杜氏利什曼原虫23kDa抗原编码基因克隆的表达

将已建立的杜氏利什曼原虫ｃＤＮＡ文库基因,亚克隆于ｐＵＣ１８质粒载体,诱导表达筛选两个克隆,即Ｐ１、Ｐ２,表达的蛋白分子量皆为２３ｋＤａ,Ｐ１克隆表达的２３ｋＤａ蛋白分子,经Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析显示,可被兔抗杜氏利什曼原虫前鞭毛体抗血清及内脏利什曼病病人血清识别。     

利什曼原虫分子分类的研究进展

本文介绍了同工酶电泳、免疫学方法、DNA-DNA杂交、酶切片段分析及序列测定等技术运用于利什曼原虫分子分类的研究进展。     

谈一堂优质寄生虫学课实践教学

课堂教学是院校教学的最基本和最重要的教学形式,它的效果直接关系到院校的教学质量和人才培养水平。作就如何讲好一堂优质寄生虫学课实践教学,从以下六个方面：一、认真书写教案,做好课堂设计;二、突出重点,优化教学内容,注意创新能力培养;三、善于启发,活跃气氛;四、媒体配合,得体有序;五、字正,间准,腔园情满,体现教学美;六、课堂小结。浅谈了自已的教学实践体会。     

登革Ⅱ型病毒前膜蛋白基因反向重复序列具有干扰病毒复制的作用

目的构建含有登革Ⅱ型病毒（DENV-2）前膜蛋白（prM）基因反向重复序列（irRNA）的重组质粒,评价其抑制病毒复制的
效果。方法DENV-2接种乳鼠,提取总RNA,在正义和反义引物两端分别加上XhoⅠ和EcoRⅠ的识别位点,将经RT-PCR 扩增
的prM全长基因片段插入pcDNA3.1(+)中,形成含有prM反向序列的重组质粒pcDNA-asprM;于另一对正义和反义引物两端引
入酶切位点NheⅠ和BglⅡ,经RT-PCR 扩增prM 全长基因片段插入pMD18-T-vector 中,形成含有正向序列的重组质粒
pMD18-T-prM。限制性内切酶NheⅠ和KpnⅠ分别酶切重组质粒pMD18-T-prM和重组质粒pcDNA-asprM,得到片段prM和线
性化载体pcDNA-asprM,连接构建成含有prM反向重复序列的重组质粒pcDNA-irRNA。筛选的阳性重组质粒pcDNA-irRNA
用脂质体法转染至BHK-21细胞中,半定量PCR和实时荧光定量PCR分析评估该质粒抑制登革病毒复制的效果。结果成功构
建具有prM反向重复序列的重组质粒pcDNA-irRNA。经转染pcDNA-irRNA的实验组与未转染质粒阳性对照组相比,半定量
PCR结果显示DENV-2攻击96 h后NS3的mRNA表达水平下降28%;实时定量PCR分析显示,DENV-2攻击72 h后实验组病毒
拷贝数比阳性对照组少1.44倍,攻击96 h后实验组的NS1表达量明显低于阳性对照组（P<0.05）。结论DENV-2 prM反向重复
序列具有干扰病毒复制的效果,为登革病毒基因疫苗的研究提供理论依据。
     

广州地区3种不同生境的蚊感染沃尔巴克氏体的系统发育分析

目的 了解广州地区3种生境不同蚊种沃尔巴克氏体的分布。方法 利用沃尔巴克氏体的16S rDNA和主要表面蛋白基因（wsp）的wAlbA,wAlbB基因型序列建立PCR检测方法,对不同种类蚊虫沃尔巴克氏体感染进行检测,同时利用Mega6.06软件对所获基因序列进行系统发育分析。结果 共检测广州市3种不同生境的4种常见蚊,用16S rDNA基因PCR扩增检测小区白纹伊蚊的沃尔巴克氏体阳性率为100.0%,检测公园致倦库蚊的沃尔巴克氏体阳性率亦为100.0%。4种蚊沃尔巴克氏体核酸检测阳性率为50.0%～100.0%。wsp基因的检出有3种情况:仅检出wAlbA或wAlbB基因型,或同时检出wAlbA和wAlbB 2个基因型。经PCR扩增,获得14条蚊感染沃尔巴克氏体的16S rDNA基因序列长度为441 bp;14条蚊感染沃尔巴克氏体的wAlbA基因序列长度为351 bp;12条蚊感染沃尔巴克氏体的wAlbB基因序列长度为481 bp。系统发育分析显示不同生境不同蚊种的沃尔巴克氏体基因型存在差异。结论 广州市学校、小区、公园3种生境的白纹伊蚊、致倦库蚊和骚扰阿蚊普遍感染沃尔巴克氏体,有wAlbA或wAlbB单感染,也有wAlbA与wAlbB共感染;不同生境不同蚊种沃尔巴克氏体基因型存在差异。     

白纹伊蚊及致倦库蚊对蝙蝠乙型脑炎病毒分离株的易感性分析

摘要：目的了解蝙蝠乙脑病毒分离株GD1和HN2株对白纹伊蚊和致倦库蚊的易感性。方法通过病毒液饲喂法使白纹伊蚊和
致倦库蚊经口感染蝙蝠乙脑病毒GD1株和HN2株,采用TaqMan real-time RT-PCR方法,检测GD1株和HN2株感染白纹伊蚊及
致倦库蚊后第4、6、8、10、12、14、16、18、20天病毒存在情况与病毒载量的动态变化。结果两株蝙蝠乙脑病毒在感染白纹伊蚊、
致倦库蚊后4~20 d内均能被检测到。Ct值的动态变化规律显示白纹伊蚊和致倦库蚊均能感染乙脑病毒GD1株和HN2株,但致
倦库蚊的易感性高于白纹伊蚊;两株毒株的毒力可能不同,HN2株毒力大于GD1株。结论白纹伊蚊和致倦库蚊均能感染蝙蝠
乙脑病毒分离株。
     

开封市某幼儿园集体服药驱虫的实验观察

自1983年以来,每年秋季用左旋咪唑对开封市某幼儿园(Ⅰ园)集体服药驱虫一次,同时以Ⅰ、Ⅱ园作为对照。并于1990年10～12月,采用生理盐水直接涂片、饱和盐水漂浮法粪检和透明胶纸肛拭法考核了驱除蛔虫和蛲虫的效果。结果蛔虫的感染率Ⅰ园为8.18％(22/269),Ⅱ园为22.40％(41/183),后者显著高于前者(P<0.01).未受精蛔虫卵的检出率Ⅰ园7.43％(20/269),Ⅱ园为1.64％(3/183);受精蛔虫卵检出率Ⅰ园     

全球气候变化与自然疫源性、虫媒传染病

全球气候变化将影响虫媒传染病,主要表现在改变虫媒的地区分布,增加虫媒繁殖速度与侵袭力和缩短病原体的外潜伏期。大量资料显示,媒介生物性疾病近年在全球呈上升趋势。受气候变化影响较大的虫媒传染病包括疟疾、血吸虫病、登革热和其他虫媒病毒性疾病。本文就这方面的文献进行了综述。     

3种光敏剂毒杀白纹伊蚊幼虫的实验室与野外应用研究

目的研究光敏剂琥红（RB）、赤鲜红B、α-三噻吩对实验室饲养及野外白纹伊蚊4龄幼虫的杀灭效应。方法分别在实验室和野外条件下,计数不同药物浓度、不同光源照射和照射强度、不同处理时间的RB、赤鲜红B、α-三噻吩作用后白纹伊蚊4龄幼虫的死亡数,分析其影响杀蚊幼虫的实验参数。用组织化学的方法,研究其毒理机制。结果RB、赤鲜红B、α-三噻吩无暗毒性。用固定光源100W日光灯照射,照射强度为320×10^2lx,时间为6h;RB药物浓度分别为10、25μg／ml,赤鲜红B药物浓度分别为100、150μg／ml,皆可达到100％杀灭白纹伊蚊4龄幼虫的效果。用中低强度的太阳光照射5h,α-三噻吩药物浓度为1μg／ml,亦可达到100％杀灭白纹伊蚊4龄幼虫的效果。初步将赤鲜红B、α-三噻吩分别应用于野外不清澈和清澈自然水体内控制白纹伊蚊幼虫,赤鲜红B、α-三噻吩在野外不清澈水体内的杀虫率分别为46％和49％,而在清澈自然水体内的杀虫率分别为67％和89％;但当持续强度太阳照射,α-三噻吩在前2种水体内杀虫率皆可达到98％。组织化学试验结果显示：用RB、赤鲜红B、α-三噻吩处理的白纹伊蚊4龄幼虫,经光毒作用后,蚊中肠绒毛消失,细胞肿胀,细胞核消失。脂肪体在表皮下广泛分布,马氏管外形不规则及管腔狭窄等病理变化。结论RB、赤鲜红B、α-三嚷吩3种光敏剂皆是高效、实用的光敏化杀虫剂。     

广州市白纹伊蚊细胞色素C氧化酶亚基Ι基因遗传多态性分析

目的 探索广州市白纹伊蚊线粒体细胞色素C氧化酶亚基I基因（COI）序列的特征,分析同一城市不同环境下白纹伊蚊的遗传变异。方法 单蚊抽提广州市不同点采集的白纹伊蚊基因组DNA,扩增细胞色素C氧化酶亚基I基因片段,联合单链构象多态性PCR（PCR-SSCP）技术分析COI基因片段多态性并筛选部分样品进行克隆测序,用软件比对分析序列的差异。结果 广州市不同采样点白纹伊蚊PCR扩增后获得709bp的COI基因部分序列,序列分析出现12个变异位点,变异率为1.69%。聚类分析显示广州株白纹伊蚊不同采样点的群体间出现部分分化。结论 广州市不同采样点的白纹伊蚊线粒体COI基因出现部分遗传多态性,可能与城市化发展下白纹伊蚊孳生环境的变化有一定关系。