日本血吸虫26kDa谷胱甘肽S-转移酶基因真核表达载体的构建及序列测定

目的 扩增日本血吸虫２６ｋＤａ谷胱甘肽Ｓ－转移酶（Ｓｊ２６ＧＳＴ）基因片段,构建其重组真核表达载体,以研制ＳｊＧＳＴ核酸疫苗。方法 根据已知基因序列设计一对引物,运用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增Ｓｊ２６ＧＳＴ目的基因片段,将其克隆到ｐｃＤＮＡ３质粒中,并经酶切、ＰＣＲ鉴定,测序证实。结果 获得ＧＳＴ－ｐｃＤＮＡ３重组克隆。结论：本实验获得Ｓｊ２６ＧＳＴ重组克隆,为进一步研制核酸疫苗创造了条件。     

日本血吸虫精氨酸酶编码基因cDNA的分离和序列分析

【目的】分离和鉴定日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,S .j)新基因。【方法】应用免疫学方法筛选S .jcDNA文库获得阳性克隆 ;通过PCR直接序列测定技术 ,表达序列标签 (EST)同源性检索对阳性克隆插入片段进行鉴定 ;采用亚克隆技术及生物信息学等技术 ,对获得的日本血吸虫精氨酸酶编码基因序列进行结构与功能的分析。【结果】获得了一个含10 6 1bp外源插入片段的阳性克隆 ,其cDNA序列含有一个 840bp的阅读框 ,编码 2 79个氨基酸 ,属精氨酸酶家族 ,与国际蛋白质库中的酵母、蛙、人和大鼠精氨酸酶序列的同源性分别为 44 % ,5 0 % ,5 1% ,5 3%和 5 4%。【结论】获得了编码日本血吸虫精氨酸酶编码基因全长cDNA ,为日本血吸虫精氨酸酶基因功能的研究奠定了基础。     

超滤对婴儿先天性心脏病体外循环手术后肺功能的影响

目的 了解婴儿先天性心脏病(简称先心痛)合并肺动脉高压体外循环手术前后肺功能的变化及应用超滤对这种变化的影响.方法 选择20例进行体外循环手术的室间隔缺损合并肺动脉高压的患儿,在手术中随机将患儿分为两组.超滤组在手术过程中进行超滤,对照组在手术过程中不超滤.观察两组患儿手术前后肺功能变化的异同.结果 两组患儿术后3 h呼吸指数比术前明显上升,差异均有显著性(P<0.05);术后6 h与术后3 h变化不大;超滤组术后3 h和术后6 h肺气道阻力、呼吸指数较对照组明显减低,而肺静态顺应,性则较对照组明显升高,差异均有显著性(P相似文献   

EST法筛选日本血吸虫表达基因序列的研究

本运用表达序列标签法(EST)筛选日本血吸虫(中国江西株)成虫cDNA库,将得到的EST序列送入GenBank和EBI进行同源性分析检索,获得30个日本血吸虫基因EST,今后寻找新的抗血吸虫疫苗侯选分子及研制新的化疗药物奠定一定的工作基础。     

血液净化技术在多器官功能障碍综合征中的器官支持作用

目的:探讨血液净化技术(BP)对小儿多器官功能障碍综合征(MODS)的多器官支持治疗作用。方法:比较本院PICU16例危重患儿实施BP治疗后各器官的功能。结果:体温、心率、呼吸频率、全血白细胞计数、ESR和CRP各项临床常用炎症指标在BP治疗后均显著下降(P<0.001);BP治疗前后肾功能指标(血肌酐、BUN、尿量)、心肌酶谱(ALT、CK、CK-MB、LDH)、肝功能指标(总胆红素、白蛋白)、血气分析指标(pH、PaO2、PaO2/FiO2)均明显好转(P<0.05);BP治疗前后机械通气参数(PIP、PEEP)无明显改变(P>0.05),但Vt上升,P<0.05。结论:血液净化技术对小儿MODS不但有肾代替作用,而且有呼吸、循环、肝、酸碱和电解质内环境的平衡等多器官支持、治疗作用。     

小儿全身炎症反应综合征早期敏感炎症因子的研究

目的研究筛选小儿全身炎症反应综合征(SIRS)早期敏感炎症因子指标,为今后的合理早期干预提供理论依据。方法用化学发光酶免疫分析法(CLEIA)测定SIRS患儿血白介素1β(IL-1β),白介素-6(IL-6),白介素-8(IL-8),肿瘤坏死因子-α(TNFα-),采用酶联免疫吸附比色法(ELISA)测定血白介素-10(IL-10),白介素-13(IL-13)。结果SIRS患儿与对照组比较血TNFα-明显升高,血IL-6阳性率明显升高,有显著性差异(P<0.05),其他指标则无统计学意义(P>0.05)。结论血清TNFα-和IL-6是SIRS早期检测敏感指标。     

先天性主动脉缩窄29例临床分析

目的 总结我院心脏中心小儿主动脉缩窄的治疗、监护经验.方法 先天性主动脉阻塞性疾病患儿29例,包括主动脉缩窄28例,主动脉弓离断2例,主动脉双弓1例,单纯性主动脉缩窄3例,合并其他心内畸形23例.年龄15 d～6岁,5 kg以下患儿占40%.单纯主动脉阻塞采用侧开胸左后外侧第4肋间进胸,游离主动脉弓降部,结扎切断动脉导管,切除缩窄段,行端端吻合;对合并心内畸形和其他血管畸形的主动脉狭窄的患儿实施Ⅰ期手术,同时矫治心内畸形与血管畸形.结果 本组患儿29例,手术当日上下肢血压收缩压方面,下肢大于上肢者占68%,一致者(<5mm Hg)占21%,下肢小于上肢者占11%.1例因撤机困难放弃治疗;1例死亡.结论 单纯主动脉阻塞性疾病或合并其他心内畸形的患儿应早期手术治疗,Ⅰ期根治术安全、有效.     

CRRT机血浆置换预防儿童ABO血型不合骨髓输注的溶血反应

目的观察血浆置换技术在ABO血型主侧不合的非亲缘异基因供髓骨髓移植中的应用价值。方法对3例ABO血型主侧不合非亲缘供髓骨髓移植的患儿进行血浆置换,均先置换6%羟乙基淀粉注射液500 ml,再根据体重大小置换不同剂量的AB血型血浆,以去除血浆抗红细胞抗体,防止异型骨髓输注ABO血型不合的溶血反应,检测血浆置换前后受者血浆抗红细胞抗体浓度并观察溶血反应。结果血浆置换后,3例患儿血浆抗红细胞抗体IgM抗体滴度分别由最高1:1 024、1:32、1:256降为1:8、1:0、1:0,IgG抗体滴度分别由1:256、1:32、1:128降为1:16、1:0、1:4,分别输注ABO血型主侧不合骨髓680 ml8、00 ml1、000 ml,仅1例发生轻微急性溶血反应,未出现迟发性溶血反应,3例患儿均植入成功,其中1例发生Ⅰ度、2例发生II度急性移植物抗宿主病(皮肤型)。结论血浆置换是预防ABO血型主侧不合骨髓移植溶血反应的安全有效的方法。     

日本血吸虫精氨酸酶编码基因cDNA的分离和序列分析

目的：分离和鉴定日本血吸虫（Schistosoma japonicum,S.j)新基因。方法：应用免疫学方法筛选S.j.cDNA库获得阳性克隆;通过PCR直接序列测定技术,表达序列标答（EST）同源性检索对阳性克隆插入片段进行鉴定／采用亚克隆技术及生物信息学等技术,对获的日本血吸虫精氨酸酶编码基因序列进行结构与功能的分析。结果：获得了一个含1061bp外源插入片段的阳性克隆,其cDNA序列含有一个804bp的阅读框,编码279个氨基酸,属精氨酶家族,与国际蛋白质库中的酵母、蛙、人和大鼠精氨酸酶序列的同源性分别为44％,50％,51％,53％和54％,结论获得了编码日本血吸虫精氨酸酶编码基因全长cDNA,为日本血吸虫精氨酸酶基因功能的研究奠定了.     

日本血吸虫(大陆株)成虫基因表达谱的研究

报告作者 1998年至 2 0 0 0年有关日本血吸虫 (大陆株 )成虫基因表达谱研究的结果 ,主要包括 :已测定 5 5 1条EST ,其中 5 19条EST已送入国际基因数据库 (GenBank/dbEST) ,并获得了GenBank的登录号。经同源整合后 ,5 19条EST序列归类为 388个基因序列 ,其中 ,2 4条 (6 19%)为日本血吸虫已知基因序列 ;18条 (4 6 4 %)EST与曼氏血吸虫已知基因序列同源 ,90条 (2 3 19%)EST与其它生物的已知基因序列同源 ,同源基因包括精氨酸酶、酰胺酸酶、微纤维蛋白、肌动蛋白、细胞色素C氧化酶、二硫异构酶、加长因子、热激蛋白 70、Y盒结合蛋白和抗凋亡因子等。其余的 2 5 6条 (6 5 98%)EST在Gen Bank中未发现有已知基因的同源序列。将非日本血吸虫同源序列EST或未检索到同源序列的EST初步定义为日本血吸虫亲基因 /未知基因序列EST ,共 36 4条。已克隆日本血吸虫精氨酸酶基因、Y 盒结合蛋白基因和抗凋亡 1因子 3个新基因的全长cDNA ,其GenBank的登录号分别为AF4 0 2 6 15、AF36 7371和AF33376 5。本研究结果丰富了血吸虫基因组数据 ,并为进一步筛选日本血吸虫疫苗候选基因或药物靶位提供了科学依据。