同时相参与跨膜信号转导的G蛋白（G-protein）、蛋白酪氨酸激酶（PTK）、蛋白激酶C(PKC)及胞浆PTK、PKC、PI-PLC活性与Ca 浓度的改变，观察不同时相细胞功能及IL-2、IL-10分泌，分析各信号转导分子活性改变与T细胞功能受抑，IL-2、IL-10分泌的关系。结果：烧伤后膜G-protein、浆PI-PLC变化趋势与G-protein相同，但出现活性受抑的时间较G-protein拖后一个时相）。胸浆游离Ca 浓度明显降低，明显降低的时相亦始于伤后12h。PTK和PKC由于存在膜浆两相，其变化规律较复杂，转膜PKC活性呈现先降低（伤后2-24h）后升高（伤后96h及以后）的双相改变，浆PKC活性变化与之相反；膜PTK活性于伤后早期降低，168h后升高，浆PTK活性于伤后各时相均升高。T淋巴细胞增殖能力和IL-2分泌于伤后各时相均降低，其变化趋势与胞膜G-protein和胞浆游离Ca 浓度呈显著正性直线相关。IL-10分泌亦呈先降低后升高的双相改变，其活性改变与胞浆PKC呈负性直线相关。结论：肌醇磷脂途径胞膜G-protein、胞膜PTK和胞浆游离Ca 浓度改变是严重烧伤后T淋巴细胞增殖能力降低，IL-2分泌减少和IL-10分泌先降低后升高的主要信号转导分子机制。