胰腺癌中K-ras基因突变检测及其临床意义的初步探讨

目的 用基因测序法检测胰腺癌患者K-ras基因突变位点,初步探讨K-ras基因对胰腺癌检测的临床意义.方法 筛选20例来自肝胆外科胰腺相关疾病患者手术标本,经过病理切片证实后分成良性病变对照组和胰腺癌恶性病变组共2组,每组各10例,采用普通的PCR方法扩增人类基因组中的K-ras基因,并采用ABI 3100 DNA测...     

分子生物实验室带教体会

随着人类基因组计划的启动,现代医学和生命科学突飞猛进的发展,生物化学与分子生物学已成为高等课程教学中必不可少的部分,与此同时,分子生物学检验也已成为检验医学的重要组成部分。目前,基因检测已成为临床诊断和鉴别疾病的主要手段。因此,建立规范化的分子生物实验室,开展更多的有临床意义的基因检测项目,培养更多的分子生物学领域人才已然成了各医院及医学院工作的核心部分。现根据近年来对该院检验科分子生物实验室实习生及见习生的带教工作,总结了几点带教体会。     

淋巴细胞VCS参数辅助诊断活动性肺结核的临床应用研究

目的研究通过DxH800血细胞分析仪的VCS技术分析淋巴细胞在活动性肺结核中的形态学变化,评价其在辅助诊断活动性肺结核中的价值。方法收集重庆地区活动性肺结核患者97例,潜伏性结核113例和体检健康者101例(健康对照组),采用DxH800血细胞分析仪对淋巴细胞VCS参数进行检测,并对各参数的受试者工作特征曲线(ROC曲线)的曲线下面积进行分析。结果淋巴细胞平均体积(MLV)及其标准差(MLV-SD)、淋巴细胞平均导电率标准差(MLC-SD)、中角度光散色标准差(MALS-SD)、高中角度光散色标准差(UMALS-SD)、低中角度光散色标准差(LMALS-SD)、低角度光散射(LALS)及其标准差(LALS-SD)、轴向光损耗测量标准差(AL2-SD)在活动性肺结核组显著高于潜伏性结核组和健康对照组(P<0.05);活动性肺结核组的MALS、LMALS明显低于潜伏性结核组和健康对照组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,MLV-SD、MLC-SD、UMALS-SD、LALS-SD、AL2-SD曲线下面积分别为0.775、0.900、0.802、0.860、0.785,同时测量这5个参数获得曲线下面积高达0.920,其灵敏度为79.40%,特异度为92.90%。结论淋巴细胞VCS多个参数可辅助诊断活动性肺结核,且检测方便易行,可为临床诊断活动性肺结核提供帮助。     

检测淋病柰瑟菌、沙眼衣原体、解脲支原体的临床方法评价

目的：评价Taqman技术检测临床标本中主要性病病原体的应用价值。应用：Taqman技术，常规PCR技术及培养法检测100份性病科门诊患者生殖泌尿道拭予标本，比较3种方法检测淋病票瑟菌（NG）、沙眼衣原体（CT）、解脲支原体（Uu）的灵敏度。500份性病科门诊患者生殖泌尿道拭子标本同时经Taqman技术及常规PCR技术检测，结果不符者使用培养法验证，以比较Taqman技术及常规PCR技术的特异性。结果：在100份临床标本检测中，Taqman技术，常规PCR及培养法检出阳性率分别为41％，35％，21％，在500份送检标本中，Taqman技术检出阳标本204份。常规PCR检出性标本181份，其中结果不符的41例分标本经重复培养验证。37例与Taqman技术测结果相符。结论：Taqman技术具有良好的敏感性和特异性，集PCR扩增，杂交及荧光自动化检测于一体，实验过程简便，快速，易于质控，是检测性病病原体的有效方法。     

神经营养因子治疗脊髓损伤的研究进展

神经营养因子治疗脊髓损伤的研究进展邓少丽１廖维宏１神经营养因子家族的居员包括神经生长因子（ＮＧＦ）、脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）、神经营养素Ⅲ（ＮＴ－３）、神经营养素Ⅳ／Ⅴ（ＮＴ－４／５）及新近发现的神经营养素Ⅵ（ＮＴ－６）等。它们在体内和离体情况...     

Taqman技术检测重庆地区2001年度NC、CT、UU的结果分析

目的：调查2001年度重庆地区淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)感染情况。方法：用Taqman技术检测2600例重庆地区性病科患者泌尿生殖道标本NG—DNA、CT—DNA、UU—DNA，观察这三种主要性病病原体的感染率及年龄、性别分布。结果：在2600份临床标本检测中，淋球菌感染率为11．00％、沙眼支原体感染率为15．11％、解脲支原体感染率为8．23％，CT、UU混合感染率为1．73％。男性感染者1846例，女性感染者754例，男女患病比例为2．5：1。性传播疾病患者年龄分布从15岁～60岁以上不等，平均26．4岁。结论：重庆地区性传播疾病中以非淋球菌性泌尿生殖道炎为主，男性患者多于女性，且年龄有年轻化趋势。     

非对称二甲基精氨酸测定在急性冠脉综合征中的临床应用价值

目的 探讨血浆非对称二甲基精氨酸（ADMA）浓度与急性冠状动脉综合征（ACS）及其不同亚组之间的相关性,以及对ACS的早期诊断价值.方法 将随机选择的102例ACS患者根据临床诊断、心电图检查及冠状动脉造影结果,分为不稳定型心绞痛（UA）组（51例）、非ST段抬高性心肌梗死（NSTEMI）组（27例）和ST段抬高性心肌梗死（STEMI）组（24例）,其中NSTEMI组和STEMI组又同属于急性心肌梗死（AMI）组;对照组（24例）为同期冠状动脉造影正常的患者.通过酶联免疫分析法（E LISA）测定血浆ADMA含量.结果 ACS组血浆ADMA浓度显著高于对照组,血浆ADMA浓度在UA和AMI两组间差异无统计学意义.ADMA的ROC曲线的曲线下面积AUC为0.813（0.7 ＜A ＜0.9）,cut-off值为5.28μg/L.结论 UA、NSTEMI、STEMI三组中血浆ADMA浓度皆升高,且有组间差异,血浆ADMA浓度对ACS有中等水平的诊断价值.     

1种检测基因点突变的新型MLP-RT-PCR技术构建

目的构建1种检测基因点突变的新型MLP-RT-PCR技术。方法将多重连接探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术与实时PCR技术相结合,优化杂交和连接反应条件,建立MLP-RT-PCR反应步骤。设计检测HBV耐药相关基因5个突变位点的4类MLPA探针,根据反应特异性筛选出高特异性探针。同时对5个突变位点进行检测,考察该方法的特异性。检测不同浓度突变株的样本考察该方法的灵敏度。结果统一优化了各个位点的探针反应条件,提高了检测通量;选择单个错配碱基的MLPA探针,可提高检测特异性,5个突变位点检测之间无交叉反应;该方法的扩增效率可达99%～105%,可检测最低0.1%突变率的样本。结论成功构建了检测基因点突变的新型MLP-RT-PCR技术,该方法可在1个反应管中同时检测HBV耐药相关基因的5种突变形式,1次检测时间为4～5 h,为临床提供1种能够快速检测HBV耐药相关基因点突变的方法。     

检验医学网络教学资源库的建设与应用

检验医学是指通过实验检测诊断疾病的基础理论和方法，它是一门重要的临床与基础医学间的桥梁学科，也是临床医学与实验医学研究都必须具备的一门独立学科。随着高校校园网络建设的发展，网络教学也越来越得到广泛的应用。网络教学极大地颠覆了传统教学的模式，提高了学生的自主性学习能力和独立思考能力，成为仅次于传统教学的一种重要教学方式。     

BCMA基因5'上游序列定点删除突变对启动子活性的影响

目的 探索BCMA基因5]上游序列-24～-26住点删除突变对启动子活性的影响,为进一步研究BCMA基因的表达调控机制提供实验依据.方法 设计一对突变引物,采用定点删除技术,删除BCMA基因5'上游序列-24～-26住点,电转1558L细胞检测荧光素酶的表达,观察荧光素酶相对活性.结果 成功删除BCMA基因-24～-26"AAA".启动子活性明显下降.结论 BCMA基因5'上游序列-24～-26住点可能是RNA聚合酶识别的重要位点.也可能为重要转录因子结合位点.