活性氧诱导细胞凋亡的研究进展

活性氧(ROS)作为细胞调控中的一种信号分子,诱导细胞凋亡,目前已经为广大生命科学的学者所接受。ROS在细胞凋亡过程中扮演两种角色,作为外界诱因,ROS诱导细胞凋亡;然而当其他诱因在体内激发细胞凋亡时,ROS是这一过程中的产物,然后作为信号分子,具有调节细胞凋亡的作用,其机制可发生在凋亡过程的各环节。对ROS与细胞凋亡关系的研究进展进行综述。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和网络药理学方法探讨短梗五加改善失眠的潜在药效成分及作用机制

目的:研究短梗五加改善失眠的药效物质基础及潜在的作用机制。方法:运用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术,结合文献,对短梗五加化学成分进行分析鉴定,使用SwissADME对成分进行筛选,通过 Swiss Target Prediction数据库预测活性成分潜在靶点,GeneCards、DRUGBANK、OMIM和DisGeNET数据库搜集疾病靶点,使用VENNY软件收集成分-靶点交集,Cytoscape软件构建靶点蛋白相互作用网络,利用DAVID数据库进行GO和KEGG富集,使用微生信平台进行可视化分析。随后利用Cytoscape构建成分-靶点-通路图,运用AutoDock Vina和Pymol软件进行分子对接。进一步建立斑马鱼睡眠剥夺模型对活性成分进行验证。结果:异嗪皮啶、金合欢素、东莨菪碱内酯、丁香酸、川芎哚等16个成分为短梗五加改善睡眠药效成分,可能作用于ESR1、AKT1、EGFR、PTGS2和PPARG等靶点,成分与靶点结合能小于-4.25kJ·mol^-1的占总数94%,显示良好的结合活性。短梗五加通过雌激素、PI3K-Akt、ErbB、HIF-1等信号通路改善失眠。总提物、金合欢素、异嗪皮啶和东莨菪碱内酯均可改善失眠并具有一定的镇静作用(P＜0.01,P＜0.05)。结论:短梗五加改善失眠可能是通过多靶点、多成分起作用,本研究为产品的质量评价及深度开发提供科学依据。     

啤酒花中四氢异葎草酮诱导HepG-2细胞凋亡的机制研究

目的:研究啤酒花(Humulus Lupulus L.)中成分四氢异葎草酮(Tetrahydro-isohumulone)对肿瘤细胞HepG-2生长抑制及诱导凋亡的作用.方法:MIT法检测四氢异葎草酮对HepG-2细胞体外增殖抑制的影响;流式细胞仪分析四氢异荐草酮对HepG-2细胞的凋亡率、线粒体膜电位和活性氧生成;激光共聚焦显微镜测定细胞内[Ca2 ]i.结果:四氢异荐草酮对HepG-2的增殖具有较强的生长抑制作用,IC50为6.76μg/mL;0、5、10、20μg/mL剂量的四氢异葎草酮作用HepG-2细胞48h细胞凋亡率分别为0.1%、24.1%、69.9%,84.1%,同时线粒体膜电位降低,细胞内活性氧含量升高,细胞内[Ca2 ]i随给药剂量增加而升高.结论:四氢异葎草酮对HepG-2具有较强的生长抑制作用,并且能够诱导HepG一2细胞凋亡,其机制可能是通过升高细胞内Ca2 浓度使线粒体膜通透性增加,进而导致细胞凋亡.     

游离钙信号通路介导西兰花中异硫氰酸盐诱导细胞凋亡

目的：探讨了西兰花中异硫氰酸盐（ITCS）对体外培养的肿瘤细胞的抑制特点，并初步探讨了游离钙、活性氧水平和线粒体膜电位的变化与西兰花中ITCS诱导肿瘤细胞凋广的关系。方法：MTT法、SRB法、流式细胞仪技术结合激光共聚焦显微镜技术分析诱导凋亡作用。结果：在体外研究中，西兰花中ITCS可抑制不同来源的肿瘤细胞的生长，如人胃腺癌细胞（SGC-7901）和人肝癌细胞（HepG-2）。MTT法测得其在体外的半数抑制浓度IC50约为22．40μg／ml和31．429μg／ml。从SRB结果可看出，低浓度的H13通过抑制肿瘤细胞生长而起抗癌作用，SGC-7901和HepG-2的GL。分别为7．252μg／ml和15．824μg／ml，而高浓度的ITCS则主要通过杀死癌细胞来起到抗癌作用，对上述两种细胞的TGl50分别为382．825μg／ml和783．610μg／ml。西兰花中ITCS能够诱导细胞凋亡，并且随着ITCS浓度的加大，凋亡细胞的比例逐渐增加。采用流式细胞仪进行细胞DNA含量测定，可见在G1峰前出现一个“G1亚峰”，凋亡细胞的DNA含量随ITCS浓度的升高而增多，即呈一定的剂量依赖性。同时分析了对细胞周期的影响，结果显示ITCS可使G1期细胞的比例降低，S期细胞的比例增加，提示西兰花中ITCS阻断肿瘤细胞由S期向G2期的移行。从以上三方面的阳性结果可以认为药物作用后，细胞已发生凋亡。不同浓度的西兰花中ITCS作用于SGC-7901和HepG-2细胞24h后，发现ITCS能提高肿瘤细胞内钙离子浓度，且呈一定的剂量依赖关系。通过流式细胞仪分析，西兰花中ITCS能明显提高肿瘤细胞内活性氧的水平，并且能能明显降低肿瘤细胞内线粒体膜电位。结论：西兰花中ITCS对SGC-7901和HepG-2细胞具有明显的抗肿瘤活性。其作用机制可能与提高肿瘤细胞内钙离子浓度和增加肿瘤细胞内活性氧的产生，引起线粒体膜电位下降，进而启动细胞凋亡机制诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

啤酒花中蛇麻酮体外诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡作用研究

目的探讨啤酒花(Humulus LupulusL.)中成分蛇麻酮(Lupulone,LP)体外对人胃癌细胞SGC-7901生长抑制及诱导凋亡作用的研究。方法体外培养人胃癌细胞株SGC-7901,MTT法检测不同浓度蛇麻酮对SGC-7901细胞体外生长的影响;流式细胞仪分析蛇麻酮对SGC-7901细胞的凋亡率的影响。结果蛇麻酮对SGC-7901的生长具有较强的抑制作用,IC50为0.73μg/mL;0、0.2、0.8、3.2μg/mL剂量的蛇麻酮作用SGC-7901细胞48h细胞凋亡率分别为0.1%、7.1%、18.0%、49.3%。结论蛇麻酮对SGC-7901具有较强的抗肿瘤活性,其机制可能与其可诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

西兰花中异硫氰酸盐诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡作用及其机制的研究

目的：探讨西兰花中异硫氰酸盐(isothiocyanates,ITCS)诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡过程中的作用及其可能机制。方法：不同浓度ITCS处理人肝癌细胞HepG-2,应用MTT法检测ITCS对HepG-2细胞增殖的影响；流式细胞仪检测活性氧、线粒体膜电位(Δψm)和细胞亚二倍体凋亡峰变化情况。结果：ITCS可明显抑制HepG-2细胞增殖；15,30,60,120,240 μg·mL^-1的ITCS作用于HepG-2细胞24 h后,细胞内活性氧分别为(23.1±1.8)%,(53.3±3.3)%,(57.9±2.0)%,(79.9±3.4)%,(93.4±2.6)%；Δψm分别为(94.8±5.5)%,(91.8±5.4)%,(66.0±5.6)%,(65.5±6.6)%,(44.3±2.7)%；60,120,240 μg·mL^-1的ITCS作用于HepG-2细胞48 h后可见细胞凋亡率分别为(16.6±2.8)%,(21.9±4.4)%,(70.2±5.3)%。结论：ITCS能够通过刺激HepG-2细胞内活性氧的产生,损伤线粒体,使其膜电位下降,引起HepG-2细胞凋亡。     

不同干燥方法、贮藏年限及采收时间对青龙衣中胡桃醌的影响

探讨不同干燥方法(自然阴干、自然晒干、40℃烘干、60℃烘干)、贮藏年限(当年、1年、2年)及采收时间(6、7、8、9月)对青龙衣中胡桃醌量的影响.方法 采用HPLC法测定不同干燥方法、贮藏年限及采收时间的青龙衣药材中胡桃醌的量.结果 不同干燥方法对青龙衣药材中胡桃醌量有不同的影响,60℃烘干处理后药材中胡桃醌的量显著低于其他的方法(P＜0.01).青龙衣宜采用阴干或40℃烘干的方法干燥.青龙衣贮藏时间越长,胡桃醌的量越低.青龙衣适宜的采收时间是7～8月份果实未成熟时采收.结论 不同干燥方法、贮藏年限及采收时间对青龙衣药材中胡桃醌的量有一定影响.     

莱菔硫烷诱导人肝癌HepG2细胞凋亡与Fas/FasL途径的相关性研究

目的 研究莱菔硫烷对人肝癌HepG2细胞Fas、FasL、Bid蛋白表达的影响,探讨其诱导HepG2细胞凋亡过程中Fas/FasL途径的作用.方法 Caspase-8试剂盒检测莱菔硫烷对HepG2细胞Caspase-8活性的影响;流式细胞仪检测莱菔硫烷对HepG2细胞中Fas、FasL、Bid蛋白表达的影响.结果 莱菔硫烷10、20、40 μmol/L作用于HepG2细胞48 h,可显著升高HepG2细胞Caspase-8活性(P＜0.01);可使HepG2细胞Fas、FasL蛋白的表达显著升高(P＜0.01);莱菔硫烷20、40 μmol/L时,可显著提高Bid蛋白的表达(P＜0.01),上述作用均呈剂量相关性.结论 激活Fas/FasL途径可能是莱菔硫烷诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的重要机制之一.     

野西瓜挥发油抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的研究

目的 研究野西瓜挥发油的抗肿瘤作用.方法 采用MTT实验和SRB实验观察野西瓜挥发油对SGC-7901细胞的体外抗肿瘤作用;采用倒置荧光显微镜观察野西瓜挥发油作用后典型的细胞凋亡形态;采用流式细胞仪测定野西瓜挥发油对SGC-7901细胞凋亡及细胞周期的影响.结果 10-200 μg/mL的野西瓜挥发油作用于SGC-7901细胞72 h后均可不同程度的抑制SGC-7901细胞的增殖,其IC50为145.5μ/mL,GI50为121.32μg/mL,LC5o为900.96/μg/mL,TGI为240.55/μg/mL;作用24 h后出现典型的凋亡形态;75、150、300μg/mL的野西瓜挥发油作用24 h时出现细胞凋亡;周期分布发生改变.呈现S期阻滞.结论 野西瓜挥发油具有明显抑制SGC-901细胞增殖作用,其SGC-7901机制为诱导肿瘤细胞凋亡及改变细胞周期.     

龙葵碱药理作用研究进展

龙葵碱主要存在于茄科植物马铃薯（Solanum tuberosum）的块茎及龙葵（Solanum nigrum）的全草中。近年研究发现,龙葵碱除具有毒性作用外,还具有抗肿瘤、抗病原微生物作用。国内外学者对其药理、毒理作用及机制进行了深入研究。本文对龙葵碱药理学和毒理学研究相关进展进行综述,为其进一步的研究和应用提供参考。