IL-2促进大鼠子宫平滑肌细胞增殖及IL-2R的表达

目的：研究白细胞介素-2(IL-2)对大鼠子宫平滑肌细胞增殖的影响，并探讨其可能的机制。方法：以培养的大鼠子宫平滑肌细胞进行了以下实验：以MTT比色法，测定IL-2对该细胞增殖的剂量效应；用流式细胞技术，观察IL-2对该细胞细胞周期各阶段DNA含量的影响；用激光共聚焦显微镜技术，检测IL-2对该细胞内Ca^2 水平的影响；用RT-PCR技术，检测IL-2R在该细胞的表达。结果：IL-2(10～1000U／ml)可显著促进大鼠子宫平滑肌细胞的增殖。用流式细胞技术检测细胞中DNA的含量发现，IL-2(100 U／ml)可提高该细胞由G1期进入S期的比例。激光共聚焦法检测到IL-2(100U／ml)可升高细胞内的Ca^2 浓度。RT-PCR技术检测到细胞表达IL-2R a mRNA、IL-2RβmRNA和lL-2R γmRNA三条链。结果：IL-2参与了对大鼠子宫平滑肌细胞增殖的调节，其促进增殖作用可能与该细胞周期DNA含量的变化、Ca^2 浓度的改变和IL-2R的表达有关。     

雌二醇对骨髓基质细胞分化的作用

目的:研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中,17β-雌二醇(E2)对其骨形态发生蛋白受体ⅠB-(BMPR-ⅠB)及过氧化物酶增殖活化受体-γ2(PPAR-γ2)mRNA表达的影响,探讨雌二醇对骨髓基质细胞分化的作用。方法:1,25(OH)2D3和地塞米松(DEX)诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化,应用半定量DR-PCR及Northernblot技术,观察不同浓度E2对骨髓基质细胞分化过程中BMPR-ⅠB及PPAR-γ2-mRNA表达的影响;以α-磷酸奈酚为底物,测定细胞碱性磷酸酶的活性,VanGieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量。结果:E2能明显增强骨髓基质细胞在分化介质中BMPR-IBmRNA的表达,E2为(0-10-6)mol/L时,BMPR-IBmRNA的表达随E2浓度增加而增加,从(2.0±0.4)%增至(4.8±1.0)%(P<0.05)和(17.3±2.2)%(P<0.01);E2能明显促进骨髓基质细胞在分化介质中PPAR-γ2mRNA的表达,在上述E2浓度时,PPAR-γ2mRNA的表达从(1.80±0.3)%增至(9.5±2.1)%,(P<0.01)和(19.2±3.0)%,(P<0.01);Northernblot结果显示随着E2浓度的增加,BMPR-ⅠBmRNA的表达从1.72±0.11增至3.73±0.31(P<0.01);PPAR-γ2mRNA的表达量从1.47±0.12增至2.81±0.22(P<0.01)和4.02±0.36(P<0.01)。细胞ALP活性明显受E2的抑制;在上述E2浓度时ALP的活性蛋白从(42.6±2.5)降至(3.6±0.7)μg(P<0.01)。Ⅰ型胶原含量均随E2浓度增加而降低。结论:E2抑制体外培养的骨髓基质细胞向成骨细胞分化而促进其向脂肪细胞分化。     

三苯氧胺促进大鼠子宫平滑肌细胞增殖

目的 :研究三苯氧胺 (tamoxifen ,TAM)对大鼠子宫平滑肌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法 :采用细胞培养、细胞计数、MTT、流式细胞技术和激光共聚焦显微镜技术。结果 :TAM(10 -6mol·L-1)使大鼠子宫平滑肌细胞的生长曲线上移。TAM(10 -8～ 10 -6mol·L-1)剂量依赖性的促进大鼠子宫平滑肌细胞的增殖作用。TAM(10 -6mol·L-1)使大鼠子宫平滑肌细胞周期由G1期加速向S期转化 ,G1期的DNA含量由对照组的 5 5 .5 %下降到加药组的 32 .8% ,S期的DNA含量由对照组的 2 9.0 %上升到加药组的 4 9.4 %。激光共聚焦检测到TAM(10 -6mol·L-1)可使大鼠子宫平滑肌细胞内的Ca2 + 浓度显著升高。结论 :TAM可以通过调节细胞周期各阶段DNA含量和细胞内Ca2 + 浓度水平 ,从而调节大鼠子宫平滑肌细胞的增殖活动。     

外周血淋巴细胞CR1分子定量测定及其临床应用

目的 建立一种定量测定外周血淋巴细胞补体受体1型(PBLCR1)分子的敏感性、特异性、重复性良好的实验方法,并探讨其临床意义.方法 常规法分离PBL,并定量包被于V型板中,依次加入抗CR1单克隆抗体、碱性磷酸酶(AP)标记二抗及可溶性底物显色,移显色液于比色孔,405nm比色,计算吸光度值(A).结果 正常人PBLCR1分子表达数量A值平均值为(1.26±0.25),显著高于肝细胞癌(0.72±0.20)、肝硬化(0.69±0.19)、肾病综合征(0.58±0.17)及系统性红斑狼疮(0.47±0.15)患者(P＜0.01);SLE患者PBLCR1分子表达的数量显著低于其他疾病组(P＜0.01),差异有统计学意义.结论 本方法具有良好的敏感性、特异性和重复性;CR1分子的数量表达可分为高、中、低3种形式;正常人为高表达;HCC和LC患者以中、低表达为主;肾病综合征和SLE患者表达显著降低.PBLCR1分子定量测定,对免疫相关性疾病的辅助诊断与治疗效果的评价具有重要的临床意义.     

西南地区部队官兵55型人腺病毒中和抗体的研究

目的 探究西南地区官兵55型人腺病毒（human adenovirus type 55,HAdV55）抗体流行情况,并检测HAdV55抗体（anti-HAdV55）的中和活性,为部队预防和控制HAdV55疫情提供参考依据。 方法 收集西南地区部队官兵血清325份,采用ELISA方法检测血清中anti-HAdV55,通过体外中和试验检测抗体阳性血清中和HAdV55感染的活性。 结果 西南地区部队官兵体内anti-HAdV55的阳性率较低,325份血清中抗体阳性仅为19份,阳性率为5.85%。19份抗体阳性的血清中,14份在细胞水平上具有中和活性,中和效价最高为1:64。 结论 西南地区官兵体内anti-HAdV55水平较低,抵抗 HAdV55感染的能力较弱。因此一旦出现个别感染者,部队应加强对HAdV55感染的预防和控制,防止感染的扩散。     

他莫西芬促进HeLa 宫颈癌细胞系增殖

目的: 研究他莫西芬(tamoxifen, TAM)对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响. 方法: 应用生长曲线测定、MTT、流式细胞术和激光扫描共聚焦显微镜等技术. 结果: TAM（1×10-7mol*L-1）使HeLa细胞的生长曲线向上移动；TAM（1×10-8～1×10-6 mol*L-1）可显著促进HeLa细胞增殖；TAM（1×10-6 mol*L-1）促进细胞G1/S期转化，并显著促进细胞内Ca2+释放. 结论： TAM可能对子宫颈癌细胞的生长分化具有重要的调节作用,这种调节作用可能是通过影响细胞周期和胞内Ca2+水平而实现的.     

不同种属细菌感染患者机体免疫功能变化的实验研究

目的 通过检测不同种属细菌感染患者外周血淋巴细胞亚群分布情况,探讨不同种属细菌感染患者细胞免疫功能的变化.方法 利用流式细胞仪对409例健康体检者和53例细菌感染患者体内T淋巴细胞及其亚群、B细胞、NK细胞进行检测.结果 (1)总感染组T4细胞、DN-T细胞、T4/T8比值显著低于健康对照组(P＜0.05),T8细胞显著高于健康对照组(P＜0.01);单纯细菌感染组T4细胞、DN-T细胞、DP-T细胞显著低于健康对照组(P＜0.05),T8细胞显著高于健康对照组(P＜0.01);细菌病毒混合感染组T4细胞、T4/T8比值、NK细胞显著低于健康对照组(P＜0.05),B细胞和T8细胞显著高于健康对照组(P＜0.01);单纯细菌感染组DN-T细胞、DP-T细胞、B细胞显著低于细菌病毒混合感染组(P＜0.05),NK细胞显著高于细菌病毒感染组(P＜0.01).(2)铜绿假单胞菌感染组T4细胞和T4/T8比值显著低于对照组,而T8细胞和B细胞显著高于对照组(P＜0.05);不动杆菌感染组T8细胞显著高于对照组,而T4/T8比值、DN-T细胞、DP-T细胞和NK细胞显著低于对照组(P＜0.05);克雷伯菌感染组和肠杆菌感染组T4细胞和T4/T8比值显著低于对照组,而T8细胞显著高于对照组(P＜0.05);结核杆菌感染组T4细胞和T4/T8比值显著低于对照组,NK细胞显著高于对照组(P＜0.05);葡萄球菌和链球菌感染组与对照组的淋巴细胞亚群检测结果无统计学差异(P＞0.05).结论 细菌感染者体内存在淋巴细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱.     

RNA干扰抑制树突状细胞CD80和CD86基因表达研究

目的探讨体外合成的小干扰RNA（siRNA）对人树突状细胞（DC）共刺激分子CD80和CD86基因表达的影响。方法设计并合成了3条siRNA（siRNA1、siRNA2和siRNAc）,在脂质体的介导下转染树突状细胞,于转染后24、48、72h收集细胞,用半定量RT-PCR检测CD80和CD86 mRNA的变化,用蛋白印迹检测CD80、CD86蛋白的表达。结果转染24、48、72h后,DC CD80 mRNA均有明显减少（P〈0.01）,抑制率分别为（50.0±3.63）%、（66.8±4.12）%和（76.6±4.87）%;CD86 mRNA均有显著降低（P〈0.01）,抑制率分别为（53.0±3.70）%（、60.5±3.92）%和（73.4±4.46）%,而单纯脂质转染和siRNAc转染对CD80、CD86 mRNA表达均无影响（P〉0.05）。Western Blot结果显示转染48、72h后,siRNA1对CD80蛋白表达的抑制率为（67.3±4.80）%和（80.9±5.23）%;siRNA2后对CD86蛋白表达的抑制率为（60.7±4.15）%和（74.7±4.63）%。结论 siRNA可特异抑制树突细胞B7基因的转录和表达,为进一步研究siRNA诱导移植免疫耐受提供了理论和实验基础,为诱导器官移植免疫耐受提供了新思路和途径。     

临床血液分离大肠埃希菌株耐药性及生物被膜形成分析

目的探讨该院血流感染产超广谱酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)检出率及其对常用抗菌药物的耐药性及生物被膜形成能力。方法采用法国生物梅里埃公司的Vitek2-Compact全自动微生物分析仪进行鉴定和药物敏感性分析,采用结晶紫半定量方法检测菌株的生物被膜形成能力。结果 92株ECO临床血液分离菌株中,产ESBLs菌株53株(占57.61%),ESBLs阴性菌株39株(占42.39%)。对3类以上抗菌药物耐药ECO 73株(占79.35%),其中,产ESBLs菌株52株,占总菌株数的56.52%,占产ESBLs菌株数的98.11%。耐药率最高的为氨苄西林(94.57%),其次为头孢唑啉(71.74%)和氨苄西林/舒巴坦(67.39%);环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均在60%以上。对于临床常用的氨苄西林/舒巴坦、头孢菌素类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类的妥布霉素和单酰胺类抗菌药物,与ESBLs阴性菌株相比,产ESBLs菌株的最小抑菌浓度(MIC)值显著升高,耐药率显著升高(P<0.05)。而对头霉素类、呋喃类、氨基糖苷类的庆大霉素和阿米卡星、含酶抑制剂的哌拉西林/他唑巴坦和碳青霉烯类抗菌药物的敏感性ESBLs阳性组与ESBLs阴性组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。96.74%的ECO临床血液分离株具有生物被膜形成能力,生物被膜形成量以中量为主。结论该院ECO血液分离菌株产ESBLs比例高,生物被膜形成能力强,呈现多药耐药的特征。