重组pcDNA 3.0-WWOX构建对胆囊癌细胞表达及△Ψm的影响

目的体外构建及鉴定Pc DNA3.0-WWOX真核表达载体,探讨过表达WWOX对人胆囊癌细胞WWOXm RNA表达、蛋白表达及跨膜电位(△Ψm)的影响.方法提取人胆囊癌细胞总RNA,RT-PCR反应合成WWOX的c DNA,PCR产物回收纯化.目的基因WWOX和pc DNA3.0载体经限制性内切酶ECORⅠ和XhoⅠ酶切,将双酶切WWOX片段与pc DNA 3.0载体在T4 DNA连接酶的作用下进行连接重组.pc DNA 3.0-WWOX重组质粒转化后,提取质粒经双酶切鉴定及测序鉴定.将pc DNA 3.0-WWOX重组质粒转染人胆囊癌GBC-SD细胞,应用RT-PCR、Western Blot检测WWOX基因的表达水平、JC-1染色检测胆囊癌细胞线粒体跨膜电位(△Ψm)变化.结果成功构建了pc DNA3.0-WWOX重组载体,经测序DNA序列与Gene Bank中WWOX序列一致.成功转染pc DNA3.0-WWOX重组质粒至胆囊癌GBC-SD细胞中.RT-PCR及Western blot结果显示:胆囊癌GBC-SD细胞转染pc DNA3.0-WWOX重组质粒48 h后pc DNA-3.0-WWOX组灰度比值明显高于各对照组(P<0.05),对照组间m RNA表达量差异无统计学意义(P>0.05).pc DNA3.0-WWOX组蛋白表达灰度比值均明显高于各对照组(P<0.05),对照组间蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05).pc DNA3.0-WWOX组细胞线粒体内绿色荧光信号较对照组增高(P<0.05),而对照组间细胞线粒体内绿色荧光信号差异无统计学意义(P>0.05).结论体外成功构建了Pc DNA3.0-WWOX重组载体,顺利进行了重组载体的转化和转染实验.靶向Pc DNA3.0-WWOX重组载体可有效抑制胆囊癌细胞WWOXm RNA降解,促进其蛋白的表达,同时有效促进细胞的早期凋亡.WWOX可能参与线粒体依赖的凋亡途径调控胆囊癌细胞的生长.     

500例应用冻干人用狂犬病纯化疫苗（Vero细胞）及加用人狂犬病免疫球蛋白注射预防狂犬病临床观察

息县卫生防疫站门诊对近1年内500例动物咬伤患者免疫预防注射后，进行免疫效果临床观察，寻求一种安全有效的暴露后狂犬病预防措施。方法：按暴露后免疫接种程序和加用人狂犬病免疫球蛋白注射方法进行。疫苗选择：辽宁生物技术公司生产冻干人用狂犬病纯化疫苗(Veto细胞)．深圳市卫武光明生物制品有限公司生产人狂犬病免疫球蛋白。结果：临床观察500例中无1例发病，抗体检测阳性率99．2％(496／500)。结论：冻干人用狂犬病纯化疫苗(Veto细胞)具有免疫原性好，效价高，稳定性好．抗体产生早等优点。在狂犬病预防中，人狂犬病免疫球蛋白和冻干人用狂犬病纯化疫苗(Veto细胞)联用，取长补短．可谓是理想的预防措施。     

甲状旁腺移植临床及实验研究新进展

经过国内外学者多年来的不断探索,甲状旁腺移植取得了较快发展,相对其他组织器官移植,甲状旁腺移植具有供体组织来源广泛、手术方式多样而术后并发症相对较少的特点,为甲状旁腺机能减退症患者提供了一种永久治愈的方法。鉴于国内外临床及实验研究有关甲状旁腺移植手术方式、组织来源、围手术期处理等方面各异,本文通过阅读大量国内外文献结合临床实际,现对甲状旁腺移植中的各个环节进行系统综述,为指导临床实际应用提供丰富的理论依据。     

血管内皮生长因子及骨形态发生蛋白2对成骨细胞生长的促进作用

目的研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）以及骨形态发生蛋白2（bone morphogendtic protein 2,BMP-2）对成骨细胞增殖的调节作用。方法提取人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）并使其分化为成骨细胞,分别添加不同浓度的VEGF和BMP-2进行药物干预,用四甲基偶氮唑盐（MTT）法研究成骨细胞的增殖率。结果两组干预组的吸光度（A）值与对照组的A值相比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,对成骨细胞增殖的调节作用均随剂量和时间变化而改变,两组调节作用的最佳时间均为72 h左右。两组最佳作用浓度分别为：BMP-2为1.8×10-9 mol/L,对成骨细胞的增殖率达179.59%;VEGF为1×10^-8 mol/L,其增殖率达189.80%。结论 VEGF对成骨细胞增殖的促进作用不亚于BMP-2。     

胰十二指肠切除术48例临床分析

目的探讨胰十二指肠切除术的临床疗效.方法回顾性分析昆明医学院第二附属医院2002年10月至2010年10月间行胰十二指肠切除术48例的临床病例资料.结果全组病例无手术死亡.术前接受减黄治疗16例,加行空肠造瘘术18例;术后病检胰头癌8例,胆总管下段癌7例,十二指肠乳头癌12例,壶腹周围癌10例,慢性胰腺炎5例,胆总管下段腺瘤2例,十二指肠管状腺瘤1例;术后胰漏3例,腹腔出血1例,消化道出血3例,胃瘫4例,术口裂开1例;统计学分析提示消化道重建方式与并发症的发生之间差异无统计学意义（P〉0.05）;应用空肠造瘘可缩短术后肠功能恢复时间及术后住院时间（P〈0.05）;合并糖尿病者术后胃瘫高发（P〈0.05）.结论围手术期的完善处理对于胰十二指肠切除术的疗效至关重要;不同消化道重建方式的术后并发症发生率无差别.附加空肠造瘘有利于患者术后恢复.合并糖尿病患者术后容易出现胃瘫.     

核转录因子Snail对肝内胆管癌细胞HCCC9810侵袭和迁移能力的影响北大核心CSCD

目的探讨核转录因子Snail对肝内胆管癌细胞HCCC9810侵袭和迁移能力的影响。方法采用小干扰RNA(si-RNA)技术靶向沉默肝内胆管癌细胞HCCC9810中Snail的表达,通过Transwell和划痕实验检测肝内胆管癌细胞侵袭和迁移能力,采用免疫印迹法检测si-RNA处理前后的胆管癌细胞上皮间质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin表达情况。结果 Transwell结果显示靶向沉默Snail后HCCC9810细胞的迁移能力下降(P=0.005),侵袭能力减弱(P=0.007),细胞划痕结果表明细胞迁移能力同样降低(P=0.017),免疫印迹结果表明沉默Snail后E-cadherin表达上调(P=0.004),Vimentin表达下调(P=0.001)。结论 Snail可诱导HCCC9810细胞上皮间质转化,增强其侵袭和迁移能力。     

从新型冠状病毒肺炎现有期刊文献看外感热病的学术争鸣

本文梳理新型冠状病毒感染的肺炎现有期刊文献中有关外感热病的学术争鸣,主要存在"伤寒与温病之争"（寒与温之争）、"温病与温疫之争"（温与瘟之争）、"湿热与温热之争"（湿与温之争）、"膜原学说"五运六气"预测学说及"伏邪与新感"等争议。     

草果古今应用考略及其防治疫病作用

草果是一种中国传统的药食同源植物,常作为香辛料使用,而对其药用价值重视不高,草果除临床应用还有重要的防治疫病价值。现通过查阅古代本草及现代文献,以探究草果本草古今应用规律。主要以朝代为顺序阐述历代医家对草果认识的演变发展,并结合现代文献深入探索,重点阐述草果功效、性味归经、使用注意及现代药理药化研究结果,从治疟、治疫、治脾、治胃湿积滞4个方面归纳草果功效,总结临床常见药对及现代临床应用,并从中药、方剂以及现代运用角度认识草果防治疫病作用。     

老年人执行功能对衰弱的影响：一个有调节的中介模型

目的 探讨老年人执行功能与衰弱的关系及作用机制。方法 2021年6-12月便利抽样选取两所社区卫生服务中心符合标准的老年人243名,采用Fried衰弱表型量表、连线测验B部分、老年人人体适应能力量表和休闲活动问卷对其进行调查。结果 老年人执行功能可正向预测衰弱(P<0.001);适应能力可显著负向预测衰弱(P<0.001),且在执行功能与衰弱间起到中介作用;休闲活动参与度在适应能力与衰弱间发挥调节作用(P<0.01),当参与休闲活动较多时,适应能力对衰弱的预测作用较弱,反之增强。结论 老年人适应能力中介了执行功能对衰弱的影响,且这一中介作用受到休闲活动参与度的调节。     

瘦素及其长受体在胆囊癌中的表达和意义

目的探讨瘦素及其长受体在胆囊癌中的表达和意义.方法选取昆明医科大学第二附属医院2008年1月至2014年10月收治的胆囊癌病例20例及同期收治的胆囊结石患者20例,应用免疫组化检测20例胆囊癌患者的胆囊癌及癌旁组织(距胆囊癌组织边缘2cm以上)及20例胆囊结石患者的胆囊壁组织中瘦素及其长受体的表达,图像分析其表达情况及差异.结果胆囊癌组织中瘦素及其长受体的表达显著高于其在癌旁组织及胆囊结石的胆囊壁组织中的表达(P＜0.05);癌旁组织及胆囊结石的胆囊壁组织均有瘦素及其长受体表达,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论瘦素及其长受体与胆囊癌的形成相关,可能成为临床预测胆囊癌的一个指标.