糖尿病大鼠局灶脑缺血AGEs及其受体的表达

目的 观察晚期糖基化终产物(Advanced glycation endproducts,AGEs)及其受体(Recepter of advanced glycation endproducts,RAGE)在糖尿病大鼠局灶脑缺血中的表达.方法 雄性Wistar大鼠50只,随机取25只应用链脲佐菌素(STZ)法制备DM模型后,正常组与DM组各取20只,应用线栓法制备局灶脑缺血模型即大脑中动脉阻塞(MCAO)模型.根据缺血不同时间又分为单纯缺血组(MCAO组)1、3、6、24 h组,DM局灶脑缺血组(DM+MCAO组)1、3、6、24 h组,每组5只.采用SP免疫组化检测AGEs、 RAGE在缺血不同时间脑组织中的表达.结果 正常对照组有较少AGEs和 RAGE表达,DM组及MCAO组表达增加,DM+MACO组明显增加,且在缺血1 h逐渐开始增加,6 h略有下降,24 h表达再次增加.结论 AGEs及 RAGE的表达参与了DM大鼠局灶脑缺血损伤.     

以神经系统症状为主要表现的双硫仑样反应

近年来，随着头孢菌素类抗生素在临床上广泛应用，其不良反应已引起临床工作者的关注，有关双硫仑样反应也逐渐被广大医生认识。相关病例虽已见报道，但以神经系统症状为首发或主要表现的双硫仑反应尚未见报道，可能还未引起神经科医生高度重视。现就本人经治的、以神经系统症状为主要表现的双硫仑样反应的诊治体会总结如下。旨在提醒大家重视药物不良相互作用，避免误诊误治。     

大鼠脑源性神经营养因子的克隆及原核重组表达载体的构建

目的:构建重组表达载体pGEX-脑源性神经营养因子(BDNF),探讨其原核表达BDNF的可行性。方法:大鼠BDNF进行密码子优化,人工合成BDNF的全基因序列,经回收、纯化、酶切后连接到pGEX原核表达载体中,将重组质粒pGEX-BDNF转化大肠杆菌BL21细胞中,筛选阳性克隆,经IPTG诱导表达后,利用ELISA方法鉴定其表达的活性。结果:PCR鉴定及测序显示BDNF序列完全正确,BDNF基因的克隆和表达载体构建成功,IPTG诱导表达目的蛋白经ELISA检测,其表达的目的蛋白具有一定的活性。结论:经密码子优化后经人工合成得到BDNF基因片段并成功构建pGEX-BDNF重组表达载体,具有一定的生物活性。     

诺易平治疗急性脑梗死的临床研究

目的观察诺易平(低分子肝素)治疗急性期不同时间窗内脑梗死的疗效及其对出、凝血时间、血液流变学的影响.方法将80例急性脑梗死的住院病人随机分为诺易平治疗组及对照组,对照组采用常规疗法,而治疗组在常规治疗的基础上加用诺易平0.25ml,2次/d,皮下注射.连用10d.并对两组的临床疗效、出凝血时间及血液流变学分别进行观察分析.结果治疗组疗效明显优于对照组(P＜0.05),且时间越早,治疗效果越好.诺易平不影响病人的出、凝血时间,且能降低血液流变学的相关指标.结论诺易平治疗急性脑梗死安全有效.     

单克隆天然抗角蛋白抗体3B4抑制白念珠菌芽管生成的研究

目的 观察单克隆天然抗角蛋白抗体3B4与白念珠菌结合及对芽管生成的影响.方法 采用ELISA和流式细胞仪检测单克隆天然抗角蛋白抗体3B4与白念珠菌结合,并将抗体与真菌共孵育,检测白念珠菌芽管生成的变化.结果 ELISA和流式细胞仪检测均发现3B4可以与白念珠菌结合;相对于同型对照组,3B4作用组真菌芽管生成率显著下降,两组差异有统计学意义.结论 单克隆天然抗角蛋白抗体3B4可以与白念珠菌结合并抑制其芽管生成,提示天然IgM在机体抗真菌天然免疫中可能具有一定的作用.     

天然抗角蛋白自身抗体产生细胞的检测

目的明确产生天然抗角蛋白自身抗体(anti-keratin autoantibody,AK auto Ab)的B细胞的类群和定位。方法取SPF级C57BL/6小鼠的腹腔细胞及脾细胞,进行体外培养,采用ELISA方法分析培养细胞分泌AK auto Ab的水平,ELISPOT方法分析分泌AK auto Ab的细胞数。结果腹腔细胞中分泌AK auto Ab的细胞数远多于脾细胞,其分泌的抗体滴度也显著高于脾细胞。结论AK auto Ab主要来源于腹腔B细胞,B1细胞可能是产生AK auto Ab的主要细胞。     

碳离子放射治疗泪囊泪腺肿瘤的剂量学研究

目的 比较碳离子治疗泪囊泪腺肿瘤相对于光子放疗的剂量学差异。方法 利用上海市质子重粒子医院治疗的10例术后残留的泪囊腺肿瘤患者CT图像,重新制定碳离子计划,光子容积调强计划（VMAT）与固定野光子调强计划（IMRT）,所有患者处方均为给予临床靶区54 Gy相对生物学效能（RBE）/18次,并给予临床加量靶区同步加量至63 Gy（RBE）/18次。在计划靶区覆盖相似情况下,比较正常组织受量。结果 在计划靶区覆盖差异无统计学意义的情况下,与光子VMAT和与IMRT相比,碳离子计划患侧与健侧的眼球平均剂量、视神经近似最大剂量（D_2%）与平均剂量均降低（患侧：t=7.35、3.79、4.66、8.48、2.52、2.76,P<0.05;健侧：t=3.87、10.49、9.16、4.43、6.53、5.12,P<0.05）;脑组织平均剂量由（5.65±3.58）和（5.76±2.09）Gy（RBE）降至（0.81±0.90）Gy（RBE）,差异具有统计学意义（t=6.76、17.33,P<0.05）。结论 与光子VMAT与IMRT相比,碳离子计划能有效降低泪囊泪腺肿瘤周围视觉器官受照体积与剂量,具有降低放疗不良反应的潜在优势。     

血清中CRP、IL-6变化及与颈内动脉内膜形态学改变的临床意义

目的:检测轻度认知功能障碍(mi l d cogni t i ve i mpai r ment,MCI)患者血清中C反应蛋白(C-r eact i ve pr ot ei n,CRP)、白细胞介素6(i nt er l euki n-6,I L-6)的含量,以此探讨血管内皮功能与颈内动脉颅外段动脉硬化之间的关系。方法:通过MMSE量表检测分为正常对照组、轻度认知障碍组两组,应用彩色多普勒超声对两组患者行颈内动脉超声检查,观察两组患者动脉硬化的程度;应用比浊法和ELISA法分别检测两组CRP、IL-6的含量。结果:轻度认知障碍组动脉硬化程度重于对照组,其血清CRP、IL-6的含量明显高于对照组,P<0.05。结论:动脉硬化较重的患者血管内皮炎性反应较明显,其认知功能损伤也较重。     

大鼠不同时期高脂饮食对子代糖脂代谢的影响及机制研究

目的 探讨Sprague-Dawley母鼠不同时期高脂饮食对子代糖脂代谢的影响及相关机制。 方法 根据孕前及孕期哺乳期饮食的不同,将母鼠随机分为4组（n=9）：CC组（孕前、孕期哺乳期均正常饮食）、HC组（孕前高脂饮食、孕期哺乳期正常饮食）、CH组（孕前正常饮食、孕期哺乳期高脂饮食）、HH组（孕前、孕期哺乳期均高脂饮食）;子代生后3周断奶后,全部给予正常饮食。记录母鼠孕前、孕期体重及仔鼠体重。取各组幼年期（3周）、成年期（12周）雄性仔鼠,检测空腹血糖（glucose,GLU）、胰岛素（insulin,INS）及肝脏三酰甘油（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）水平,计算胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR）、糖耐量试验（glucose tolerance test,GTT）及胰岛素耐量试验（insulin tolerance test,ITT）的曲线下面积（area under the curve,AUC）;取肝脏组织行苏木精-伊红染色和油红O染色,观察肝脏脂质沉积;检测肝脏糖脂代谢关键基因IR、IRS、AKT和FASN、SREBP1c、PPARα的mRNA及其蛋白表达水平。 结果 孕前高脂饮食组（HC组、HH组）母鼠体重较正常饮食组（CC组、CH组）显著增加（P<0.001）;HC组、CH组、HH组母鼠孕期增重较CC组显著增加（P<0.001）。生后3周时,HC组、CH组、HH组的仔鼠体重、肝脏TG及TC含量,以及FASN、SREBP1c、PPARα的mRNA及其蛋白表达水平均较CC组显著增加（P<0.05）,肝脏脂质沉积增加,其中HH组增加最显著;HH组的空腹GLU及INS水平、HOMA-IR、GTT-AUC、ITT-AUC及肝脏p-IRS蛋白表达水平均较CC组显著增加,肝脏IR、IRS的mRNA及其蛋白表达水平均较CC组显著降低（P<0.05）。生后12周时,HC组、CH组、HH组的仔鼠体重、空腹GLU及INS水平、HOMA-IR、GTT-AUC、ITT-AUC、肝脏TG及TC含量、p-IRS蛋白表达水平,以及FASN、SREBP1c、PPARα的mRNA及其蛋白表达水平均较CC组显著增加（P<0.05）,肝脏脂质沉积增加,其中HH组增加最显著;HC组、CH组、HH组IR、IRS、AKT的mRNA水平均较CC组显著降低,IR、IRS、p-AKT蛋白表达水平均较CC组显著降低（P<0.05）。HC组与CH组在不同时期的糖脂代谢水平未见显著性差异（P>0.05）。 结论 大鼠怀孕前后不同时期的高脂饮食对子代的糖脂代谢具有不同的影响,孕前、孕期、哺乳期全程高脂饮食对子代糖脂代谢影响最大;大鼠高脂饮食对其子代糖脂代谢的影响考虑与糖脂代谢基因的表达改变有关。 引用格式:     

大鼠皮层神经元原代培养、鉴定及氧糖剥夺模型的建立

目的 原代培养和鉴定大鼠皮层神经元,并建立大鼠皮层神经元氧糖剥夺(OGD)模型.方法 采用酶消化法和机械分离法相结合进行大鼠神经元原代培养,采用抗NSE免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hank液及缺氧培养罐行OGD,台盼蓝染色及LDH漏出率检测细胞损伤程度.结果 神经元培养至第6天,NSE染色阳性细胞为86.32%±2.64%;神经元经不同时长的OGD处理后,台盼蓝染色呈现不同形态;OGD 60 min时,神经元LDH漏出率较对照组明显增加(P<0.05).结论 成功完成大鼠皮质神经元原代培养,神经元在培养第6天可用于模型制备,成功建立神经元OGD模型.