血清NGAL、Cys-C、RBP联合检测对糖尿病肾损伤早期诊断的临床意义

目的 探讨血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、胱抑素C(Cys-C)和视黄醇结合蛋白(RBP)联合检测在2型糖尿病肾功能损伤早期诊断中的临床意义.方法 选择2015年11月至2016年10月西安市长安医院内分泌科就诊的220例2型糖尿病患者为观察组,根据尿微量白蛋白与尿肌酐比值(ACR)将患者分为单纯糖尿病(SDM)组83例、早期糖尿病肾病(EDN)组77例和临床期糖尿病肾病(CDN)组60例,并选择80例健康体检者为对照组.采用胶乳免疫增强比浊法检测血清Cys-C、RBP、NGAL,脲酶-谷氨酸脱氢酶法检测血清尿素(UREA),酶法检测血清肌酐(CREA),并对各组检测结果 进行比较分析.结果SDM组患者的血清NGAL、CysC、RBP、UREA与CREA检测结果与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);EDN组患者的血清NGAL、CysC及RBP检测结果与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),血清UREA与CREA比较差异均无统计学意义(P>0.05);CDN组患者的血清NGAL、CysC、RBP、CREA及UREA检测结果与对照组、SDM组及EDN组比较差异均有统计学意义(P<0.05).EDN组患者的血清NGAL、CysC、RBP阳性率分别为55.84%、59.74%、54.55%,均明显高于SDM组的19.28%、16.87%、15.66,差异均有统计学意义(P<0.05),而血清UREA、CREA阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05);CDN组患者的血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA阳性率高于EDN组和SDM组,差异均有统计学意义(P<0.05);血清NGAL、CysC、RBP在SDM组、EDN组、CDN组联合检测的阳性率分别为25.30%,68.83%,96.67%,均高于各单项检测结果的阳性率;Pearson相关性分析结果显示,血清NGAL、CysC、RBP与尿ACR检测结果之间存在正相关(r=0.65、0.62、0.58,P<0.05).结论 血清NGAL、Cys-C和RBP可作为2型糖尿病患者肾损伤早期诊断的重要指标,联合检测可提高糖尿病肾病早期诊断的阳性率,对临床识别和早期诊断糖尿病肾病有重要临床意义.     

重组人乙型肝炎病毒核糖核酸酶H基因工程菌的生物活性研究

目的：研究表达乙型肝炎病毒核糖核酸酶H(HBV—RNaseH)工程菌的发酵条件。方法：采用摇瓶发酵，研究不同宿主菌对表达HBV—RNaseH的效果；同时对培养基、诱导时期、诱导时间、初始pH等发酵条件以及质粒稳定性进行研究。结果：选用E coliBL21为宿主菌，在LB培养基中培养至A600为0．6时，诱导表达4．5h，HBV—RNaseH表达量最高达33．6％。而且重组质粒具有良好的分离稳定性和结构稳定性。结论：此发酵条件可以比较好的提高HBV—RNaseH的表达量，为发酵规模的扩大奠定了基础。     

HPLC法测定喉咽宝滴丸中黄芩苷含量

采用HPLC法测定喉咽宝滴丸中黄芩苷的含量 ,以甲醇 水 磷酸 (5 1∶4 9∶0 .2 )为流动相 ,检测波长 2 76nm ,黄芩苷在 2 .0 9～ 138μg/mL范围内线性关系良好 ,r=0 .9997,平均回收率为 97.6 9% ,RSD =2 .6 3% (n =6 ) ,方法简便、准确、灵敏     

凋亡抑制蛋白Livin-α、Livin-β的原核表达及纯化

目的:对凋亡抑制蛋白Livin的两种异构体(Livin-α和Livin-β)进行原核表达,对获得的Livin蛋白进行纯化。方法:以Hela细胞总RNA为模板,RT-PCR获得Livin-α和Livin-β基因全长cD NA序列,酶切后,插入原核表达载体pE T32a(+)的多克隆位点,经酶切、PCR鉴定、测序后,构建Livin基因异构体表达载体pE T32a(+)-Livin-α和pE T32a(+)-Livin-β。将重组质粒转入表达菌株BL21,诱导表达,收集菌液,超声碎菌,取其上清和沉淀分别进行SDS-PAGE电泳,并对获得的Livin蛋白进行纯化。结果:成功获得Livin-α和Livin-β全长cD NA序列,克隆到原核表达载体pE T32a(+)上后进行诱导表达,获得大小为55kD左右的可溶性融合蛋白,经纯化后,有效减少了杂蛋白的含量。结论:Livin基因异构体原核表达载体的构建及其融合蛋白的制备、纯化,为进一步将Livin基因的两种异构体蛋白应用于抗体制备以及各类肿瘤的临床辅助诊断研究奠定了基础。     

112例全血细胞减少型重症巨幼细胞性贫血骨髓象分析

巨幼细胞性贫血（巨贫）为各种原因导致脱氧核糖核酸合成障碍而引起的大细胞性贫血，部分患者表现为严重的全血细胞减少，而全血细胞减少型重症区贫的报道不多，易与其他疾病相混淆。我们收集经临床确诊的112例并对其血象及骨髓象检查结果进行了分析。材料和方法巨贫112例，男5     

人孕中期羊水及血清微量元素的测定

<正> 1838年 Rees 首先报道人类羊水中含有钠、氯、尿素等。1919年 Uyeno 对羊水的化学成份与物理特征作了详细报道。1960年,Mischel 报道羊水中除了宏量元素钠、钾、钙、镁等以外,还测到微量元素     

凋亡抑制蛋白Livin 两种异构体原核表达载体的构建及融合表达

 目的 构建凋亡抑制蛋白Livin两种异构体（Livinα和β）的原核细胞表达载体pET32a（＋）-livinα和pET32a（＋）-livinβ。方法 设计合成扩增Livin基因异构体全长cDNA序列的特异性PCR引物,以Hela细胞总RNA为模板,RT-PCR获得Livin基因异构体全长cDNA序列,用限制性内切酶BamHⅠ和HandⅢ双酶切取所需目的片段,并插入原核表达载体pET32a（＋）的多克隆位点,经酶切、PCR鉴定,并经过测序证实后,构建成为Livin基因异构体表达载体（pET32a（＋）-livinα、β）。将重组质粒转入表达菌株BL21,诱导表达收集菌液,超声碎菌,取其上清和沉淀分别进行SDS-PAGE电泳。结果 成功获得Livinα和β全长cDNA序列,并克隆到原核表达载体pET32a（＋）上;成功获得大小为55kd左右的融合蛋白。结论 Livin基因两种异构体原核表达载体的构建及其融合蛋白的制备,为进一步研究Livin异构体功能及在肿瘤细胞中的抗凋亡效应奠定了基础。此蛋白也可用于进一步抗体制备、免疫鉴定和诊断等研究。     

pEGFP-BLCAP真核表达载体的构建和鉴定

目的：构建真核表达载体pEGFP—BLCAP并转染骨肉瘤细胞SOSP—M。方法：从培养的人骨肉瘤细胞系SOSP—M细胞中提取总RNA，经RT—PCR获得BLCAP基因的cDNA，测序正确后插入真核表达载体pEGFP—C2中。构建的重组质粒经脂质体介导转染SOSP—M细胞，经观察荧光蛋白表达和Western blot鉴定目的蛋白在转染后的SOSP—M细胞中的表达情况。结果：RT—PCR成功地扩增出一条约280bp的片段，经限制性内切酶分析和DNA序列测定证实目的基因cDNA已插入重组质粒；荧光显微镜下观察到转染后的SOSP—M细胞发出较强绿色荧光，Western blot证明BLCAP能以融合蛋白的形式在SOSP—M细胞中获得表达。结论：构建了真核表达载体pEGFP—BLCAP并成功表达目的蛋白。     

金天格胶囊治疗老年骨质疏松症的临床体会

目的确认金天格胶囊在治疗老年骨质疏松症方面的效果。方法采用分组给药,观察疗效,计算出总有效率。结果金天格胶囊治疗老年骨质疏松症有效率达92%以上。结论作为天然虎骨的代用品,人工虎骨粉金天格胶囊对治疗老年骨质疏松症有较好的临床疗效。