非食管癌高发区食管癌组织中DNA聚合酶β基因突变检测

目的：探讨非食管癌高发区病例的食管癌组织中聚合酶β基因的突变情况。方法：利用RT-PCR、SSCP及DNA序列分析的方法,对河南省非食管癌高发区25例食管癌及其癌旁组织中聚合酶β基因的变异情况进行分析。结果：25例食管癌组织标本中,5例SSCP结果异常,序列分析显示,1例613位A→T,导致氨基酸序列167位Lys→Ⅱe;2例660位A→G,导致第183位Arg→Gly;2例670位A→G,导致186位Glu→Gly;而对应的癌旁组织标本SSCP结果均无异常。结论：非高发区食管癌组织中有polβ突变存在。     

全反式维甲酸对人食管癌细胞增殖及DNA聚合酶β表达的影响

目的研究全反式维甲酸对人食管癌细胞诱导分化作用.方法在体外细胞培养的基础上,观察细胞形态学的变化,细胞增殖动力学的变化.采用MTT比色法测定细胞增殖抑制率,免疫组化和western blot 方法检测DNA聚合酶β(polβ)蛋白表达.结果经全反式维甲酸处理后,人食管癌Eca109细胞的细胞形态趋向良性分化,细胞增殖指数明显降低.polβ表达降低.结论全反式维甲酸对人食管癌Eca109细胞有诱导分化作用,其机理可能是抑制polβ的表达,改变细胞的形态结构和生物学特性,促进癌细胞的分化趋向正常.     

ACUPUNCTURE EFFECTS ON INDUCIBLE NITRIC OXIDE SYNTHASE mRNA, iNOS PRODUCT AND HEAT SHOCK PROTEIN IN PERITONEAL MACROPHAGES OF THE MOUSE

Inourpreviousexperimentsitwasfoundthatacupuncturecouldcontributetoimmunoreg-ulationandimmunefunctionin.i..[l].Nitricoxide(NO)actingasanubiquitousmessengermoleculeandneurotransmitterplayedandessen-tialroleinrelaxingvesselsandcytotoxicitya-gainstinvadingmic…     

野生型DNA聚合酶β转染Eca-109细胞后增变基因表型变化

目的:探讨野生型DNA聚合酶β(polbeta)转染人食管癌Eca-109细胞后对其增变基因表型的效应.方法:将经过鉴定的重组pcDNA 3.1质粒(插入野生型, wt)-polbeta转染培养的人食管癌Eca-109细胞.将Eca-109细胞分为3组:转染实验组(E)、空质粒转染对照组(C1)和未转染对照组(C2).应用原位杂交技术显示wt-polbeta和wt-p53的杂交信号,免疫细胞化学染色显示POLB-免疫反应性(IR)和多药耐受(MDR1)-IR,免疫印迹显示wt-polbeta和突变(mt)-polbeta的带型,细胞化学技术检测各组细胞的增殖与分化细胞的比率.结果:polbeta免疫印迹结果显示E组呈现增强的wt-polbeta主带, C1、C2 组呈现很弱wt-polbeta主带和显著突变的(mt)-polbeta主带(P<0.01);polbeta免疫细胞化学结果显示E组的强信号定位于细胞核内,C1、C2 组信号皆很弱(P<0.01).E组的wt-polbeta及 wt-p53原位杂交的信号强于C1、C2 组(P<0.01).E组MDR1的免疫反应性和增殖与分化细胞的比率低于C1、C2 组(P<0.01).结论:wt-polbeta转染的Eca-109细胞呈现wt-polbeta及wt-p53表达上调而mt-polbeta及MDR1表达下调的增变基因表型减弱.     

金银花在体内抗氧化作用的实验研究

目的探讨金银花在体内的抗氧化作用。方法将20只Wistar大鼠随机分为两组。其中,实验 1组(大剂量组10只)予金银花水煎液(10g／kg)灌胃;实验2组(小剂量组10只)予金银花水煎液(5g／kg) 灌胃;另设对照组(10只)予蒸馏水灌胃。分别在灌胃前、灌胃后1、2h由眼眶取血,分离血浆,检测不同时间血浆内T-AOC、GSH-Px、GSH、MDA、NOS、NO、SOD的变化。结果实验1组和实验2组与对照组相比,灌胃1、2h后T-AOC、GSH-Px、GSH、SOD都有明显增加,而NOS和NO无明显变化,MDA明显下降; 1h时增加或减少幅度大于2h。结论金银花可提高体内抗氧化作用,且有剂量依赖性。     

8-Br-cAMP对Eca-109细胞凋亡的影响

目的：探讨8—Br—cAMP对人食管癌Eca—109细胞凋亡的影响及其相关基因表达的变化。方法：采用TUNEL法检测细胞凋亡,应用原位杂交、组织化学、免疫组织化学以及RNA和蛋白质斑点印迹技术相对定量,观察8—Br—cAMP对Eca—109细胞凋亡相关基因及凋亡效应分子表达的影响。结果：8—Br—cAMP作用48h后可显著诱导Eca—109细胞凋亡,并见到野生型(wt)p53及iNOS基因表达上调,bcl—2、c—myc基因表达下调,iNOS活性增强,Fas—IR减弱。结论：8—Br—cAMP通过调控凋亡相关基因及凋亡效应分子的表达,使之相互作用、相互协同,诱导人食管癌Eca—109细胞的凋亡。其中,wtp53在该凋亡的诸多因素中起着关键作用。     

8—Br—cAMP对人食管癌Eca—109细胞生长相关基因表达的影响

目的 探讨８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对人Ｅｃａ－１０９细胞与生长相关基因表达的影响。方法 体外培育的人食管癌Ｅｃａ－１０９细胞受８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ处理后,用原位杂交,免疫组织化学及ＲＮＡ,蛋白质斑点印迹技术研究了与细胞生长相关的几种基因的表达变化。结果 ８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ可减弱ＥＧＦＲ,Ｈ－ｒａｓ,ｃ－ｍｙｃ,突变型ｐ５３等原表达,增强野生型ｐ５３基因表达和ｐ２１＾ＷＡＦ１蛋白的表达。     

BDNF/TrkB信号途径与抗肿瘤治疗

肿瘤是目前危害人类健康的主要疾病之一。治疗肿瘤的主要手段包括手术、放疗、化疗和生物治疗等,但耐药现象的产生,导致药物治疗效果不甚理想。研究表明脑源性神经营养因子(BDNF)及其酪氨酸激酶爱体B(TrkB)在肿瘤的发生发展中起着非常重要的作用,激活BDNF/TrkB信号途径除了刺激肿瘤细胞存活,血管发生及失巢凋亡以外,还与肿瘤细胞的耐药性密切相关。本文主要综述BDNF/TrkB信号途径对肿瘤耐药的影响及相应的抗肿瘤治疗应用,以期为克服肿瘤多药耐药性提供新的研究思路,从而进一步提高肿瘤患者生存率和改善预后。     

非放射性反义RNA探针的原位杂交技术探讨

以自制的反义ＲＮＡ探针研究了非放射性标记原位杂交技术。结果表明：①以小柱装置提取质粒ＤＮＡ，方法快速、简便、且纯度好；②以线性化的质粒ＤＮＡ为模板进行体外转录，加Ｂｉｏ－１４－ＣＴＰ标记，需用ｐＨ８．０的转录缓冲液；③实验中需防止Ｒｎａｓｅ污染，但也可应用ＲＮａｓｅ作为实验对照和减低背景；④杂交液中以不加硫酸葡聚糖为宜，杂交温度以４２℃为佳。