乙肝患者血清中HBV C基因启动子变异与病毒含量及前S1抗原的关系

目的 研究HBV C基因启动子(Basic Core Promoter，BCP)基因变异与前S1(Pre-S1)抗原的关系以及BCP基因变异与HBV DNA含量的关系。方法用PCR-微板核酸杂交ELISA技术检测94例HBeAg阳性乙肝患者的BCP中nt1762A-T和nt1764G-A的基因突变，酶联免疫吸附分析(ELISA)检测Pre-S1抗原，PCR荧光定量技术检测HBV DNA。结果在94例HBeAg阳性乙肝患者的血清中，Pre-S1抗原阳性有65例，其中BCP阳性51例，BCP变异率为78．5％；Pre-S1抗原阴性有29例，其中BCP阳性23例，BCP变异率为79．3％。BCP基因突变血清中HBV DNA拷贝数明显高于非BCP基因突变血清中HBV含量。结论 在e抗原阳性乙肝患者中，Pre-S1抗原的存在与BCP的变异无相关性，但BCP基因变异与HBV DNA拷贝数明显相关，可反映乙肝病情的严重程度及其愈后、转归。     

如何培养外科实习医生

本文讨论外科实习的重要性,如何做到外科实习理论和实践的结合,阐述外科实践和外科操作在外科实习中的重要性。培养外科实习医生临床科研能力是外科实习的重要部分。     

实验诊断学器官系统化教学模式探讨

国际上医学教学课程学科间的整合已逐渐形成一种趋势,以“器官系统为中心”的教学模式体现了学科的延续性、综合性,有利于医学生综合思维能力的培养［1‐2］。实验诊断学作为基础医学和临床医学的桥梁学科,在器官系统化教学模式中的设置安排和实施方法尚存争议,现将本校已开展的实验诊断学器官系统教学模式进行探讨。     

检验标本不同保存温度和时间对某品牌全血细胞计数的影响

目的研究静脉血标本存放温度和时间对Sysmex XN-9000血液分析仪全血细胞计数结果的影响。方法收集200例健康体检人群的静脉血标本并立即测定全血细胞计数基准值,然后将每例标本等分为3份,按保存温度分为冷藏保存组(4℃)、室温保存组(25℃)、水浴组(37℃),使用Sysmex XN-9000血液分析仪分别在采集标本后3、6、24h检测3组标本白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、红细胞分布宽度(RDW)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞平均体积(MCV)、电阻抗法血小板计数(PLT-I)、荧光通道血小板计数(PLT-F)、平均血小板体积(MPV)等指标,比较3种保存方法在不同时间内各项指标变化情况。结果与采血后立即测定基准值相比较,在采血3h后,水浴组的RDW和PLT-I发生明显变化(P0.05);在6h后,室温保存组RDW、MCHC和MCV发生明显变化(P0.05),冷藏保存组的MCHC和MCV发生明显变化(P0.05),水浴组的RBC、RDW、MCHC、MCV和PLT-I发生明显变化(P0.05);在24h后,室温保存组RBC、RDW、MCHC、MCV和PLT-I均发生明显变化(P0.05),冷藏保存组的MCHC、MCV和PLT-I发生明显变化(P0.05),水浴组除MPV外,其余各项指标均发生明显变化(P0.05)。结论静脉血标本保存温度和保存时间会对Sysmex XN-9000血细胞分析仪测定全血细胞计数的准确性造成影响,工作中应保证全血标本在采集后3h内尽快测定,未能及时检测的标本应置于4℃冷藏环境中保存。     

重庆地区汉族人群HLA-A、B、DRB1、DQB1等位基因多态性的研究

目的研究重庆地区人群HLA—A、B、DRB1和DQB1位点等位基因的多态性特点。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）技术对1664名重庆籍健康人进行HLA—A、B、DRB1、DQB1等位基因的低分辨分型,并与国内其他地区汉族人群进行比较。结果本次研究共检出HLA—A、B、DRB1、DQB1位点等住基因62种,其中A位点14种,B位点27种,DRB1位点13种,DQB1位点8种。A位点中A＊11（34．62％）、A＊02（28．81％）、A＊24（14．93％）、A＊30（5．53％）为重庆人群的优势基因。B位点中B＊46（14．92％）〉B＊40（12．96％）〉B＊13（12．39oA）〉B＊51（7．26oA）。DRB1位点中,频率最高的为DRB1＊09（15．65％）,其次为DRB1＊12（14．78％）、DRB1＊14（14．49％）、DRB1＊04（14．49％）。DQB1位点中,频率最高的为DQB1＊07（26．04％）,其次为DQB1＊05（19．94％）、DQB1＊09（15．51％）。与其他地区不同人群相比,HLA—A、B、DRB1、DQB1各位点等位基因的分布均有显著的差异。结论重庆地区人群的HLA-A、B、DRB1、DQB1位点等位基因符合南方汉族人群分布特点,具有复杂的多态性,中国各地常见的基因均有分布,白血病及其他器官移植患者在重庆不难找到合适的供者。     

小鼠BCMA基因启动子活性研究

目的:探索B淋巴细胞成熟抗原(BCMA)基因5′上游序列的启动子活性, 为进一步研究BCMA基因的表达调控机制提供实验依据.方法:构建由BCMA基因5′上游-820～ 145、 -607～ 145、 -359～ 145、 -157～ 145、 -93～ 145 5个片段驱动的荧光素酶报告载体pGL3-B820、 pGL3-B607、 pGL3-B359、 pGL3-B157、 pGL3-B93, 通过转染J558L、 293T、 HeLa细胞检测荧光素酶的表达, 观察荧光素酶相对活性.结果:5种5′删除体的转录激活性由大到小为pGL3-B157>pGL3-B607>pGL3-B359>pGL3-B93>pGL3-B820.pGL3-B157在3种细胞中的转录激活能力为J558L>HeLa>293T, 且在J558L中的转录激活能力明显强于Hela和293T细胞.结论:BCMA基因5′上游序列"-820 bp～ 145 bp"具有启动子活性, 核心启动子可能位于-93～ 145区域中.     

SNP基因芯片方法的建立及在MTHFR多态性检测中的初步应用

目的 建立单核苷酸多态性（SNP）的基因芯片检测法,并初步应用于结直肠癌患者MTHFR基因位点C677T的多态性检测,分析其位点突变与致病性的关系.方法 采用醛基修饰玻璃基片,阵列检测亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）C677T基因型,生物素标记显色.应用该芯片检测78例结直肠癌患者及40例健康对照组MTHFR基因C677T多态性,并分析MTHFR基因多态性与结直肠癌的相关性.结果 建立检测MTHFR基因SNP的基因芯片.采用基因芯片法检测病例组中MTHFR基因的C677T位点CC、CT、TT基因型分布频率分别为38.5%、53.8%、7.7%,健康对照组中C677T位点CC、CT、TT基因型分布频率分别为35.0%、62.5%、2.5%.结论 成功建立检测SNP的基因芯片法.MTHFR基因位点C677T的基因多态性与结肠癌易感性无明显关系.     

bcr／ab1融合基因在慢性粒细胞白血病中的表达及临床意义

目的探讨bcr／ab1融合基因的表达在慢性粒细胞白血病（CML）中的诊断、疗效及预后观察中的意义。方法采用荧光定量逆转录多聚酶链反应（FQ-PCR）技术，对8例复治CML患者和作为对照组的2例急性非淋巴细胞性白血病患者的骨髓或外周血进行bcr／ab1融合基因检测；同时比较患者的血象、骨髓象等相关实验室指标。结果CML中7例慢性期（CP）和1例急变期（BC）患者，均不同程度地表达了bcr／ab1融合基因，而对照组该融合基因的表达为阴性。结论bcr／ab1基因是CML发病的分子基础，定量检测bcr／ab1融合基因对于CML的诊断、临床分型、疗效观察及预后判断有重要意义。